
hey細胞係(人卵巢癌細胞係)
- 來源:高級別卵巢漿液性腺癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:hey細胞對順式鉑(順鉑)顯示出一定程度的耐藥性
HEY細胞源自歐洲女性患者高級別卵巢漿液性腺癌異種移植物(HX-62),最初分離自卵巢中分化乳頭狀囊腺癌患者的腹膜沉積物。
hey上皮樣細胞具有快速的倍增時間(約30小時),用作研究卵巢癌模型細胞。
hey細胞係特性
hey細胞在半固體(ti) 培養(yang) 中顯示出不同的生長能力
hey細胞能夠在免疫缺失的CBA/CJ小鼠中進行異種移植
hey細胞對順式鉑(順鉑)顯示出一定程度的耐藥性
快速倍增時間約為(wei) 30小時
hey細胞形態類似人類上皮細胞,適合研究卵巢癌的良好模型。
hey細胞係參數表
細胞名稱 | hey細胞係(人卵巢癌細胞係) |
別稱 | HEY,人卵巢癌細胞 |
種屬來源 | 人類 |
組織來源 | 卵巢,高級別卵巢漿液性腺癌,歐洲女性患者 |
細胞簡介 | HEY細胞係源自歐洲女性患者高級別卵巢漿液性腺癌異種移植物(HX-62),最初從卵巢中分化乳頭狀囊腺癌患者的腹膜沉積物中分離。 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生長條件 | 氣相:95%空氣,5% CO2;溫度:37°C;飽和濕度 |
培養基 | DMEM+10% FBS(胎牛血清)+1% P/S(青黴素/鏈黴素) |
傳代比例 | 推薦1:2至1:4 |
傳代周期 | 每2-3天一次 |
培養環境 | 氣相:95%空氣,5% CO2,37°C |
凍存條件 | 基礎培養基中加入10% DMSO,液氮保存 |
耐藥性 | 對順式鉑(順鉑)表現出一定程度的抗性 |
收錄 | CLS |
生物安全等級 | 1 |
支原體檢測 | 陰性 |
供應限製 | 僅供科學研究使用 |
培養教程
hey人卵巢癌細胞係培養教程
細胞複蘇
紫外照射工作台30分鍾,並用75%酒精擦拭台麵。
保持台麵清潔整潔,工作時打開通風。
從(cong) 液氮罐或-80℃冰箱中取出key細胞凍存管,立即放入37℃水浴鍋中解凍(2分鍾以內(nei) )。
解凍過程中,應不停晃動細胞凍存管,使key細胞均勻解凍。
將解凍的key細胞懸液轉移至5mL離心管中,加入3mL DMEM完全培養(yang) 基,吹打均勻。
4℃條件下以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清。
用3mL DMEM完全培養(yang) 基重懸key細胞,並轉移至6cm細胞培養(yang) 皿中。
將細胞培養(yang) 皿放入細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
觀察key細胞複蘇狀態,及時更換DMEM完全培養(yang) 基。
當key細胞密度達到80%-90%時,進行細胞傳(chuan) 代。
貼壁細胞傳代
棄置原培養(yang) 皿中的key細胞培養(yang) 基。
從(cong) 培養(yang) 皿邊緣加入2mL預熱的PBS溶液洗滌key細胞,避免直接衝(chong) 洗細胞表麵。
加入1mL預熱的0.25% Trypsin-EDTA溶液,使key細胞完全覆蓋。
孵育一定時間(根據key細胞類型而定),使key細胞脫離培養(yang) 皿。
加入1mL完全培養(yang) 基終止消化,並輕輕吹打細胞表麵。
將key細胞懸液轉移至5mL離心管中,以1000 rpm離心3分鍾。
棄去上清液,加入1mL完全培養(yang) 基重懸key細胞沉澱。
吹打key細胞使其為(wei) 單細胞狀態,盡量減少泡沫產(chan) 生。
進行key細胞計數,按1:3的比例進行傳(chuan) 代。
將key細胞懸液平均分配至新的細胞培養(yang) 皿中,每皿加入3mL完全培養(yang) 基。
將細胞培養(yang) 皿放入細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ,觀察key細胞狀態並及時更換培養(yang) 基。
細胞凍存
將新鮮的完全培養(yang) 基與(yu) DMSO按體(ti) 積比為(wei) 2:1混合,配製成key細胞凍存液。
同細胞傳(chuan) 代步驟3-5。
加入1mLkey細胞凍存液重懸key細胞沉澱,吹打均勻。
將key細胞懸液移至凍存管中,並標記好信息。
將凍存管放入程序降溫盒中,於(yu) -80℃冰箱中降溫過夜。
將凍存管轉移至液氮罐中保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 (Cosmic-CLP=1479988; PubMed=22710073; PubMed=25877200) |
11,12,13 (PubMed=30485824) | |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 8,12 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 30 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 7,13 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
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