NCI-H292細胞係【人肺癌細胞(淋巴結轉移)】

NCI-H292細胞係源自肺粘液表皮樣癌（也稱為(wei) 肺粘液上皮樣癌）的淋巴結轉移，最初從(cong) 一名32歲的黑人女性患者的淋巴結轉移部位分離。
NCI-H292細胞具有上皮細胞樣的形態，呈貼壁生長，並在亞(ya) 顯微結構上保留了粘膜上皮細胞的特征。NCI-H292細胞對乙型肝炎病毒（HBV）具有易感性，能夠支持HBV的生長。

NCI-H292細胞是一個(ge) 染色體(ti) 計數接近二倍體(ti) 的人類細胞係。模式染色體(ti) 數目為(wei) 47，出現在36%的細胞中。倍體(ti) 計數較高的細胞率為(wei) 3.9%。大多數細胞共有12個(ge) 標記。其中包括del（1）（q32.1）、der（5）t（5；13）（p15.33；q11）、i（5p）、der⑴t（1；？）（p34.3；？）和der（6）t（6；7）（p25.3；q21.2）。所有標記物均以單拷貝形式存在於(yu) 每個(ge) 細胞中。正常的N1和N6缺失。有兩(liang) 條正常的X染色體(ti) 。未發現其他異常。

NCI-H292細胞係具有以下分子、表達和基因特征：

• 分子特征：保留了粘膜上皮細胞的特性，在亞(ya) 顯微結構上表現出這一特點；表現出多種鱗狀上皮分化標記；

• 表達特征：角蛋白（Keratin）表達陽性、波形蛋白（Vimentin）表達陽性、黏液洋紅（Mucicarmine）染色呈陽性、神經絲(si) 三聯蛋白（Neurofilament triplet protein）表達陰性；

• 與(yu) HLA特異性的人同種異體(ti) 抗血清的反應性：（A1；A3；A10；A19；B12；B17；B22；和B40交叉反應基團）
  

• 基因特征：左旋多巴脫羧酶（L-DOPA decarboxylase）表達陰性；對乙型肝炎病毒（HBV）具有高度感染性，可用於(yu) 研究HBV相關(guan) 基因在病毒性肝炎和肝癌發生中的作用；

• NCI-H292細胞能夠在裸小鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤
  

NCI-H292細胞係參數表

NCI-H292人肺癌細胞係培養教程

NCI-H292細胞複蘇操作

• 將水浴鍋預熱至37°C。

• 快速解凍NCI-H292細胞，約1-2分鍾。

• 將細胞懸液轉移到含15ml預熱完全培養(yang) 基的50ml離心管中。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用5ml完全培養(yang) 基重懸NCI-H292細胞。

• 將細胞懸液轉移到T25培養(yang) 瓶中。

• 置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

NCI-H292細胞換液

• 頻率： 每2-3天換液一次。

• 方法： 吸出舊培養(yang) 基，加入預熱的新鮮完全培養(yang) 基。

NCI-H292細胞傳代

• 時機： 當NCI-H292細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 比例： 1:2 至 1:4。

• 步驟：

• a. 吸出培養(yang) 基，用PBS洗滌NCI-H292細胞1-2次。

• b. 加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分鍾。

• c. 顯微鏡下觀察NCI-H292細胞變圓並開始脫落。

• d. 加入含血清的完全培養(yang) 基終止消化。

• e. 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• f. 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H292細胞。

• g. 按所需比例將NCI-H292細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 操作過程中保持NCI-H292細胞無菌條件。

• 使用前將培養(yang) 基、PBS等預熱至37°C。

• 避免NCI-H292細胞過度消化。

• 定期檢查NCI-H292細胞培養(yang) 是否有汙染。

• 建議使用低代數NCI-H292細胞（<20代）。

NCI-H292細胞凍存

• 密度： 1-5 x 10^6 cells/ml。

• 凍存介質： 90% 完全培養(yang) 基 + 10% DMSO。

• 凍存方法： 緩慢降溫後轉入-80°C冰箱或液氮中長期保存。

NCI-H292細胞安全注意事項

• 生物安全等級： BSL-2，需要在生物安全櫃中操作。

• 個(ge) 人防護： 操作時需穿戴實驗服、手套等個(ge) 人防護裝備。

• 廢棄物處理： NCI-H292細胞培養(yang) 廢液和接觸過NCI-H292細胞的耗材需要進行滅菌處理後再丟(diu) 棄。

• 避免接觸： 操作過程中避免直接接觸NCI-H292細胞或培養(yang) 液，防止意外感染。

• 無菌操作： 嚴(yan) 格遵守無菌操作規程，避免汙染。

• 細胞來源： 注意NCI-H292細胞來源於(yu) 人體(ti) 腫瘤組織，可能攜帶未知病原體(ti) 。

• 細胞鑒定： 定期進行STR鑒定，確保NCI-H292細胞係純度。

• 記錄保存： 詳細記錄NCI-H292細胞培養(yang) 過程和處理方法。

• 僅(jin) 用於(yu) 研究： NCI-H292細胞僅(jin) 限於(yu) 科學實驗研究使用，不得用於(yu) 其他目的。