
NCI-H2009細胞(人肺腺癌細胞)
- 來源:肺腺癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM/F12+5% FBS+1% ITS+10nM Hydrocortisone+10nM β- Estradiol+1% P/S
- 其他:NCI-H2009細胞係通過EB病毒(EBV)轉化獲得永生化
NCI-H2009細胞係是一種人肺腺癌細胞係,於(yu) 1983年建立,分離自一名68歲白人女性4期腺癌患者的轉移淋巴結。該患者有長期吸煙史(約三十包年),並在手術前接受了放化療。NCI-H2009細胞係表現出上皮細胞樣的形態,廣泛應用於(yu) 肺癌研究,特別是在新療法和藥物效果的評估方麵,幫助研究人員深入了解肺腺癌的生物學特性,並為(wei) 藥物篩選和治療方法的開發提供了重要的實驗模型。此外,NCI-H2009細胞係與(yu) NCI-BL2009細胞係均來源於(yu) 同一名患者。
NCI-H2009細胞參數表
細胞名稱 | NCI-H2009細胞(人肺腺癌細胞) |
細胞別稱 | NCIH2009; H2009; H-2009 |
種屬來源 | 人 |
年齡/性別 | 68歲女性 |
組織來源 | 肺,來源於轉移淋巴結 |
疾病 | 肺腺癌 |
建立時間 | 1983年 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管 |
支原體檢測 | 無 |
細胞代數 | 10代以內 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養基 | DMEM/F12 + 5% FBS + 5μg/ml胰島素 + 0.01 mg/ml轉鐵蛋白 + 30 nM亞硒酸鈉 + 3.625 ng/ml氫化可的鬆 + 4.5 mM L-穀氨酰胺 + 1%雙抗 |
培養條件 | 95%空氣 + 5% CO2; 溫度:37°C |
傳代比例 | 1:2至1:6 |
傳代頻率 | 每周2至3次 |
倍增時間 | 約24-48小時 |
保存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
凍存條件 | 液氮氣相儲存 |
使用限製 | 僅限於科學研究,不可用於動物或人類疾病的治療 |
微生物檢測 | 陰性 |
pH值 | 7.2-7.4 |
培養教程
NCI-H2009人肺腺癌細胞培養教程
細胞接收與處理
收到H2009細胞時,首先用75%酒精對培養(yang) 瓶進行消毒。
在超淨台內(nei) 打開培養(yang) 瓶,確保操作的無菌性。
如果H2009細胞在運輸過程中未達到80%匯合度,將培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液轉移至離心管中。
加入6 mL完整培養(yang) 基,放入37°C培養(yang) 箱中孵育2-4小時以恢複細胞。
細胞生長與觀察
生長特性:H2009細胞為(wei) 貼壁生長,細胞形態呈上皮樣。
定期檢查H2009細胞的生長狀態,確保細胞無汙染(如支原體(ti) 汙染)。
當H2009細胞密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代。
傳代操作
傳(chuan) 代頻率:每周進行2-3次傳(chuan) 代,以保持H2009細胞的健康狀態。
用PBS緩衝(chong) 液洗滌H2009細胞,去除舊培養(yang) 基。
使用0.25%胰蛋白酶消化H2009細胞,待細胞脫落後加入完整培養(yang) 基終止消化。
混勻後,根據需要將細胞按照1:2至1:6的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中。
凍存與複蘇
使用無血清凍存液,將H2009細胞懸浮於(yu) 凍存液中,分裝至凍存管中。
將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中冷凍24小時後轉移至液氮儲(chu) 存。
從(cong) 液氮中取出凍存管,迅速在37°C水浴中解凍。
解凍後,立即加入完整培養(yang) 基,輕輕混勻並轉移至培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中恢複H2009細胞。
注意事項
定期檢測H2009細胞是否有支原體(ti) 汙染,必要時使用支原體(ti) 檢測試劑盒。
傳(chuan) 代操作時保持無菌環境,定期清潔和消毒實驗室。
在H2009細胞培養(yang) 過程中,注意個(ge) 人衛生,以防交叉汙染。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 16,19 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 10,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 14,16,17 |
D21S11 | 29 |
FGA | 22 (ATCC=CRL-5911; CCRID=1101HUM-PUMC000383; KCLB=92009; PubMed=25877200) |
22,26 (PubMed=11416159) | |
Penta D | 12 |
Penta E | 11 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 14 |