
SVEC4-10細胞(小鼠淋巴結內(nei) 皮細胞)
- 來源:腋窩淋巴結
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10%FBS+1% P/S
- 其他:SVEC4-10細胞係通過SV40轉化獲得了持續增殖的能力,表現出與(yu) 正常內(nei) 皮細胞相似的分化特性
SVEC4-10細胞係來源於(yu) 通過SV40病毒(菌株4A)轉化成年雄性C3H/HeJ小鼠腋窩淋巴結中的血管內(nei) 皮細胞。SVEC4-10細胞係具備無限增殖的能力,在體(ti) 外培養(yang) 中無需添加特殊生長因子便能持續生長。
SVEC4-10細胞表現出良好的分化能力,能夠對多種細胞因子和細胞外基質信號(如白細胞介素、腫瘤壞死因子α)作出反應,表現出類似於(yu) 正常內(nei) 皮細胞的管狀分化。
SVEC4-10細胞係能夠與(yu) 小鼠淋巴細胞特異性結合,並表達主要組織相容性複合體(ti) I類抗原H-2k,同時對抗SV40 H-2k CTL克隆敏感,易發生裂解反應。SVEC4-10細胞還表達血管細胞粘附分子(VCAM)和SV40T抗原,染色結果呈陽性。這些特性使得SVEC4-10細胞在3D細胞培養(yang) 、淋巴係統研究、免疫學和血管生物學研究中具有重要的應用價(jia) 值。
SVEC4-10細胞特性特征
無限增殖:SVEC4-10細胞能夠在沒有特殊添加劑的情況下持續生長,顯示出良好的增殖能力。在長期實驗中使用該細胞係而無需頻繁添加生長因子。
在合成基底膜上,SVEC4-10細胞能夠形成管狀分支結構,類似於(yu) 正常內(nei) 皮細胞的分化特性。
在腫瘤壞死因子α(TNF-α)的誘導下,SVEC4-10細胞能夠發生可逆的向紡錘形形態轉變。
SVEC4-10細胞表達H-2k抗原,這使得它們(men) 能夠與(yu) 小鼠淋巴細胞特異性結合。SVEC4-10細胞表達VCAM,有助於(yu) 細胞間的粘附和信號傳(chuan) 遞。
SVEC4-10細胞對幹擾素γ(IFN-γ)的刺激能夠誘導MHC II類抗原的表達,表現出與(yu) 正常內(nei) 皮細胞相似的反應。此外,它們(men) 對某些白細胞介素和細胞外基質信號表現出反應,促進管狀分化。
SVEC4-10細胞對SV40 T抗原呈陽性染色,顯示出其轉化特性。
SVEC4-10細胞參數表
細胞名稱 | SVEC4-10細胞(小鼠淋巴結內皮細胞) |
別稱 | SVEC 4-10 |
物種 | 小鼠 |
細胞來源 | 成年雄性C3H/HeJ小鼠的腋窩淋巴結內皮細胞 |
轉化方式 | SV40(4A株)病毒轉化 |
細胞類型 | 內皮細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
培養基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 37°C,5% CO2 |
傳代信息 | 傳代比例:1:2 - 1:3;頻率:每周2-3次;細胞密度:1×10^6 cells/T25培養瓶 |
細胞狀態 | 細胞活性高,狀態良好 |
無限增殖 | 在沒有特殊添加劑的情況下可無限增殖 |
分化能力 | 在合成基底膜上形成管狀分支結構 |
形態變化 | 在腫瘤壞死因子α(TNF-α)誘導下發生可逆的向紡錘形形態轉變 |
免疫表型 | 表達主要組織相容性複合體I類抗原H-2k,易被抗SV40 H-2k CTL克隆裂解 |
細胞因子反應 | 對幹擾素γ(IFN-γ)刺激誘導MHC II類抗原的表達,響應白細胞介素和細胞外基質信號 |
SV40轉化特征 | 對SV40 T抗原呈陽性染色 |
應用領域 | 淋巴係統、免疫學、血管生物學、癌症研究等 |
培養教程
SVEC4-10小鼠淋巴結內皮細胞培養教程
傳代操作
吸去 SVEC4-10細胞 培養(yang) 基,用PBS緩衝(chong) 液洗滌細胞層2次。
加入預熱的胰酶-EDTA溶液(0.25%胰酶,0.02%EDTA),在37°C下孵育2-3分鍾,直到 SVEC4-10細胞 層開始脫落。
加入等量的完全培養(yang) 基終止消化反應,確保 SVEC4-10細胞 的完整性。
將 SVEC4-10細胞 懸液移入離心管,1000rpm離心5分鍾。
小心吸去上清,用完全培養(yang) 基重懸 SVEC4-10細胞。
按1:2-1:3的比例將 SVEC4-10細胞 接種到新的培養(yang) 瓶中。
每周傳(chuan) 代2-3次,確保 SVEC4-10細胞 維持健康的生長狀態。
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的 SVEC4-10細胞管,迅速置於(yu) 37°C水浴中,輕輕搖晃至冰塊完全融化。
將 SVEC4-10細胞 懸液移入15mL離心管,加入5-10mL預熱的完全培養(yang) 基。
以1000rpm離心5分鍾,去除凍存保護劑。
小心吸去上清,用預熱的完全培養(yang) 基重懸SVEC4-10細胞。
將 SVEC4-10細胞 懸液接種到T25培養(yang) 瓶中,加入適量培養(yang) 基。
將 SVEC4-10細胞 置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中孵育,直至 SVEC4-10細胞 複蘇並達到適宜的生長狀態。
注意事項
操作過程中必須嚴(yan) 格遵循無菌技術,避免 SVEC4-10細胞 培養(yang) 過程中的汙染。
胰酶消化時間需根據實際情況調整,確保 SVEC4-10細胞 不受過度處理影響。
傳(chuan) 代過程中,應輕柔操作,避免對SVEC4-10細胞 造成機械損傷(shang) 。
定期觀察 SVEC4-10細胞 的生長情況,及時更換培養(yang) 基和傳(chuan) 代。
在 SVEC4-10細胞 凍存前,確保細胞處於(yu) 良好的生長狀態,且細胞密度適中。
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