
大鼠視網膜色素上皮細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:視網膜組織
- 細胞特征:貼壁 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:視網膜色素上皮參與(yu) 視黃醇循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節,分泌多種生長因子。
大鼠視網膜色素上皮細胞來源於(yu) 大鼠視網膜。
視網膜色素上皮細胞位於(yu) 眼球內(nei) 部,負責離子、水、營養(yang) 物質和代謝產(chan) 物的轉運。
視網膜色素上皮細胞在視黃醇循環中有重要作用,同時也清除脫落的光感受器細胞外節,並分泌多種生長因子,維持眼部組織的結構完整。
視網膜色素上皮細胞特性
視網膜色素上皮細胞位於(yu) 脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的轉運通道。
視網膜色素上皮參與(yu) 視黃醇循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節,分泌多種生長因子。
視網膜色素上皮細胞無再生能力,死亡後不被替換。
視網膜色素上皮的退化可能引發視覺障礙。
視網膜色素上皮細胞參數表
細胞名稱 | 大鼠視網膜色素上皮細胞(kaiyun网站安全) |
種屬來源 | 大鼠 |
組織來源 | 大鼠的正常眼組織 |
疾病特征 | 正常kaiyun网站安全 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,不規則細胞 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞鑒定 | 細胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽性,經鑒定細胞純度高於90% |
QC檢測 | 不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
生物安全等級 | 1 |
培養基 | 原代上皮細胞專用培養基 |
生長條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37℃ |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
凍存條件 | 90%完全培養基 + 10%DMSO,液氮儲存 |
細胞結構特征 | 多角形細胞,具有頂部、體(ti) 部和基底部三部分,排列規則 細胞之間通過緊密連接、中間連接和縫隙連接相連 無再生能力,鄰近細胞會(hui) 滑動填補死亡細胞的位置 |
研究與應用 | 理解視網膜的功能機製,治療方法、應對因視網膜色素上皮細胞退化引起的視覺障礙 |
培養教程
大鼠視網膜色素上皮細胞培養操作
細胞複蘇
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中快速搖晃解凍,然後加入4 mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000 rpm條件下離心3分鍾,棄去上清液,加入1-2 mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有細胞懸液加入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜,或者加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yang) 基,培養(yang) 過夜。
第二天進行液體(ti) 更換並檢查細胞密度。
細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時,可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,37℃培養(yang) 箱中消化1分鍾。
觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速終止消化。
補加培養(yang) 基,離心,棄去上清液,加入培養(yang) 液後吹勻。
將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存
收集細胞及細胞培養(yang) 液,裝入無菌離心管中,離心,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
加入無血清細胞凍存液,使細胞密度為(wei) 5×10^6~1×10^7/mL,混勻後裝入凍存管,放入-80℃冰箱,24小時後轉入液氮灌儲(chu) 存。
注意事項
操作過程中保持無菌操作,以確保細胞培養(yang) 的成功。
使用培養(yang) 基和消化液時,注意溫度和PH值的控製,避免對細胞產(chan) 生不良影響。
細胞凍存時,注意使用凍存液以及凍存管的標識,確保細胞的保存和追溯。
在培養(yang) 過程中,定期觀察細胞形態和生長情況,及時進行液體(ti) 更換和細胞傳(chuan) 代,以維持細胞的健康狀態。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 《武漢大學》 2017年
- 摘要:第一部分目的:探索缺氧條件下不同時間段RPE細胞中HGF和VEGF的表達及外源性HGF蛋白...
- 《第三軍醫大學》 2015年
- 摘要: 研究背景:視網膜色素變性(retinitis pigmentosa,RP)是一...
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