HCC4006細胞係（人肺腺癌細胞係） （暫不提供）

HCC4006細胞係是一種來源於(yu) 肺腺癌患者的上皮細胞係。最初於(yu) 2004年由JD Minna和AF Gazdar在美國達拉斯西南醫學中心腫瘤研究所(Hamon Cancer Center, HCC)從(cong) 一名46歲女性Ⅲb期肺腺癌患者的胸腔積液中分離並建立。HCC4006細胞係的特征包括上皮細胞形態，H廣泛用於(yu) 肺腺癌相關(guan) 的研究，特別是在涉及EGFR突變的研究中。目前，HCC4006細胞係主要通過國際細胞庫和專(zhuan) 業(ye) 培養(yang) 公司供應。

HCC4006細胞係特性特征

• hcc4006細胞核型分析顯示染色體(ti) 數量和結構存在異常，為(wei) 亞(ya) 三倍體(ti)

• 免疫缺陷小鼠接種後可形成移植瘤，組織學特征與(yu) 原發腫瘤一致

• 長期培養(yang) 後形態學、細胞動力學及染色體(ti) 眾(zhong) 數等指標無明顯改變，生長穩定

• hcc4006細胞具有EGFR基因在結構域中的獲得性突變（L747-E749缺失，A750P）。
  

HCC4006細胞係參數表

HCC4006人肺腺癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中迅速取出HCC4006細胞凍存管，立即放入37°C水浴中加熱至細胞完全融化。

• 將HCC4006細胞懸液轉移至15 mL離心管中。

• 緩慢加入10 mL預溫的完全培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，用5 mL完全培養(yang) 基重懸細胞沉澱。

• 將重懸的HCC4006細胞懸液接種於(yu) 25 cm²培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

常規傳代

• 當HCC4006細胞生長至80-90%匯合時，用PBS洗滌細胞兩(liang) 次。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分鍾，直至細胞脫壁。

• 添加等體(ti) 積的完全培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打混勻。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，用適量的完全培養(yang) 基重懸HCC4006細胞。

• 按1:2至1:3的比例將HCC4006細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，放入培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

培養基更換

• 每2-3天觀察HCC4006細胞的生長狀態，根據需要更換培養(yang) 基。

• 用無菌移液管吸取舊的培養(yang) 基，緩慢加入等量的預溫新鮮完全培養(yang) 基。

• 輕輕晃動培養(yang) 瓶，使新培養(yang) 基均勻覆蓋HCC4006細胞層。

• 將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

凍存

• 將對數生長期的HCC4006細胞消化成單細胞懸液。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，使用凍存液（90% FBS + 10% DMSO）重懸HCC4006細胞。

• 將細胞懸液分裝至凍存管中，每管含1-2×10^6個(ge) HCC4006細胞。

• 置於(yu) -80°C冰箱中過夜，次日轉入液氮罐中進行長期保存。

抗藥性研究

• HCC4006細胞係表現出對厄洛替尼的顯著抗藥性。

• 抗性表現: HCC4006細胞係中的HCC4006-ER細胞（厄洛替尼選擇性培養(yang) 的HCC4006細胞）對厄洛替尼表現出顯著的抗性，在不同濃度的厄洛替尼處理下，HCC4006細胞的存活率仍然較高。

• 細胞存活力測定: 在72小時內(nei) ，HCC4006細胞在各種濃度的厄洛替尼處理下，細胞存活力未顯著下降，顯示出對厄洛替尼的耐受性。

• EMT特征: HCC4006-ER細胞展現了上皮-間質轉化（EMT）的特征，這可能與(yu) 其抗藥性相關(guan) ，使HCC4006細胞在厄洛替尼存在的環境中更具生存能力。

• 細胞遷移與(yu) 侵入: HCC4006細胞在厄洛替尼處理下的遷移和侵入能力未受到顯著影響，表明在藥物壓力下HCC4006細胞仍能維持一定的生物學行為(wei) 。