
大鼠卵巢成纖維細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:卵巢組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:重要基因: Foxo3a、 Bax/Bcl-2
大鼠卵巢成纖維細胞(Rat Ovarian Fibroblasts)來源於(yu) 大鼠卵巢組織,屬於(yu) 成纖維細胞類型,廣泛應用於(yu) 生物醫學研究和細胞培養(yang) 實驗。
卵巢成纖維細胞通常呈長梭形或星形,具有明顯的突起,能夠形成單層貼壁生長。在適宜的培養(yang) 基中,它們(men) 能夠迅速增殖,並在傳(chuan) 代過程中保持其特性。大鼠卵巢是雌性動物的主要生殖器官,負責產(chan) 生卵子和合成類固醇激素。卵巢的外部有上皮組織覆蓋,下方為(wei) 結締組織,內(nei) 部結構分為(wei) 皮質和髓質,包含卵泡、結締組織、血管、淋巴管和神經。卵巢成纖維細胞主要分布於(yu) 卵巢表麵,具有修複和重塑卵巢損傷(shang) 的功能。在卵巢炎症過程中,它們(men) 有助於(yu) 控製炎症擴散,保持組織穩態。分離後的卵巢成纖維細胞最初呈圓形並具有較好的折光性,隨著時間推移,細胞逐漸伸展成梭形或星形,形成網狀結構,並且生長迅速,最終在培養(yang) 中形成緊密排列的細胞群體(ti) 。大鼠卵巢成纖維細胞是研究卵巢生理、組織修複及細胞功能的理想模型。
大鼠卵巢成纖維細胞特性特征
細胞形態:大鼠卵巢成纖維細胞通常呈現為(wei) 長梭形,具有明顯的突起,能夠形成單層貼壁生長。
細胞核:細胞核呈規則的卵圓形,核仁明顯,細胞質透明。
傳(chuan) 代能力:可以進行多代傳(chuan) 代,通常可傳(chuan) 3-5代而保持其特性。
蛋白質合成:具有明顯的蛋白質合成和分泌活動,參與(yu) 組織修複和重塑。
基因表達:相關(guan) 研究顯示,大鼠卵巢成纖維細胞在不同情況下會(hui) 調節多種基因的表達,以適應生理或病理狀態。例如,它們(men) 可能會(hui) 對炎症反應、細胞凋亡等過程產(chan) 生影響
大鼠卵巢成纖維細胞參數表
細胞名稱 | 大鼠卵巢成纖維細胞(kaiyun网站安全) |
英文名稱 | Rat Ovarian Fibroblast Cells |
組織來源 | 大鼠卵巢組織 |
細胞規格 | 5×10⁵ Cells/T25培養瓶 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣,長梭形,具有明顯突起 |
生長特性 | 貼壁生長,快速增殖 |
傳代特性 | 可傳代約5代,3代以內狀態最佳 |
傳代比例 | 1:03 |
培養基 | kaiyun网站安全專用培養基 |
包被條件 | 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm²) |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
貼壁時間 | 30分鍾後開始貼壁,6小時基本貼壁完成 |
生長周期 | 5-7天達到融合狀態 |
質量檢測 | 純度≥90%,不含HIV-1、HBV、HCV等汙染物 |
細胞核特征 | 核呈卵圓形,核仁明顯 |
細胞質特征 | 嗜弱堿性,透明,含有豐富的蛋白質合成和分泌活動 |
凍存條件 | -80℃初步冷凍,轉移至液氮保存 |
功能特點 | 能夠修複和重塑卵巢組織;在卵巢炎症時有效控製炎症擴散。 |
培養條件 | 氣相:空氣95%;CO₂:5% |
細胞活性檢測 | 使用Vimentin免疫熒光鑒定以確認細胞類型。 |
培養教程
原代大鼠卵巢成纖維細胞培養教程
細胞複蘇
提前將培養(yang) 基(如 DMEM/F12 + 10% FBS + 1% 膠原蛋白生長補充劑 + 1% 青黴素-鏈黴素溶液)預熱至37°C。
確保生物安全櫃已準備好,操作台和工具使用75%酒精進行消毒。
從(cong) 液氮或-80°C冰箱中取出凍存管,立即放入37°C的水浴中進行解凍,輕輕搖動,通常在1-2分鍾內(nei) 完成。
解凍後,迅速將細胞懸液轉移至含有5 mL預熱培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
在室溫下,離心管以1000 rpm進行離心5分鍾,去除上清液。
輕輕吹打混勻細胞沉澱,重懸於(yu) 適量新鮮培養(yang) 基中(約1-2 mL)。
將細胞懸液轉移至預先準備好的培養(yang) 瓶中,放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 。
細胞傳代
每2-3天觀察Rof細胞的生長狀態,當細胞融合度達到70%-80%時進行傳(chuan) 代。
吸出培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基,用PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌一次,去除殘留培養(yang) 基和死細胞。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(約1 mL),輕輕搖動,確保胰蛋白酶覆蓋整個(ge) 瓶底。
將培養(yang) 瓶放入37°C的培養(yang) 箱中孵育2-5分鍾,觀察細胞是否開始脫落。
當細胞開始脫落時,立即加入等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基以終止消化反應。
將細胞懸液轉移至離心管中,1000 rpm離心5分鍾,去除上清液。
重懸細胞沉澱於(yu) 適量新鮮培養(yang) 基中,按照1:3的傳(chuan) 代比例,將細胞分配至新的培養(yang) 瓶中。
細胞凍存
準備凍存液:基礎培養(yang) 基 + 10% DMSO + 20% FBS。
當Rof細胞融合度達到70%-80%時,按照傳(chuan) 代步驟收集細胞,並將細胞重懸於(yu) 凍存液中。
將重懸後的細胞分裝至凍存管中,每管約1 mL。
將凍存管放入-80°C冰箱內(nei) 進行初步冷凍,通常在該溫度下冷凍過夜。
隔天,將凍存管轉移至液氮罐中進行長期保存。
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參考文獻
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- 《南華大學》 2021年
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