
Farage細胞(人B淋巴瘤細胞)
- 來源:彌漫大B淋巴瘤;淋巴結轉移
- 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Farage細胞對EB病毒呈陽性反應
Farage人B淋巴瘤細胞是一種源自彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)患者的B淋巴細胞係,由H Ben-Bassat在1990年建係,被廣泛用於(yu) 免疫學研究。
Farage細胞特性
Farage細胞屬於(yu) B淋巴細胞係。
Farage細胞不表達表麵或細胞質免疫球蛋白。
Farage細胞染色體(ti) 組成為(wei) 11號染色體(ti) 三體(ti) 。
抗原表達:CD10+/-、CD11a+、CD19+、CD20+、CD21+、CD22+、CD23+、CD29(VLA-4)+、CD38+、CD39+、CD40+、CD44+、CD54+(ICAM-1)、CD58+(LFA-3)、HLA DR+。不表達CD23-。
Farage細胞經IL-4處理後,CD23、CD54和CD58表達上調,CD21、CD22和CD38表達下調,IL-4孵育6至8天可導致CD11a、CD39、CD40的表達增加,CD21和CD38的消失。
Farage細胞暴露於(yu) 佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯(PMA)下調CD21和CD23的表達。
Farage細胞不表達末端脫氧核苷酸轉移酶基因(TdT),也不表達重組激活基因RAG-1和RAG-2,它們(men) 被稱為(wei) 前B細胞階段的標誌物。這些結果表明,Farage代表成熟的B細胞,而不是前B細胞。
Farage細胞對EB病毒呈陽性反應。
Farage細胞參數表
名稱 | Farage細胞 (人B淋巴瘤細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | FARAGE; Farage OL; Farage Original Line |
種屬 | 人 |
來源 | 彌漫性大B淋巴瘤(DLBCL);淋巴結轉移;白人女性;70歲 |
年齡(性別) | 成人(女性) |
組織來源 | 源自轉移部位:淋巴結 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 淋巴瘤細胞 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
生物安全等級 | BSL-2 |
抗原表達 | CD10+/-、CD11a+(LFA-1)、CD19+、CD20+、CD21+、CD22+、CD23+ 、CD29(VLA-4)+、CD38+、CD39+、CD40+、CD44+、CD54+(ICAM-1)、 CD58+(LFA-3)、HLA DR+ |
IL-4處理反應 | CD23、CD54和CD58表達上調;CD21、CD22和CD38表達下調;CD11a、CD39、CD40表達增加 |
PMA處理反應 | CD21和CD23表達下調 |
免疫球蛋白表達 | 不表達表麵或細胞質免疫球蛋白 |
遺傳特征 | 不表達TdT、RAG-1和RAG-2,表明成熟B細胞特征 |
病毒感染狀態 | EB病毒陽性反應 |
細胞汙染檢測 | HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
染色體 | 11號染色體三體 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;無血清細胞凍存液;溫度:液氮 |
培養基 | 生長培養基:RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S; |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
傳代方法 | 1:3傳代,2-3天傳一代 |
注意事項 | 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。 |
保藏機構 | ATCC; CRL-2630 |
培養教程
Farage人B淋巴瘤細胞培養
為(wei) 確保Farage細胞存活率最高,在收到後盡快解凍小瓶並啟動培養(yang) 。如果需要繼續冷凍保存,應存放在液氮蒸汽相,而不是在-70°C。在-70°C存放會(hui) 導致存活率下降。
解凍小瓶時,請在37°C水浴中輕輕搖動。為(wei) 減少汙染可能性,保持O形環和蓋子不進入水中。解凍應迅速進行(約2分鍾)。
一旦內(nei) 容物解凍,請立即從(cong) 水浴中取出,並用70%乙醇浸泡或噴灑消毒。從(cong) 此步驟開始,所有操作都應在嚴(yan) 格無菌條件下進行。
建議立即去除冷凍保護劑。將細胞懸濁液以約125 x g的速度離心5至10分鍾。 將細胞沉澱轉移到合適大小的容器中(請參閱特定批次信息,了解推薦的稀釋比例)。
在細胞恢複過程中,避免培養(yang) 基堿度過高是很重要的。建議在添加小瓶內(nei) 容物之前,將含有生長培養(yang) 基的培養(yang) 容器放入孵育箱中至少15分鍾,以使培養(yang) 基達到正常pH(7.0至7.6)。
在適當的孵育箱中以37°C孵育Farage細胞。如果使用本產(chan) 品說明書(shu) 上描述的培養(yang) 基,建議在5% CO2和空氣的氣氛中培養(yang) 。
傳代程序
通過添加新培養(yang) 基或更換培養(yang) 基維持Farage細胞的培養(yang) 。另外,可以通過離心和隨後的懸浮將細胞重新建立在3 - 5 x 105 viable cells/mL的濃度。保持細胞密度在3 x 105和3 x 106 viable cells/mL之間。
培養(yang) 液更換:每2至3天添加新培養(yang) 基(根據細胞密度而定)。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12,13 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29 |
FGA | 20,23 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 8,9 |
TPOX | 9 |
vWA | 14,15 |
