NCI-H2452人間皮瘤細胞

NCI-H2452人間皮瘤細胞是一種從(cong) 男性間皮瘤患者肺部分離出的具有上皮形態的細胞係，由美國國家癌症研究所（NCI）於(yu) 1990年11月從(cong) 一位男性非吸煙間皮瘤患者的肺部組織中分離建立。

NCI-H2452細胞呈現上皮樣細胞以貼壁方式生長，具有角蛋白表達等典型間皮細胞特征，可能攜帶如CDKN2A/ARF缺失、NF2突變等間皮瘤相關(guan) 基因改變。

NCI-H2452人間皮瘤細胞分子特征與基因特征

• 分子特征：角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性，表明該細胞表達角蛋白，這是間皮細胞的一個(ge) 典型特征。

• 基因特征：可能攜帶間皮瘤相關(guan) 的基因突變或異常表達，如CDKN2A/ARF缺失、NF2突變等。

NCI-H2452人間皮瘤細胞參數表

NCI-H2452人間皮瘤細胞培養教程

NCI-H2452細胞複蘇

• 解凍: 從(cong) 液氮中取出凍存管，迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍。

• 轉移: 將NCI-H2452細胞懸液轉移到含有預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 離心: 以900rpm離心3-5分鍾。

• 重懸: 棄去上清，用完全培養(yang) 基重懸NCI-H2452細胞。

• 培養(yang) : 將NCI-H2452細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

日常培養

• 換液周期: 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 培養(yang) 基體(ti) 積: T25瓶使用10-12ml，10cm培養(yang) 皿使用12-15ml。

• 觀察: 定期觀察NCI-H2452細胞的生長狀態，注意可能出現的黑點。

NCI-H2452細胞傳代

• 達到密度: 當NCI-H2452細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 洗滌: 棄去舊培養(yang) 基，用PBS輕輕衝(chong) 洗NCI-H2452細胞1-2次。

• 消化: 加入適量胰酶，37℃消化（NCI-H2452細胞貼壁較弱，需嚴(yan) 格控製消化時間）。

• 觀察: 每隔2-3分鍾觀察一次NCI-H2452細胞狀態，當細胞間隙變大、細胞趨於(yu) 圓形但未完全脫落時，立即終止消化。

• 終止消化: 加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化。

• 離心: 以900rpm離心3-5分鍾。

• 重懸: 棄去上清，用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H2452細胞。

• 接種: 按1:2到1:4的比例將NCI-H2452細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 操作: 操作時輕柔吹打NCI-H2452細胞，避免產(chan) 生過多氣泡。

• 觀察: 定期觀察NCI-H2452細胞形態和生長狀態，保持無菌操作以預防汙染。

• 消化時間: 嚴(yan) 格控製NCI-H2452細胞的消化時間，避免過度消化。

NCI-H2452細胞凍存

• 凍存液: 使用92% FBS + 8% DMSO或92% 完全培養(yang) 基 + 8% DMSO作為(wei) 凍存液。

• 細胞密度: 調整至200-300萬(wan) /ml。

• 分裝: 每管分裝1ml NCI-H2452細胞懸液。

• 程序降溫:4℃靜置5-10分鍾；-20℃靜置2小時；-80℃過夜；轉入液氮長期保存

培養中的常見問題

• 黑點: 培養(yang) 時NCI-H2452細胞可能出現黑點較多的情況。

• 貼壁較弱: NCI-H2452細胞貼壁較弱，容易脫落。