
P388D1細胞(小鼠淋巴樣瘤細胞)
- 來源:淋巴瘤
- 細胞特征:懸浮細胞,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% HS+1% P/S
- 其他:在脂多糖(LPS)和佛波酯的誘導下可產(chan) 生白細胞介素-1(IL-1);能產(chan) 生溶菌酶;細胞表麵免疫球蛋白(sIg)陰性
P388D1是源自起源於(yu) 甲基膽蒽(MCA)誘導的小鼠淋巴瘤,通過使用化學誘變劑甲基膽蒽處理小鼠,致其體(ti) 內(nei) 形成淋巴瘤後從(cong) 中分離,常用於(yu) 免疫學研究。
P388D1細胞特性特征
P388D1細胞表現出單核細胞、巨噬細胞樣特征
P388D1細胞具有吞噬能力,可吞噬酵母多糖和乳膠微球
在抗體(ti) 依賴的、細胞介導的細胞毒係統中具有活性
分子特征:在脂多糖(LPS)和佛波酯的誘導下可產(chan) 生白細胞介素-1(IL-1)、能產(chan) 生溶菌酶、細胞表麵免疫球蛋白(sIg)陰性
致瘤性:P388D1細胞在裸小鼠中具有致瘤性,皮下接種1×10^7個(ge) 細胞後,21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)發生腫瘤
病毒檢測:P388D1細胞鼠痘病毒檢測呈陰性
P388D1細胞參數表
細胞名稱 | P388D1細胞(小鼠淋巴樣瘤細胞) |
別稱 | P-388D1; P388-D1; P388.D1; P3 88 D1 |
物種 | 小鼠 (Mus musculus) |
組織來源 | 淋巴瘤 |
細胞類型 | 單核細胞/巨噬細胞樣 |
形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
保藏編號 | ATCC: CCL-46 |
來源建係方法 | 甲基膽蒽(MCA)誘導;化學誘變 |
致瘤性 | 是;裸鼠皮下接種1×10^7個細胞21天內100%致瘤(5/5) |
表麵標誌 | 細胞表麵免疫球蛋白(sIg)陰性 |
細胞因子產生 | 在LPS和佛波酯誘導下產生IL-1 |
酶活性 | 產生溶菌酶 |
吞噬能力 | 可吞噬酵母多糖和乳膠微球 |
細胞毒性 | 在抗體依賴的、細胞介導的細胞毒係統中有活性 |
基礎培養基 | RPMI-1640+10% 馬血清 (HS)+1% 青黴素/鏈黴素 (P/S) |
培養條件 | 37°C,5% CO2 |
凍存條件 | 55%培養基+40%FBS+5%DMSO;液氮保存 |
推薦接種密度 | 2-5×10^5個/mL |
換液頻率 | 2~3次/周 |
生物安全等級 | BSL-1 |
鼠痘病毒 | 陰性 |
主要用途 | 免疫學研究、腫瘤生物學研究、藥物篩選 |
誘導條件 | LPS和佛波酯可誘導細胞因子產生 |
培養注意事項 | 避免過度生長,保持適當密度;輕柔操作避免細胞損傷 |
培養教程
P388D1小鼠淋巴樣瘤細胞培養教程
P388D1細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出P388D1細胞凍存管,迅速放入37°C的水浴中解凍,輕輕搖動凍存管,直至P388D1細胞完全解凍(約1-2分鍾)。
用70%乙醇消毒凍存管外表麵,轉移至無菌操作台。
將解凍後的P388D1細胞懸液轉移到15 mL離心管中,加入10 mL預熱的RPMI-1640培養(yang) 基。
以1000 rpm離心5分鍾,棄上清液,保留P388D1細胞沉澱。
用10 mL新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基重懸P388D1細胞,轉移至培養(yang) 瓶中。
P388D1細胞培養
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) ,適合P388D1細胞的生長環境。
初始接種密度為(wei) 2-5×10^5個(ge) /mL。
每2-3天更換一次培養(yang) 基,保持P388D1細胞在適當的密度範圍內(nei) (2-5×10^5個(ge) /mL)。
當P388D1細胞密度達到適當水平時(通常為(wei) 2-5×10^6個(ge) /mL),進行傳(chuan) 代。
吸取適量P388D1細胞懸液,稀釋至所需濃度,轉移至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。
P388D1細胞凍存
凍存液配製:凍存液配方:55% RPMI-1640培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO,適用於(yu) P388D1細胞的凍存。
將P388D1細胞懸液轉移至離心管中,以1000 rpm離心5分鍾,棄上清液。
用適量凍存液重懸P388D1細胞,細胞密度為(wei) 1×10^6個(ge) /mL。
將重懸後的P388D1細胞分裝至凍存管中,每管1 mL。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,以-1°C/min降溫至-80°C,隨後轉移至液氮中長期保存。
注意事項
無菌操作:全過程需在無菌條件下操作,防止P388D1細胞汙染。
定期顯微鏡下觀察P388D1細胞形態,確保細胞狀態良好,無汙染。
培養(yang) 基更換:更換培養(yang) 基時,注意輕柔操作,避免P388D1細胞損傷(shang) 。
P388D1細胞密度控製:保持P388D1細胞在適當密度範圍內(nei) ,防止過度生長影響細胞狀態。
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