MR1細胞（中國倉(cang) 鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤）

MR1細胞係是一種雜交瘤細胞係，通過將中國倉(cang) 鼠（Cricetulus griseus）和小鼠B淋巴細胞融合而獲得。MR1細胞是HB-11048的衍生物，主要用於(yu) 生產(chan) 針對CD40配體(ti) （CD154; CD40L; gp39）的單克隆抗體(ti) 。

MR1細胞構建過程

• 免疫接種：使用小鼠T細胞（Th1）進行免疫處理，以刺激小鼠的免疫係統對CD40配體(ti) （CD154；CD40L；gp39）產(chan) 生特異性反應。

• 細胞融合：將免疫後的小鼠脾細胞與(yu) NS-1骨髓瘤細胞融合。NS-1骨髓瘤細胞是一種可以無限增殖的細胞係，常用於(yu) 雜交瘤技術。

• 雜交瘤形成：通過融合中國倉(cang) 鼠細胞與(yu) 小鼠B淋巴細胞，產(chan) 生具有雙重特性的雜交瘤細胞。MR1細胞既具備像骨髓瘤細胞那樣的無限增殖能力，又能夠像B淋巴細胞那樣產(chan) 生針對CD40配體(ti) 的單克隆抗體(ti) 。

MR1細胞特性特征

• MR1細胞產(chan) 生針對CD40配體(ti) （CD154; CD40L; gp39）的IgG單克隆抗體(ti) 。
  

• 檢測在活化的小鼠T細胞上選擇性表達的39 kDa蛋白質。

• MR1細胞具有高效的抗體(ti) 生產(chan) 能力；能夠無限增殖，類似骨髓瘤細胞。

• MR1細胞主要用於(yu) 生產(chan) 單克隆抗體(ti) ，特別是針對CD40配體(ti) 的抗體(ti) 。
  

• 適用於(yu) 免疫學研究，尤其是T細胞和B細胞相互作用的研究。

• 遺傳(chuan) 特征：MR1細胞結合了中國倉(cang) 鼠和小鼠B淋巴細胞的遺傳(chuan) 特性

• 動物用小鼠T細胞（Th1）免疫。
  

MR1細胞（中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤）參數表

MR1中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤培養教程

MR1細胞複蘇

• 預熱37℃水浴。
  

• 準備含有RPMI-1640基礎培養(yang) 基、10% FBS和0.05 mM β-巰基乙醇的培養(yang) 瓶。

• 在生物安全櫃中操作。

• 從(cong) 液氮中取出凍存的MR1細胞管，迅速放入37℃水浴中解凍，輕輕搖動。
  

• 解凍後立即用75%乙醇擦拭管外表麵，轉移到生物安全櫃中。

• 將MR1細胞懸液轉移到15 mL離心管中，加入5 mL預熱的培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄上清。

• 重懸MR1細胞沉澱於(yu) 10 mL新鮮培養(yang) 基中，轉移到培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

MR1細胞培養

• 培養(yang) 條件:37℃, 5% CO2, 95%空氣。

• 換液和傳(chuan) 代:推薦傳(chuan) 代比例: 3×10^5-5×10^5 MR1 cells/mL。

• 推薦換液頻率: 2-3次/周。

• 每次換液前，輕輕搖動培養(yang) 瓶，使MR1細胞均勻懸浮。
  

• 用移液器吸取適量MR1細胞懸液，離心收集細胞（1000 rpm，5分鍾）。

• 棄上清，重懸MR1細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中，按推薦傳(chuan) 代比例進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

MR1細胞凍存

• 預冷凍存管和凍存液。
  

• 收集處於(yu) 對數生長期的MR1細胞，離心（1000 rpm，5分鍾），棄上清。
  

• 重懸MR1細胞於(yu) 預冷凍存液中，細胞濃度約為(wei) 1×10^6-1×10^7 cells/mL。

• 分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 將凍存管置於(yu) -80℃冰箱中過夜，然後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 支原體(ti) 檢測: 定期進行支原體(ti) 檢測，避免汙染影響MR1細胞實驗結果。

• 細胞收集: 離心收集MR1細胞懸液時，請勿直接倒掉細胞培養(yang) 液。

• 識別特征: MR1細胞多為(wei) 多邊形，培養(yang) 液一般會(hui) 變渾濁。

MR1細胞傳代頻率對實驗結果的影響

• 細胞狀態

• 適當的傳(chuan) 代頻率（推薦2-3次/周）可以保持MR1細胞處於(yu) 良好的生長狀態，有利於(yu) 獲得穩定的實驗結果。

• 傳(chuan) 代過於(yu) 頻繁可能導致MR1細胞生長不穩定，影響細胞活力和功能。

• 傳(chuan) 代間隔過長可能使MR1細胞過度生長，導致營養(yang) 不足和代謝產(chan) 物積累，影響細胞狀態。

  
  

• 抗體(ti) 產(chan) 量

• MR1細胞主要用於(yu) 生產(chan) 抗CD40配體(ti) 的單克隆抗體(ti) ，傳(chuan) 代頻率會(hui) 影響抗體(ti) 的產(chan) 量和質量。

• 保持適當的傳(chuan) 代頻率有助於(yu) 維持MR1細胞的抗體(ti) 分泌功能，獲得穩定的抗體(ti) 產(chan) 量。

  
  

• 實驗重複性

• 統一的傳(chuan) 代頻率有助於(yu) 保持不同批次MR1細胞的一致性，提高實驗的重複性和可靠性。

• 不規律的傳(chuan) 代可能導致MR1細胞狀態波動，影響實驗結果的一致性。

  
  

• 細胞特性

• 長期培養(yang) 和頻繁傳(chuan) 代可能導致MR1細胞特性發生變化，影響其分子和功能特征。

• 保持推薦的傳(chuan) 代頻率有助於(yu) 維持MR1細胞的原有特性。

  
  

• 汙染風險

• 過於(yu) 頻繁的傳(chuan) 代操作可能增加MR1細胞汙染的風險，影響實驗結果的準確性。