HPAEPIC-Ⅱ-SV40細胞（人Ⅱ型肺泡細胞永生化） （暫不提供）

HPAEpiC-II-SV40細胞係是一種經過永生化處理的人類II型肺泡上皮細胞係，來源於(yu) 人類正常肺泡組織中的II型肺泡上皮細胞。為(wei) 了獲得永生化的細胞係，研究人員采用了慢病毒轉染的方法，將SV40基因導入這些kaiyun网站安全中。
HPAEpiC-II-SV40細胞係在研究肺泡相關(guan) 生理及病理過程中具有重要應用價(jia) 值，能夠穩定傳(chuan) 代至少20代以上。

HPAEPIC-Ⅱ-SV40細胞特性特征

• 在適當的培養(yang) 條件下（37°C，5% CO2），HPAEpiC-II-SV40細胞能夠穩定傳(chuan) 代，至少可傳(chuan) 代20代以上。

• 免疫標記：HPAEPIC細胞能夠表達肺表麵活性蛋白A（SP-A），這是II型肺泡上皮細胞的特征性標誌，保持了kaiyun网站安全的功能特性。
  

• 基因特征：SV40基因的引入使細胞獲得了無限增殖的能力。SV40編碼的大T抗原能夠與(yu) 細胞內(nei) 的抑製性蛋白（如p53和pRB）結合，導致細胞周期調控的失常，從(cong) 而促進細胞的永生化。

• 表達特征：HPAEpiC-II-SV40細胞在體(ti) 外培養(yang) 時表現出良好的生長特性，能夠維持肺泡上皮細胞的功能，特別是在合成和分泌肺表麵活性物質方麵

人Ⅱ型肺泡細胞永生化參數表

HPAEPIC-Ⅱ-SV40人Ⅱ型肺泡細胞永生化培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出HPAEpiC-II細胞凍存管，並立即將其放入37°C水浴中，輕輕搖動以加速解凍過程。

• 解凍完成後，將細胞懸液轉移至含10 ml完全培養(yang) 基的離心管中，設置900 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用適量完全培養(yang) 基重懸HPAEpiC-II細胞，將其轉移至培養(yang) 瓶中，放入培養(yang) 箱中進行靜置培養(yang) 。

細胞傳代

• 傳(chuan) 代頻率: 每2-3天檢查HPAEpiC-II細胞的生長狀態。當細胞達到80%-90%匯合度時，進行傳(chuan) 代。

• 吸去原培養(yang) 基，盡量吸走HPAEpiC-II細胞底部的培養(yang) 基。

• 加入3-4 ml常溫PBS，輕輕潤洗細胞，持續10-20秒，然後吸走PBS。

• 加入1 ml胰酶，輕輕搖晃培養(yang) 瓶，使胰酶均勻覆蓋在細胞層上。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化，觀察到HPAEpiC-II細胞間隙增大但未完全脫落時，加入2-3 ml完全培養(yang) 基以終止胰酶的消化作用。

• 輕輕混勻細胞，900 rpm離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用新鮮的完全培養(yang) 基重懸HPAEpiC-II細胞，並均勻分配至新的培養(yang) 瓶中，補足完全培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中進行靜置培養(yang) 。

培養基更換

• 每2-3天更換一次HPAEpiC-II細胞的培養(yang) 基，先輕輕吸去舊培養(yang) 基，然後加入新鮮的完全培養(yang) 基。

注意事項

• 胰酶消化: 不同品牌的胰酶可能對HPAEpiC-II細胞的消化效果不同。應嚴(yan) 格控製消化時間，避免細胞過度消化。

• 細胞狀態: 傳(chuan) 代過程中應盡量避免產(chan) 生過多氣泡，以免影響HPAEpiC-II細胞的狀態。

• 培養(yang) 基質量: 使用新鮮且未過期的培養(yang) 基，確保無汙染，以維持HPAEpiC-II細胞的健康生長。

細胞凍存

• 凍存液配方: 可以選擇92% FBS + 8% DMSO（適合初學者）或92%完全培養(yang) 基 + 8% DMSO（適合有經驗者）。

• 在HPAEpiC-II細胞消化並離心後，收集細胞沉澱。

• 將凍存液加入細胞沉澱中，輕輕重懸細胞。

• 將細胞懸液迅速轉移至標記好的凍存管中。

• 將凍存管置於(yu) 程序凍存盒中，放入-80°C冰箱中過夜，然後轉入液氮中保存。