
人口腔上皮細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:口腔黏膜組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:原代上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基,含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
- 其他:增殖能力:能夠在體(ti) 外持續生長;基因表達:表達角蛋白(如KRT14、KRT4)、E-cadherin等
原代人口腔上皮細胞是從(cong) 健康個(ge) 體(ti) 的口腔黏膜(主要為(wei) 頰部和舌部區域)中分離獲得的一類複層扁平上皮細胞。人口腔上皮細胞呈扁平或多邊形,形態不規則,貼壁生長,基底層細胞為(wei) 矮柱狀,具有較強的增殖和分化能力,可不斷更新替代表層脫落的細胞。
細胞培養(yang) 采用含表皮生長因子(EGF)的特定培養(yang) 基,有助於(yu) 維持其增殖能力和表型特征。原代人口腔上皮細胞廣泛應用於(yu) 口腔疾病研究、藥物篩選和黏膜免疫研究中,是研究口腔癌、口腔潰瘍等疾病的重要體(ti) 外模型。
人口腔上皮細胞特性特征
原代人口腔上皮細胞表達多種與(yu) 上皮細胞功能相關(guan) 的基因,包括角蛋白(如KRT14、KRT4)和粘附分子(如E-cadherin),這些基因對於(yu) 維持上皮屏障功能至關(guan) 重要。
人口腔上皮細胞可能表達轉化生長因子β(TGF-β),該因子在組織修複和纖維化過程中起著重要作用。此外,生長因子如表皮生長因子(EGF)也可能影響其增殖和分化。
原代人口腔上皮細胞參與(yu) 多條信號通路,如MAPK通路和PI3K/Akt通路,這些通路與(yu) 細胞增殖、存活及應激反應密切相關(guan) 。
由於(yu) 其良好的增殖能力和生物相容性,原代人口腔上皮細胞被廣泛應用於(yu) 口腔疾病機製研究、藥物篩選及毒理學測試
人口腔上皮細胞參數表
細胞名稱 | 人口腔上皮細胞(kaiyun网站安全) |
來源 | 健康個體的口腔黏膜組織 |
形態 | 扁平或多邊形,上皮細胞,形成複層扁平上皮結構 |
純度 | 通常高於90% |
生物安全性 | 不含HIV-1、HBV、HCV等病原體 |
細胞周期 | 增殖周期約為24小時 |
幹細胞特性 | 基底層細胞具備增殖和分化能力 |
培養基 | 原代上皮細胞專用培養基,含 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
培養方式 | 貼壁培養 |
傳代頻率 | 每2-3天更換培養基,達到80%-90%融合度時進行傳代 |
初始接種密度 | 每平方厘米約1-2萬細胞 |
增殖能力 | 能夠在體外持續生長 |
信號通路 | 參與MAPK通路和PI3K/Akt通路 |
基因表達 | 表達角蛋白(如KRT14、KRT4)、E-cadherin等 |
生長因子 | 表達TGF-β和EGF等影響細胞增殖和分化的因子 |
代謝特性 | 能夠進行有氧呼吸,適應不同的營養條件 |
應用領域 | 用於基礎研究、藥物開發、毒理學測試、口腔疾病機製研究等 |
注意事項 | 建議用多聚賴氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)對接種培養皿包被處理 |
培養教程
原代人口腔上皮細胞培養教程
人口腔上皮細胞的提取和分離
在局部麻醉下,通過小型手術或活檢從(cong) 口腔黏膜(主要為(wei) 頰部)獲取組織樣本,提取人口腔上皮細胞。
使用消毒牙簽在口腔內(nei) 壁輕輕刮取黏膜,避免損傷(shang) 牙齒或其他組織,以獲取高質量的人口腔上皮細胞。
將獲取的黏膜組織置於(yu) 含有生理鹽水的無菌培養(yang) 皿中,切碎組織以釋放人口腔上皮細胞。
使用0.2%-0.3%的膠原酶消化組織30-60分鍾,幫助分離人口腔上皮細胞。
消化結束後,用離心機低速離心(300g,5分鍾)收集人口腔上皮細胞。
將人口腔上皮細胞沉澱重懸於(yu) 含有培養(yang) 基的懸液中,準備進行培養(yang) 。
人口腔上皮細胞的培養
將分離得到的人口腔上皮細胞懸液接種到培養(yang) 瓶中,加入預先準備好的DMEM或F-10培養(yang) 基。
培養(yang) 初期,每2-3天更換一次培養(yang) 基,維持人口腔上皮細胞的生長環境。
使用顯微鏡觀察人口腔上皮細胞的形態,健康的細胞呈扁平或多邊形,貼壁生長。
觀察到人口腔上皮細胞融合度達到80%-90%時,準備進行細胞傳(chuan) 代。
人口腔上皮細胞的傳代
用PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)洗滌人口腔上皮細胞,去除殘留的培養(yang) 基。
加入0.25%的胰蛋白酶,消化人口腔上皮細胞1-2分鍾,使其脫落。
中和胰蛋白酶後,輕輕吹打使人口腔上皮細胞懸浮。
將人口腔上皮細胞懸液按照1:2至1:3的比例稀釋,並轉移到新的培養(yang) 瓶中,加入新鮮培養(yang) 基。
注意事項
在提取和培養(yang) 人口腔上皮細胞的過程中,所有操作需在無菌環境中進行,以防止汙染。
保持培養(yang) 箱溫度在37℃,CO₂濃度為(wei) 5%,以提供適宜的環境,促進人口腔上皮細胞的健康生長。
每2-3天更換培養(yang) 基,提供新鮮營養(yang) ,並清除代謝廢物,以維持人口腔上皮細胞的最佳生長狀態。
定期顯微鏡觀察,若發現人口腔上皮細胞異常生長或汙染,應及時處理。
為(wei) 長期保存人口腔上皮細胞,可用10% DMSO的冷凍保護液處理細胞,並置於(yu) 液氮罐中儲(chu) 存,以維持細胞活性。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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