MH-S細胞（小鼠肺泡巨噬細胞）

MH-S細胞係源自7周齡雄性BALB/c小鼠的肺泡巨噬細胞，經過SV40病毒轉化獲得。MH-S細胞係保留了肺泡巨噬細胞的多種特征，包括典型的巨噬細胞形態、粘附性、吞噬性、酯酶陽性以及過氧化物酶陰性。

MH-S細胞特性特征

• 表達特征：抗原表達：CD11b (Mac-1)、II類抗原 (I-A)、T抗原
  

• 表達標記：Fc受體(ti)

• 基因表達特征：表達白細胞介素-1 (IL-1)基因

• mhs細胞能夠產(chan) 生白細胞介素-1 (IL-1)，特別是在脂多糖（LPS）刺激下
  

• mhs細胞能夠以細胞劑量依賴方式抑製體(ti) 外噬菌斑形成細胞（PFC）反應

MH-S細胞參數表

MH-S小鼠肺泡巨噬細胞培養教程

細胞複蘇

• 快速解凍凍存的MH-S細胞（約1分鍾）。

• 將MH-S細胞懸液轉移至含5 ml 預熱完全培養(yang) 基的15 ml離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾。

• 棄上清液，用2 ml 完全培養(yang) 基重懸MH-S細胞。

• 將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中。

• 放置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 觀察MH-S細胞的生長狀態，當細胞密度達到70%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 收集培養(yang) 基中的懸浮MH-S細胞。

• 用PBS輕輕衝(chong) 洗貼壁MH-S細胞。

• 加入適量胰酶消化液，在37°C下消化2-3分鍾。

• 添加等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化。

• 收集MH-S細胞懸液，1000 rpm離心5分鍾。

• 棄上清液，用新鮮完全培養(yang) 基重懸MH-S細胞。

• 按1:2或1:3的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 準備凍存液：90%胎牛血清 + 10% DMSO。

• 收集對數生長期的MH-S細胞。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄上清液。

• 用凍存液重懸MH-S細胞，調整細胞密度至1-2 × 10^6 cells/ml。

• 將細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 ml。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，-80°C冰箱中保存過夜。

• 轉移到液氮中進行長期保存。

注意事項

• 細胞特性：MH-S細胞為(wei) 半貼壁生長，傳(chuan) 代時需同時收集懸浮和貼壁細胞。首次傳(chuan) 代建議使用T25培養(yang) 瓶進行1:2比例傳(chuan) 代。

• 定期觀察：定期檢查MH-S細胞的形態和生長狀態。

• 無菌操作：嚴(yan) 格遵循無菌操作規程，避免MH-S細胞汙染。

• 支原體(ti) 檢測：定期進行支原體(ti) 、細菌和真菌檢測以確保MH-S細胞無汙染。

安全事項

• 生物安全等級：MH-S細胞的生物安全等級為(wei) 2級。在生物安全2級（BSL-2）實驗室內(nei) 操作MH-S細胞，遵守相關(guan) 安全規程。

• 個(ge) 人防護：操作MH-S細胞時必須穿戴實驗服、手套、口罩等個(ge) 人防護裝備，避免直接接觸細胞或培養(yang) 液。

• 無菌操作：在生物安全櫃內(nei) 進行MH-S細胞培養(yang) 操作，使用經過消毒的器材和試劑。

• 廢棄物處理：所有接觸過MH-S細胞的廢棄物需經過高壓滅菌或化學消毒處理後再丟(diu) 棄。銳器需放入專(zhuan) 用銳器盒中處理。

• 意外處理：製定意外泄漏或暴露的應急預案，發生意外接觸MH-S細胞時立即采取相應措施並報告實驗室負責人。

• 液氮操作安全：操作液氮時需小心，使用專(zhuan) 用防護設備，避免凍傷(shang) 。

• 化學品安全：安全使用和儲(chu) 存培養(yang) 基、血清、DMSO等化學試劑，並了解所用試劑的安全數據表（SDS）。