
大鼠卵巢上皮細胞(原代卵巢表麵上皮細胞)
- 來源:卵巢組織
- 細胞特征:貼壁 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:分泌激素,刺激卵細胞分化成熟; 分泌炎症介質,參與(yu) 炎症反應。
大鼠卵巢上皮細胞源自卵巢組織,位於(yu) 卵巢的表麵,覆蓋在卵巢表麵上,形成卵巢的外層組織。
大鼠卵巢上皮細胞特征
大鼠卵巢上皮細胞分離自卵巢組織。
卵巢上皮細胞具有兩(liang) 項主要功能:分泌激素,促進卵細胞的成熟;分泌炎症介質,參與(yu) 炎症反應。
卵巢上皮細胞:呈扁平形狀,覆蓋在卵巢表麵,形成一層上皮組織,通常沒有明顯的胞漿突起。
大鼠卵巢上皮細胞參數表
產品名稱 | 大鼠卵巢上皮細胞(kaiyun网站安全) |
細胞類型 | 上皮細胞 |
組織來源 | 卵巢表麵 |
功能 | 參與卵巢保護和生理過程 |
分泌物 | 激素、炎症介質 |
形態特征 | 扁平形狀,覆蓋在卵巢表麵 |
包被條件 | 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm^2) |
培養基 | 上皮細胞專用培養基 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
傳代比例 | 1:2 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
培養教程
大鼠卵巢上皮細胞培養操作流程
細胞接收和預處理
將T25細胞培養(yang) 瓶從(cong) 存儲(chu) 中取出,並用75%酒精消毒瓶身。
將細胞培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4小時,穩定細胞狀態。
細胞貼壁
吸出培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次。
向T25培養(yang) 瓶中加入0.25%胰蛋白酶消化液,37°C溫浴1-3分鍾,直至細胞回縮變圓。
加入5ml完全培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打混勻。
按傳(chuan) 代比例接種細胞,補充新鮮的完全培養(yang) 基至5ml。
置於(yu) 37°C、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入胰蛋白酶消化液,37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察細胞消化情況。
補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加培養(yang) 液後吹勻。
將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。
細胞凍存
當細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
棄去培養(yang) 基後,用PBS清洗瓶底1-2次後加入胰酶。
細胞脫落後,加入完全培養(yang) 基終止消化,使用血球計數板計數。
離心5分鍾去掉上清,用血清重懸浮,加入DMSO至最終濃度為(wei) 10%。
按每1ml的數量分配到凍存管中,置於(yu) -80°C冰箱,至少2小時後轉入液氮灌儲(chu) 存。
注意事項
培養(yang) 基於(yu) 4°C條件下可保存3-6個(ge) 月。
在細胞培養(yang) 過程中,注意保持無菌操作。
傳(chuan) 代培養(yang) 過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會(hui) 影響細胞貼壁及其生長狀態。
建議在收到細胞後前3天每個(ge) 倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便於(yu) 溝通和技術支持。
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參考文獻
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