NCIH1373細胞（人肺腺癌細胞）

NCI-H1373細胞是源自於(yu) 一名56歲黑人男性肺腺癌患者的細胞係，建立於(yu) 1986年3月。該患者有著顯著的吸煙史，年吸煙量約為(wei) 30包，並且在確診後接受過化療和放療。NCIH1373細胞係的來源是從(cong) 患者的肺腺癌組織中分離出的腫瘤細胞，癌症分期為(wei) 3A期。

NCIH1373細胞的生長速度較慢，表現為(wei) 典型的上皮樣形態，適合貼壁培養(yang) 。NCIH1373細胞係在肺腺癌及相關(guan) 癌症研究中具有重要的應用價(jia) 值，特別是在研究腫瘤細胞對吸煙、化療及放療等因素的響應機製方麵。

NCIH1373細胞特性特征

• 染色體(ti) 特征：細胞的染色體(ti) 數量為(wei) 60，範圍在52至118之間，並存在染色體(ti) 片段缺失（如p14）。

• 基因突變：NCIH1373細胞係可能攜帶與(yu) 肺腺癌相關(guan) 的基因突變，例如p53基因突變，這在許多非小細胞肺癌中常見。
  

• 表達特征：NCIH1373細胞可能表達某些腫瘤標誌物和受體(ti) ，具體(ti) 的抗原表達需通過免疫組化或其他分子生物學方法進行驗證。

• 癌症研究：NCIH1373細胞係廣泛用於(yu) 肺腺癌的基礎研究和臨(lin) 床前藥物篩選。研究人員利用該細胞係探索腫瘤生物學、藥物響應和耐藥機製等。
  

• 3D培養(yang) ：NCIH1373細胞係適合用於(yu) 三維培養(yang) 模型，以更好地模擬腫瘤微環境

NCIH1373細胞參數表

NCIH1373人肺腺癌細胞培養教程

細胞複蘇步驟

• 確保所有操作使用的器材，如培養(yang) 基、移液器、離心管等均經過滅菌處理。
  

• 細胞培養(yang) 基為(wei) RPMI-1640，添加10%胎牛血清（FBS）和1%雙抗（青黴素/鏈黴素），適用於(yu) NCIH1373細胞的培養(yang) 。

• 將凍存的NCIH1373細胞置於(yu) 37℃水浴中快速解凍，期間輕輕搖動凍存管加速解凍過程。
  

• 解凍完成後，立即將NCIH1373細胞懸液轉移至裝有4 mL預溫的培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。

• 以1000 RPM的速度離心4分鍾，去除上清液，避免殘留的二甲基亞(ya) 碸（DMSO）影響NCIH1373細胞的存活。
  

• 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸NCIH1373細胞，並輕輕吹打使其分散均勻。

• 將重懸的NCIH1373細胞轉移至含有適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中孵育過夜，確保NCIH1373細胞恢複生長。

• 次日通過顯微鏡觀察NCIH1373細胞形態，確認細胞複蘇情況及其密度。

細胞傳代步驟

• 當NCIH1373細胞覆蓋培養(yang) 瓶底麵積的80%-90%時，需進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
  

• 傳(chuan) 代前準備新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基，並確保所有器材無菌。

• 小心地棄去NCIH1373細胞的培養(yang) 基，用無鈣、無鎂的PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）輕柔洗滌1-2次，去除殘留培養(yang) 基。
  

• 加入約1-2 mL的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，放入培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
  

• 在顯微鏡下觀察，當NCIH1373細胞大部分變圓、脫離瓶壁時，立即加入完全培養(yang) 基中止消化。

• 將消化後的NCIH1373細胞懸液以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 補加1-2 mL新鮮培養(yang) 基，將NCIH1373細胞輕輕吹勻。

• 按1:2至1:5的比例分配NCIH1373細胞至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，補加8 mL新鮮培養(yang) 基。
  

• 將傳(chuan) 代後的NCIH1373細胞置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ，並定期觀察細胞生長狀態。

細胞凍存步驟

• 當NCIH1373細胞處於(yu) 良好生長狀態時準備凍存。凍存液由50% RPMI-1640、40% FBS和10% DMSO組成。
  

• 棄去NCIH1373細胞培養(yang) 基後，用PBS輕柔洗滌1-2次，再加入1 mL胰酶消化，待細胞變圓後加入2 mL完全培養(yang) 基終止消化。
  

• 使用血球計數板計數NCIH1373細胞，確保細胞濃度適合凍存。

• 以1000 RPM離心5分鍾，棄去上清液，用凍存液重懸NCIH1373細胞。
  

• DMSO需迅速加入並均勻混勻，最終濃度為(wei) 10%。

• 將NCIH1373細胞懸液分裝至凍存管中，每管1 mL，並標記清楚。
  

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，緩慢降溫至-80℃，至少儲(chu) 存2小時後轉移至液氮中長期保存。