COV434細胞（人卵巢顆粒腫瘤細胞）

COV434細胞係源自一名27歲女性患有轉移性顆粒細胞癌患者的卵巢腫瘤。然而，後續研究表明，COV434細胞係可能實際來源於(yu) 高鈣血症型卵巢小細胞癌。
COV434細胞係的建立來自於(yu) 患者的實體(ti) 原發性腫瘤。COV434細胞係保留了許多天然顆粒細胞的特征和功能，包括二倍體(ti) 、小卵泡樣聚集體(ti) 的生長特性，以及與(yu) 天然卵丘細胞共培養(yang) 時形成的細胞間縫隙連接。

COV434細胞特性特征

• COV434細胞表達完整的FSH受體(ti) 、缺乏LH受體(ti) 、表達特定的凋亡分子標誌物、表達TLR（toll樣受體(ti) ）

• COV434細胞能分泌17β-雌二醇，並在FSH刺激下增加分泌、對FSH刺激有增殖反應、無黃體(ti) 生成能力、保留了天然顆粒細胞的許多特征

• 可能攜帶p53基因的R248Q熱點突變

COV434細胞應用研究

• 17β-雌二醇對顆粒細胞瘤生長、遷移和侵襲的影響

• 如果突變型p53（失活R248Q熱點突變）作為(wei) 癌症特異性藥物靶點發揮作用

• TLR（toll樣受體(ti) ）在細胞係中的表達及其功能

COV434細胞參數表

COV434人卵巢顆粒腫瘤細胞培養教程

COV434細胞的複蘇

• 將COV434細胞在37℃水浴中快速解凍1-2分鍾。
  

• 將細胞懸液轉移到含預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000rpm離心5分鍾，去除凍存液。

• 棄去上清液，用新鮮培養(yang) 基重懸COV434細胞。

• 將細胞轉移到培養(yang) 瓶中，並放入培養(yang) 箱中培養(yang) 。

日常培養

• 換液頻率: 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 觀察: 觀察COV434細胞的生長狀態和形態（多邊形和紡錘形）。

COV434細胞傳代

• 傳(chuan) 代周期: 4-6天；傳(chuan) 代比例: 1:3 - 1:5

• 棄去舊培養(yang) 基，用PBS洗滌COV434細胞1-2次。
  

• 加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化3-5分鍾。

• 顯微鏡下觀察COV434細胞變圓並開始脫落。

• 加入含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕吹打COV434細胞，製成單細胞懸液。

• 按照1:3 - 1:5的比例將細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

COV434細胞凍存

• 凍存液配方: 基礎培養(yang) 基 + 8% DMSO + 20% FBS

• 細胞密度: 1-2 × 10^6 cells/mL

• 緩慢降溫，將COV434細胞置於(yu) -80℃冰箱中過夜。
  

• 次日轉入液氮中長期保存。

注意事項

• 支原體(ti) 檢測: 定期檢測COV434細胞，確保結果為(wei) 陰性。

• 內(nei) 毒素控製: 內(nei) 毒素含量應控製在≤3 EU/mL。

• 細胞生長控製: 避免COV434細胞過度生長，保持在對數生長期。

• 無菌操作: 在所有操作過程中保持無菌條件。

• 細胞形態觀察: 定期觀察COV434細胞形態，確保細胞生長狀態良好。

細胞特性觀察

• 小卵泡樣聚集體(ti) : 關(guan) 注COV434細胞是否形成小卵泡樣聚集體(ti) 。

• 細胞間縫隙連接: 觀察與(yu) 天然卵丘細胞共培養(yang) 時是否形成細胞間縫隙連接。