小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞（kaiyun网站安全）

小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞（Mouse Lens Epithelial Cells, LECs）是從(cong) 小鼠的晶狀體(ti) 組織中分離獲得，培養(yang) 過程因無神經、血管組織及其他類型細胞的幹擾，具有較高的細胞純度和單一性。晶狀體(ti) 上皮細胞是覆蓋在晶狀體(ti) 囊膜內(nei) 表麵的一層扁平單層上皮細胞，其主要功能是維持晶狀體(ti) 的生理平衡，包括液體(ti) 與(yu) 電解質的調控。小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞在發育過程中會(hui) 分化為(wei) 晶狀體(ti) 纖維細胞，生成晶狀體(ti) 蛋白並逐步失去細胞核及其他細胞器，從(cong) 而形成晶狀體(ti) 的主要功能結構。研究發現，這一分化過程受眼部液體(ti) 中的生長因子（如表皮生長因子和胰島素等）調控，其異常增殖與(yu) 白內(nei) 障和後囊混濁等病變密切相關(guan) 。

在體(ti) 外培養(yang) 環境中，晶狀體(ti) 上皮細胞以單層生長，細胞形態呈扁平不規則的多邊形，能夠連成膜狀。體(ti) 外培養(yang) 體(ti) 係為(wei) 研究晶狀體(ti) 上皮細胞的增殖、分化及其與(yu) 白內(nei) 障等疾病提供了重要研究手段。

小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞的來源包括多種小鼠品係，如C57BL/6、BALB/c、ICR及昆明小鼠。晶狀體(ti) 組織通常取自正常實驗小鼠的眼球前部，其通過懸韌帶連接於(yu) 睫狀體(ti) 。晶狀體(ti) 上皮細胞在調節晶狀體(ti) 代謝及功能方麵至關(guan) 重要，同時也在維持晶狀體(ti) 的透明性和光學特性中扮演核心角色。

小鼠晶狀體上皮細胞特性特征

• 高度分化：小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞在發育過程中經曆多次有絲(si) 分裂和分化，最終形成成熟的晶狀體(ti) 細胞，具有特定的形態和功能。

• 透明度：小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞的透明性使得晶狀體(ti) 能夠有效透過光線，保持眼睛的透明度，確保視覺清晰。

• 代謝活躍：小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞的代謝活性較高，能夠合成和分解蛋白質、脂肪和糖類，以維持晶狀體(ti) 的正常功能。

• 生長因子的調控：晶狀體(ti) 上皮細胞的分化和極化受到眼部液體(ti) 中生長因子的調控，例如表皮生長因子（EGF）和胰島素，這些因子促進了細胞的增殖和功能維持。

• 標記物表達：通過免疫熒光染色，晶狀體(ti) 上皮細胞通常表現出CK18等上皮標記物的陽性反應，這有助於(yu) 其鑒定。

• 基因表達特征：在發育過程中，小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞會(hui) 表達與(yu) 細胞周期相關(guan) 的基因，如Cyclin D1、PCNA等，這些基因在不同發育階段的表達模式各異。

• 衰老相關(guan) 標誌物：在自然衰老的小鼠中，晶狀體(ti) 上皮細胞中P21和P53等衰老相關(guan) 蛋白的表達增加，這與(yu) 白內(nei) 障等眼部疾病的發展密切相關(guan) 。

• 細胞周期調控：研究表明，晶狀體(ti) 上皮細胞在不同發育階段對增殖和凋亡有嚴(yan) 格的調控機製，這對於(yu) 維持晶狀體(ti) 的正常結構和功能至關(guan) 重要。

小鼠晶狀體上皮細胞參數表

原代小鼠晶狀體上皮細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐或-80℃冰箱中取出小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞凍存管，確保操作在無菌條件下進行。
  

• 準備好預熱的培養(yang) 基（如DMEM/F-12）和離心管。

• 將凍存管置於(yu) 37℃水浴中快速解凍，通常需1-2分鍾，期間輕輕搖晃。
  

• 解凍後，立即將1 mL細胞懸液加入到4 mL預熱培養(yang) 基中，混勻。

• 轉移混勻的細胞懸液至離心管，以1000 rpm離心3-4分鍾。
  

• 棄去上清液，加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹勻細胞。

• 將懸浮的小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞轉移至培養(yang) 瓶（如T25瓶）或培養(yang) 皿中，添加8 mL預熱培養(yang) 基。
  

• 置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

• 第二天更換培養(yang) 基，去除解凍過程中可能產(chan) 生的代謝廢物，同時觀察小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞的生長狀態。

細胞傳代

• 當小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞的生長密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清後，用無鈣鎂的PBS清洗細胞1-2次。

• 加入1 mL胰酶消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），使其覆蓋細胞表麵。
  

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中，觀察細胞變圓並開始脫落（約1-2分鍾）。

• 加入適量培養(yang) 基中和消化液，並輕輕吹打細胞使其完全懸浮。
  

• 轉移細胞懸液至離心管，以1000 rpm離心4分鍾。
  

• 棄去上清液，用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸細胞。

• 按1:2比例分配小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞至新的培養(yang) 瓶，加入8 mL培養(yang) 基。
  

• 放回培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 收集生長良好的小鼠晶狀體(ti) 上皮細胞，轉移至離心管中。
  

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液，用PBS清洗細胞一次。

• 使用血球計數板計數細胞，調整細胞密度至5×10⁶至1×10⁷/mL。
  

• 配製凍存液（90%培養(yang) 基+10% DMSO），並混勻細胞懸液。

• 將1 mL細胞懸液加入凍存管，標注信息。
  

• 將凍存管放入程序降溫盒中，以每分鍾1℃降溫速率降至-80℃，保存24小時後轉移至液氮罐中長期儲(chu) 存。