
daudi細胞(人Burkitt's淋巴瘤細胞)
- 來源:外周血;B淋巴母細胞;Burkitt's淋巴瘤
- 細胞特征:懸浮細胞 , 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:daudi細胞表麵免疫球蛋白陽性(sIg+),β2-微球蛋白陰性。對EBNA(Epstein-Barr核抗原)、VCA(衣殼抗原)呈陽性。
Daudi人Burkitt's淋巴瘤細胞係由E. Klein和G. Klein於(yu) 1967年從(cong) 一名16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者的外周血中分離出的B淋巴細胞。Daudi細胞用於(yu) 白血病發生研究。
Daudi細胞係具有人的雄性核型,幹細胞數為(wei) 46。其中66%的細胞是二倍體(ti) ,在幹細胞係內(nei) 是穩定的。
Daudi細胞具有致瘤性。其表達標記為(wei) Fc,表達同工酶G6PD和B。Daudi細胞對β-2-微球蛋白呈陰性,對EBNA、VCA和表麵免疫球蛋白(sIg+)呈陽性。ATCC通過PCR證實該細胞係對EBV病毒DNA序列的存在呈陽性。
daudi細胞特性
1967年由E. Klein和G. Klein從(cong) 一名16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者的外周血中分離建立,用於(yu) 白血病研究。
daudi細胞是B淋巴細胞,表現為(wei) 典型的淋巴母細胞樣形態。
daudi細胞表麵免疫球蛋白陽性(sIg+),β2-微球蛋白陰性。對EBNA(Epstein-Barr核抗原)、VCA(衣殼抗原)呈陽性。
攜帶EB病毒。
人類雄性核型,細胞數為(wei) 46,穩定的二倍體(ti) 核型。表達Fc標記。
daudi細胞在裸鼠中具有致瘤性,能在瓊脂中形成克隆。
PCR證實對EBV病毒DNA序列的陽性反應。
daudi細胞參數表
細胞名稱 | Daudi細胞(人Burkitt's淋巴瘤細胞) |
別稱 | DAUDI; NK-10A; NK-10a; GM03190; GM3190; GM17346 |
來源患者 | 16歲黑人男性,Burkitt's淋巴瘤患者 |
組織來源 | 外周血 |
細胞類型 | B淋巴細胞,表現為典型的淋巴母細胞樣形態 |
應用領域 | 白血病發生機理研究 |
免疫表型 | 表麵免疫球蛋白陽性(sIg+),β2-微球蛋白陰性;對EBNA、VCA陽性 |
病毒攜帶情況 | 攜帶EB病毒 |
細胞遺傳學 | 人類雄性核型,染色體數為46,66%的細胞為二倍體,核型穩定 |
表達標記 | Fc,表達 |
同工酶 | G6PD,B |
PCR結果 | 對EBV病毒DNA序列陽性 |
致瘤性 | 在裸鼠中具有致瘤性,能在瓊脂中形成克隆 |
倍增時間 | 24-48小時 |
染色體分析 | 46,XY |
生物安全等級 | BSL-2 |
受體表達情況 | complement, expressed; Fc, expressed |
支原體檢測 | 陰性 |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 氣相:95%空氣+5% CO2;溫度:37℃ |
傳代比例 | 1:2-1:4,每2-3天換液一次 |
傳代周期 | 24-48小時 |
凍存條件 | 60%基礎培養基+30% FBS+10% DMSO,液氮儲存 |
推薦傳代比例 | 3×10^5-5×10^5 cells/mL |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
注意事項 | 該細胞為懸浮細胞,注意離心收集細胞懸液;勿直接倒掉細胞培養液 |
保藏機構 | ATCC; CCL-213; BCRC; 60192; Coriell; GM03190; GM17346; DSMZ; ACC-78; ECACC; 85011437; 94071449 |
培養教程
daudi人Burkitt's淋巴瘤細胞培養
細胞特性
生長方式: Daudi細胞懸浮略成團生長
細胞形態: 略不規則圓形,透光性良好,大小較均一,偶爾可看見個(ge) 別體(ti) 積較大的細胞
顯微特性: 鏡下看Daudi細胞胞質飽滿,背景幹淨
生長速度: 中等(一般為(wei) 3-4×10^6個(ge) 細胞在10cm皿中兩(liang) 天內(nei) 長滿)
Daudi細胞傳代步驟
觀察細胞密度: 當Daudi細胞密度達到70-80%時,可進行細胞傳(chuan) 代。
預熱培養(yang) 基: 在37°C水浴鍋中預熱培養(yang) 基。
收集細胞懸液: 將Daudi細胞懸液全部轉移到15ml離心管中。
離心: 室溫下300g離心3分鍾,倒掉上清,用手輕彈Daudi細胞沉澱。
重懸細胞: 用5ml預熱好的培養(yang) 基重懸混勻Daudi細胞,吸取10ul細胞懸液,稀釋10倍後進行計數。
傳(chuan) 代培養(yang) : 在10cm皿中提前加入9ml培養(yang) 基,將大約3-4×10^6個(ge) Daudi細胞轉移到10cm皿中混勻,總培養(yang) 基量為(wei) 10ml。
靜置培養(yang) : 放入37°C、5% CO2孵箱中靜置培養(yang) 。
注意事項
Daudi細胞為(wei) 懸浮細胞,注意在傳(chuan) 代和收集過程中使用離心法收集細胞懸液。
請勿直接倒掉Daudi細胞培養(yang) 液,應先通過離心法回收細胞。
傳(chuan) 代過程中,培養(yang) 基要在37°C水浴中預熱,以防止溫度變化對Daudi細胞的影響。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,24 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 8,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 10,12 |
D18S51 | 16,18 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 34,35 |
FGA | 21,26 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 7,9 (ATCC=CCL-213; DSMZ=ACC-78; PubMed=25877200) |
9 (CCRID) | |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 15,17 |