
Mv.1.Lu細胞(Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞)
- 來源:胚胎,阿留申水貂肺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:表麵標記: 陽性標記:CD29、CD44、CD105;陰性標記:CD34、CD45
Mv1Lu(NBL-7)細胞係是從(cong) 阿留申水貂(Mustela vison)的肺組織中獲得,來源於(yu) 未交配、接近足月的胎兒(er) 。1964年5月,A.J. Kniazeff、W.A. Nelson-Rees 和 N.B. Darby Jr. 等人利用胰蛋白酶對阿留申水貂的幾個(ge) 接近足月的未交配胎兒(er) 的胰蛋白酶化肺組織進行消化處理,從(cong) 中成功分離出該細胞係。Mv.1.Lu細胞被廣泛應用於(yu) 小鼠和貓肉瘤病毒的焦點形成檢測實驗,是一種理想的轉染宿主細胞。
Mv1Lu細胞特性特征
倍體(ti) 特征:存在雄性和雌性二倍體(ti) 細胞及假二倍體(ti) 細胞,約58%的細胞染色體(ti) 數目在二倍體(ti) 的±1範圍內(nei) ,部分細胞群體(ti) 中可觀察到具有雙著絲(si) 粒染色體(ti) 的細胞類型。
Mv1Lu細胞對多種病毒具有易感性,包括:單純皰疹病毒、呼腸孤病毒3、痘苗病毒、水皰性口炎新澤西病毒、
表麵標記:Mv1Lu細胞係在流式細胞術分析中顯示出對某些表麵標記的表達,這些標記有助於(yu) 其在轉染實驗中的應用。
轉染宿主:Mv1Lu細胞被廣泛用作轉染宿主,適合進行基因表達研究和病毒感染模型的構建。
基因組信息:Mv1Lu細胞係的基因組已被部分測序,相關(guan) 數據可在GenBank等數據庫中找到,包括與(yu) 水貂相關(guan) 的mRNA序列
Mv1Lu貂肺上皮細胞參數表
細胞名稱 | Mv.1.Lu細胞(Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞) |
細胞別稱 | Mv 1 Lu (NBL-7); NBL-7; Mv 1 Lu; MV 1 LU; Mv1.Lu; Mv.1.Lu; MV-1-Lu; Mink; MinkLung |
種屬 | 阿留申水貂(Mustela vison) |
組織來源 | 胚胎肺組織 |
供體信息 | 接近足月未交配胎兒,性別未知 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞類型 | 自發永生化細胞 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生物安全等級 | BSL-1 |
倍增時間 | 約24小時(具體時間因實驗條件而異) |
培養基 | MEM(含NEAA) + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣,5% CO₂ |
換液頻率 | 每周2~3次 |
傳代方法 | 胰蛋白酶消化 |
傳代比例 | 1:2至1:4 |
消化時間 | 2~3分鍾 |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO,液氮保存 |
運輸方式 | 活細胞常溫運輸;凍存管幹冰運輸 |
病毒易感性 | 單純皰疹病毒;呼腸孤病毒3;痘苗病毒;水皰性口炎新澤西病毒 |
無菌檢測結果 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查結果 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性 |
供貨規格 | 1 x 10⁶ cells/vial/T25 |
儲存溫度 | 活細胞:培養箱;凍存管:液氮罐 |
供應限製 | 僅供科研使用 |
培養教程
Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞培養教程
Mv1Lu細胞的複蘇
將Mv1Lu細胞凍存管從(cong) 液氮中取出,立即放入37℃水浴中,輕輕搖晃,持續1-2分鍾,直至細胞懸液完全融化。
將解凍後的Mv1Lu細胞懸液轉移至離心管,加入4-5 mL預溫的MEM培養(yang) 基,並輕輕混勻。
在1000 rpm下離心4分鍾,去除上清液以減少DMSO的殘留。
加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基重新懸浮Mv1Lu細胞,輕輕吹打使細胞均勻分散。將細胞懸液轉移至預先準備好的培養(yang) 瓶中,加入10 mL完全培養(yang) 基。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,過夜培養(yang) ,以便Mv1Lu細胞充分貼壁。
Mv1Lu細胞的傳代
當Mv1Lu細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。理想的傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4。
棄去舊的培養(yang) 基,用預溫的PBS緩衝(chong) 液清洗Mv1Lu細胞1-2次,以去除殘留的血清。
加入1-2 mL胰蛋白酶溶液,均勻覆蓋Mv1Lu細胞表麵,將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中觀察2-3分鍾。
當Mv1Lu細胞開始變圓並輕微脫落時,立即加入3 mL含血清的培養(yang) 基終止消化反應。
輕輕吹打Mv1Lu細胞,使其形成均勻的單細胞懸液。
在1200 rpm下離心3分鍾,棄去上清液。
加入適量的新鮮培養(yang) 基重懸Mv1Lu細胞。
將重懸的Mv1Lu細胞均勻分配至新的培養(yang) 瓶中,添加適量的MEM完全培養(yang) 基,並確保培養(yang) 瓶蓋微鬆或使用透氣瓶蓋,以利於(yu) 氣體(ti) 交換。
Mv1Lu細胞的凍存
在無菌條件下,將90%完全培養(yang) 基與(yu) 10% DMSO混合均勻備用。
在Mv1Lu細胞狀態良好的情況下進行收集,按常規傳(chuan) 代步驟處理細胞。
用PBS洗滌後,加入胰蛋白酶消化,終止消化後收集Mv1Lu細胞。
在1200 rpm下離心3分鍾,棄去上清液。將Mv1Lu細胞重懸於(yu) 凍存液中,細胞密度為(wei) 每管1 x 10^6個(ge) 細胞。
將Mv1Lu細胞懸液分裝至凍存管,每管1 mL。
使用程序降溫盒,放置於(yu) -80℃冰箱中,逐步降溫至少4小時,最好過夜降溫,以保護Mv1Lu細胞免受冷凍損傷(shang) 。
將凍存管從(cong) 程序降溫盒中取出,轉移至液氮罐中進行長期保存。
注意事項
消化時間:胰蛋白酶處理過程中,需密切觀察Mv1Lu細胞的消化狀態,避免過度消化導致細胞損傷(shang) 。
避免汙染:所有培養(yang) 操作應在生物安全櫃內(nei) 進行,使用無菌試劑和耗材,定期檢測Mv1Lu細胞的支原體(ti) 汙染。
細胞狀態檢查:傳(chuan) 代或凍存前應確認Mv1Lu細胞狀態,確保細胞形態正常、無汙染、貼壁良好。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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