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Mv.1.Lu細胞(Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞)貨號:STM-CL-8156 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

Mv.1.Lu細胞(Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞)

  • 來源:胚胎,阿留申水貂肺
  • 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
  • 其他:表麵標記: 陽性標記:CD29、CD44、CD105;陰性標記:CD34、CD45
Tags: 貂肺上皮細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,400.00
提供種屬鑒定報告

Mv1Lu(NBL-7)細胞係是從(cong) 阿留申水貂(Mustela vison)的肺組織中獲得,來源於(yu) 未交配、接近足月的胎兒(er) 。1964年5月,A.J. Kniazeff、W.A. Nelson-Rees 和 N.B. Darby Jr. 等人利用胰蛋白酶對阿留申水貂的幾個(ge) 接近足月的未交配胎兒(er) 的胰蛋白酶化肺組織進行消化處理,從(cong) 中成功分離出該細胞係。Mv.1.Lu細胞被廣泛應用於(yu) 小鼠和貓肉瘤病毒的焦點形成檢測實驗,是一種理想的轉染宿主細胞。

Mv1Lu細胞特性特征

  • 倍體(ti) 特征:存在雄性和雌性二倍體(ti) 細胞及假二倍體(ti) 細胞,約58%的細胞染色體(ti) 數目在二倍體(ti) 的±1範圍內(nei) ,部分細胞群體(ti) 中可觀察到具有雙著絲(si) 粒染色體(ti) 的細胞類型。

  • Mv1Lu細胞對多種病毒具有易感性,包括:單純皰疹病毒、呼腸孤病毒3、痘苗病毒、水皰性口炎新澤西病毒、

  • 表麵標記:Mv1Lu細胞係在流式細胞術分析中顯示出對某些表麵標記的表達,這些標記有助於(yu) 其在轉染實驗中的應用。

  • 轉染宿主:Mv1Lu細胞被廣泛用作轉染宿主,適合進行基因表達研究和病毒感染模型的構建。

  • 基因組信息:Mv1Lu細胞係的基因組已被部分測序,相關(guan) 數據可在GenBank等數據庫中找到,包括與(yu) 水貂相關(guan) 的mRNA序列

Mv1Lu貂肺上皮細胞參數表

細胞名稱Mv.1.Lu細胞(Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞)
細胞別稱Mv 1 Lu (NBL-7); NBL-7; Mv 1 Lu; MV 1 LU; Mv1.Lu; Mv.1.Lu; MV-1-Lu; Mink; MinkLung
種屬阿留申水貂(Mustela vison)
組織來源胚胎肺組織
供體信息接近足月未交配胎兒,性別未知
細胞形態上皮細胞樣
細胞類型自發永生化細胞
生長特性貼壁生長
生物安全等級BSL-1
倍增時間約24小時(具體時間因實驗條件而異)
培養基MEM(含NEAA) + 10% FBS + 1% P/S
培養條件溫度:37℃;氣相:95%空氣,5% CO₂
換液頻率每周2~3次
傳代方法胰蛋白酶消化
傳代比例1:2至1:4
消化時間2~3分鍾
凍存條件90% FBS + 10% DMSO,液氮保存
運輸方式活細胞常溫運輸;凍存管幹冰運輸
病毒易感性單純皰疹病毒;呼腸孤病毒3;痘苗病毒;水皰性口炎新澤西病毒
無菌檢測結果細菌、酵母、支原體檢測均為陰性
病原體檢查結果HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性
供貨規格1 x 10⁶ cells/vial/T25
儲存溫度活細胞:培養箱;凍存管:液氮罐
供應限製僅供科研使用

培養教程

Mv1Lu細胞、NBL-7貂肺上皮細胞培養教程

Mv1Lu細胞的複蘇

  • 將Mv1Lu細胞凍存管從(cong) 液氮中取出,立即放入37℃水浴中,輕輕搖晃,持續1-2分鍾,直至細胞懸液完全融化。

  • 將解凍後的Mv1Lu細胞懸液轉移至離心管,加入4-5 mL預溫的MEM培養(yang) 基,並輕輕混勻。

  • 在1000 rpm下離心4分鍾,去除上清液以減少DMSO的殘留。

  • 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基重新懸浮Mv1Lu細胞,輕輕吹打使細胞均勻分散。將細胞懸液轉移至預先準備好的培養(yang) 瓶中,加入10 mL完全培養(yang) 基。

  • 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,過夜培養(yang) ,以便Mv1Lu細胞充分貼壁。

Mv1Lu細胞的傳代

  • 當Mv1Lu細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。理想的傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4。

  • 棄去舊的培養(yang) 基,用預溫的PBS緩衝(chong) 液清洗Mv1Lu細胞1-2次,以去除殘留的血清。

  • 加入1-2 mL胰蛋白酶溶液,均勻覆蓋Mv1Lu細胞表麵,將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中觀察2-3分鍾。

  • 當Mv1Lu細胞開始變圓並輕微脫落時,立即加入3 mL含血清的培養(yang) 基終止消化反應。

  • 輕輕吹打Mv1Lu細胞,使其形成均勻的單細胞懸液。

  • 在1200 rpm下離心3分鍾,棄去上清液。

  • 加入適量的新鮮培養(yang) 基重懸Mv1Lu細胞。

  • 將重懸的Mv1Lu細胞均勻分配至新的培養(yang) 瓶中,添加適量的MEM完全培養(yang) 基,並確保培養(yang) 瓶蓋微鬆或使用透氣瓶蓋,以利於(yu) 氣體(ti) 交換。

Mv1Lu細胞的凍存

  • 在無菌條件下,將90%完全培養(yang) 基與(yu) 10% DMSO混合均勻備用。

  • 在Mv1Lu細胞狀態良好的情況下進行收集,按常規傳(chuan) 代步驟處理細胞。

  • 用PBS洗滌後,加入胰蛋白酶消化,終止消化後收集Mv1Lu細胞。

  • 在1200 rpm下離心3分鍾,棄去上清液。將Mv1Lu細胞重懸於(yu) 凍存液中,細胞密度為(wei) 每管1 x 10^6個(ge) 細胞。

  • 將Mv1Lu細胞懸液分裝至凍存管,每管1 mL。

  • 使用程序降溫盒,放置於(yu) -80℃冰箱中,逐步降溫至少4小時,最好過夜降溫,以保護Mv1Lu細胞免受冷凍損傷(shang) 。

  • 將凍存管從(cong) 程序降溫盒中取出,轉移至液氮罐中進行長期保存。

注意事項

  • 消化時間:胰蛋白酶處理過程中,需密切觀察Mv1Lu細胞的消化狀態,避免過度消化導致細胞損傷(shang) 。

  • 避免汙染:所有培養(yang) 操作應在生物安全櫃內(nei) 進行,使用無菌試劑和耗材,定期檢測Mv1Lu細胞的支原體(ti) 汙染。

  • 細胞狀態檢查:傳(chuan) 代或凍存前應確認Mv1Lu細胞狀態,確保細胞形態正常、無汙染、貼壁良好。

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參考文獻

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