
TC-1細胞(小鼠肺上皮細胞)
- 來源:肺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:轉化基因: HPV16 E6和E7基因
TC-1小鼠肺上皮細胞係是一種重要的細胞模型,源自C57BL/C(H-2b)小鼠的肺部上皮細胞。TC-1細胞是通過轉化人乳頭狀瘤病毒(HPV)16型的E6和E7基因及ras基因建立,TC-1細胞不僅(jin) 保留了肺上皮組織的特性,還通過基因工程手段使其表現出腫瘤特性,從(cong) 而能夠在體(ti) 外良好生長。TC-1細胞係在腫瘤生物學、病毒感染及藥物開發等領域廣泛應用,特別是在研究HPV相關(guan) 癌症及其治療策略方麵,提供了重要的科學價(jia) 值和實驗依據。
TC-1細胞特性特征
轉化基因:經過人乳頭狀瘤病毒(HPV)16型的E6和E7基因以及ras基因的共轉化,具備腫瘤特性。
形態:TC-1細胞呈上皮樣形態,通常為(wei) 貼壁生長。
HPV E6和E7基因:這些基因的表達使得TC-1細胞具備了促進細胞增殖和抑製凋亡的能力,常與(yu) 腫瘤發生相關(guan) 。
ras基因:該基因的轉化進一步增強了TC-1細胞的致癌性,參與(yu) 調控細胞增殖和信號轉導
TC-1細胞參數表
細胞名稱 | TC-1細胞(小鼠肺上皮細胞) |
細胞別稱 | TC-1[JHU-1]; Tissue Culture-1; 小鼠肺上皮細胞 |
種屬來源 | 小鼠(C57BL/C(H-2b)) |
組織來源 | 肺 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞代數 | 通常在10代以內 |
背景介紹 | TC-1細胞為HPV16 E6、E7和ras基因共轉化的細胞係 |
支原體檢測 | 無 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
培養基組成 | 90% DMEM或RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 溫度:37℃; 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代比例 | 1:2至1:6,每周2次 |
倍增時間 | 18.2 hours (PubMed=12559790) |
凍存液成分 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO |
儲存條件 | 液氮儲存(-196℃) |
運輸方式 | 幹冰冷凍發貨或複蘇發貨 |
生物安全級別 | 二級生物安全台操作,需注意防護 |
無菌檢測結果 | 細菌、酵母、支原體均為陰性 |
病原體檢查結果 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性 |
培養教程
TC-1小鼠肺上皮細胞培養教程
TC-1細胞複蘇
解凍:將含有1 mL TC-1細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速解凍(約1-2分鍾),輕輕搖勻。
稀釋:向解凍的TC-1細胞中加入4 mL預先準備好的完全培養(yang) 基,輕輕混合均勻。
離心:在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液。
重懸:加入1-2 mL培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,然後將TC-1細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶(如T25瓶或6 cm培養(yang) 皿),再加入約6-8 mL的培養(yang) 基。
培養(yang) :將TC-1細胞放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,培養(yang) 過夜。
TC-1細胞傳代
檢查密度:第二天檢查TC-1細胞密度,若達到80%-90%時即可進行傳(chuan) 代。
洗滌:棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗TC-1細胞1-2次。
加入1-2 mL消化液(0.25%胰酶和0.53 mM EDTA),在37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
在顯微鏡下觀察,若大部分TC-1細胞變圓並脫落,迅速取回操作台,輕輕敲擊後加少量培養(yang) 基以終止消化。
加入6-8 mL新鮮培養(yang) 基輕輕打勻後,進行1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
補加1-2 mL新鮮培養(yang) 基後輕輕吹勻。
分配:將TC-1細胞懸液按1:2至1:6的比例分配到新的培養(yang) 皿或瓶中,加入每個(ge) 容器約8 mL培養(yang) 基。
TC-1細胞凍存
準備:在TC-1細胞生長狀態良好時進行凍存,首先棄去培養(yang) 基,用PBS清洗瓶底1-2次。
消化:加入1 mL胰酶,待TC-1細胞變圓並脫落後,加2 mL完全培養(yang) 基終止消化。
離心:在1000 RPM下離心5分鍾,去掉上清液,用新鮮的培養(yang) 基重懸TC-1細胞,並加入DMSO至最終濃度為(wei) 10%(通常為(wei) 90%完全培養(yang) 基和10% DMSO)。
分裝:將重懸的TC-1細胞分配到凍存管中,並做好標識,確保每個(ge) 凍存管內(nei) 含有超過1×10^6個(ge) 細胞。
冷凍:將凍存管放入程序冷凍盒中,然後儲(chu) 存在液氮中。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 《第四軍醫大學》 2014年
- 摘要:...。細胞生物學行為的改變是肺癌發生和發展的重要原因。TC-1蛋白在多種腫瘤組織中異常高...
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