
YAC-1細胞(小鼠淋巴瘤細胞係)
- 來源:淋巴瘤
- 細胞特征:懸浮細胞,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:YAC-1細胞係由莫洛尼氏白血病病毒誘導產(chan) 生,具有高度轉化性和腫瘤形成能力
YAC-1細胞係是一種從(cong) AKR小鼠中分離出來的淋巴瘤細胞,最早由Kiessling等人在1975年建立。YAC-1細胞是通過將莫洛尼小鼠白血病病毒(Mo-MuLV)接種到新生A/Sn小鼠體(ti) 內(nei) 後誘導產(chan) 生的。YAC-1細胞形態類似於(yu) 淋巴母細胞,具有懸浮生長的特性,並且表現出高度轉化和腫瘤形成的能力。由於(yu) YAC-1細胞對自然殺傷(shang) (NK)細胞的活性非常敏感,因此常被用作檢測NK細胞活性的模型。
YAC-1細胞特性特征
永生法:莫洛尼小鼠白血病病毒(Mo-MuLV)誘導
生長特性:YAC-1細胞高度轉化性,具有強大的腫瘤形成能力
病毒狀態:YAC-1細胞對鼠痘病毒呈陰性,確保其在實驗中的純度和可靠性。
抗原表達:YAC-1細胞表達多種與(yu) NK細胞相關(guan) 的抗原,能夠被特定的抗體(ti) 識別,適合用於(yu) 免疫學研究。
免疫表型:YAC-1細胞對自然殺傷(shang) (NK)細胞的活性敏感、常用作NK細胞的靶細胞
基因組特征:YAC-1細胞攜帶多個(ge) 整合的莫洛尼氏白血病病毒的基因,這些基因可能影響細胞的增殖和轉化特性
YAC-1細胞參數表
細胞名稱 | YAC-1細胞(小鼠淋巴瘤細胞) |
別名 | Yac-1; YAC |
細胞來源 | Mo-MuLV誘導的A/Sn小鼠淋巴瘤 |
細胞物種 | 小鼠 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
培養基 | RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) |
培養條件 | 溫度:37°C;氣相:空氣95%,二氧化碳5% |
傳代方法 | 1:2 傳代 |
適宜細胞密度 | 1-5 x 10^6 細胞/mL |
凍存條件 | 無血清細胞凍存液 |
凍存方法 | 8% DMSO + 92% 胎牛血清 |
病毒狀態 | 鼠痘病毒陰性 |
特征抗原 | 表達NK細胞相關抗原(如NKG2D, CD16等) |
基因特征 | 整合Mo-MuLV基因 |
檢測 | 支原體檢測陰性 |
細胞增殖速率 | 通常在24小時內可增殖2-3倍 |
轉化狀態 | 高度轉化性,具有腫瘤形成能力 |
細胞存活率 | 複蘇後細胞存活率通常在80%以上 |
應用 | NK細胞活性檢測、腫瘤免疫研究、細胞間相互作用研究 |
存儲溫度 | -80°C(長期存儲) |
傳代周期 | 每2-3天傳代一次 |
培養瓶類型 | T25或T75培養瓶 |
注意事項 | 僅供科研使用,不可用於醫藥、臨床等領域 |
培養教程
YAC-1小鼠淋巴瘤細胞培養教程
YAC1細胞複蘇
將凍存的YAC1細胞懸液(約1mL)迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍,輕輕搖動以加速解凍過程。
解凍後,立即加入5mL預熱的完全培養(yang) 基,輕輕混勻後,置於(yu) 1000 RPM離心機中離心5分鍾。
小心棄去上清液,加入4-6mL新鮮完全培養(yang) 基,充分吹打使YAC1細胞重新懸浮。
將YAC1細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿中,置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
次日更換培養(yang) 基,並檢查YAC1細胞的密度和狀態。
YAC1細胞傳代
當YAC1細胞的密度達到80%-90%時,可以進行傳(chuan) 代。
將培養(yang) 基轉移至離心管中,加入適量PBS輕輕洗滌YAC1細胞。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,並在37°C孵育2-3分鍾。輕拍培養(yang) 瓶以幫助YAC1細胞脫離。
加入等量的完全培養(yang) 基終止消化,並吹打使YAC1細胞形成單細胞懸液。
以1:2至1:3的比例接種至新的培養(yang) 瓶中,並加入適量新鮮的完全培養(yang) 基。
將YAC1細胞置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
YAC1細胞培養基更換
每2-3天更換一次新鮮的完全培養(yang) 基,以維持YAC1細胞的最佳生長狀態。
更換培養(yang) 基時,注意避免吸到YAC1細胞,確保YAC1細胞懸浮在培養(yang) 基中。
加入預熱至37°C的新鮮完全培養(yang) 基,繼續培養(yang) YAC1細胞。
YAC1細胞凍存
收集處於(yu) 對數生長期的YAC1細胞,並通過離心法收集YAC1細胞。
使用無血清凍存液重懸YAC1細胞,並將YAC1細胞密度調整至5×10⁶至1×10⁷ cells/mL。
將YAC1細胞懸液分裝至凍存管中,密封並標記清楚。
先將YAC1細胞凍存管置於(yu) -80°C冰箱中進行緩慢凍存,24小時後轉移至液氮罐中進行長期保存。
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