NCI-H3122細胞（人非小細胞肺癌細胞係）

NCI-H3122細胞是一種來源於(yu) 一名54歲白人男性的肺腺癌組織非小細胞肺癌（NSCLC）細胞株，由Modi等人在臨(lin) 床組織中分離純化。NCI-H3122細胞的倍增時間約為(wei) 48.5小時，呈現貼壁生長特性。NCI-H3122細胞係廣泛應用於(yu) 肺癌的生物學研究，特別是在評估對靶向藥物如克唑替尼的敏感性及耐藥性機製方麵，是非小細胞肺癌研究的理想模型。

NCI-H3122細胞特性特征

• 耐藥性：NCI-H3122細胞係在長期接觸克唑替尼後會(hui) 逐漸產(chan) 生耐藥性。研究表明，親(qin) 本細胞對克唑替尼的IC50值為(wei) 0.165 μmol/L，而耐藥細胞H3122CR的IC50值則增至1.627 μmol/L，耐藥指數約為(wei) 9.86。這表明細胞對藥物的敏感性顯著降低。

• 基因表達：NCI-H3122細胞係在分子水平上表現出與(yu) 非小細胞肺癌相關(guan) 的基因表達特征。具體(ti) 的基因突變和表達譜可能因研究而異，但通常涉及EGFR、ALK等重要的腫瘤相關(guan) 基因。
  

• 細胞周期：在藥物處理後，NCI-H3122細胞的細胞周期可能會(hui) 受到影響，表現出不同的增殖和凋亡特征。

• 生物標誌物：NCI-H3122細胞係可用於(yu) 篩選與(yu) 耐藥性相關(guan) 的生物標誌物，如miRNAs等，這些生物標誌物的變化可能與(yu) 細胞對克唑替尼的耐藥性相關(guan)

NCI-H3122細胞參數表

NCI-H3122人非小細胞肺癌細胞係培養教程

NCI-H3122細胞複蘇

• 預先準備好37℃的水浴，用於(yu) 快速解凍NCI-H3122細胞。
  

• 準備好適量的RPMI-1640培養(yang) 基，內(nei) 含10%胎牛血清（FBS）和1%青黴素/鏈黴素（P/S）。

• 準備好離心管和培養(yang) 瓶。

• 將裝有1 mL NCI-H3122細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中，輕輕搖動直至完全解凍（約1-2分鍾）。
  

• 解凍後，立即向凍存管中加入4 mL溫暖的培養(yang) 基，並輕輕混勻。

• 將NCI-H3122細胞懸液轉移至離心管，在1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 使用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H3122細胞，確保細胞均勻分散。
  

• 將重懸後的NCI-H3122細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，並在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。也可將細胞轉移至6 cm培養(yang) 皿中，加入約8 mL培養(yang) 基。
  

• 第二天更換培養(yang) 基，並使用顯微鏡檢查NCI-H3122細胞的貼壁情況和生長狀態。
  

NCI-H3122細胞傳代

• 當NCI-H3122細胞達到80%-90%的匯合度時，可以進行傳(chuan) 代操作。
  

• 小心地棄去培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。
  

• 用不含鈣、鎂的PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）輕輕洗滌NCI-H3122細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基。
  

• 加入2 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），輕輕晃動培養(yang) 瓶，使消化液均勻覆蓋NCI-H3122細胞。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中，消化1-2分鍾，直至大部分NCI-H3122細胞呈圓形並開始脫落。

• 觀察到NCI-H3122細胞開始脫落後，立即加入2-3 mL新鮮培養(yang) 基終止消化反應。
  

• 將NCI-H3122細胞懸液轉移至離心管，在1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H3122細胞，確保細胞分散均勻。
  

• 按1:2至1:4的比例將NCI-H3122細胞懸液分配到新的培養(yang) 瓶中，並補充適量培養(yang) 基。
  

• 將新傳(chuan) 代的NCI-H3122細胞放回培養(yang) 箱中，進行正常培養(yang) 。
  

NCI-H3122細胞凍存

• 配製凍存液：92% FBS和8% DMSO，或92%完全培養(yang) 基和8% DMSO。
  

• 按常規方法消化NCI-H3122細胞，並通過離心收集細胞沉澱。
  

• 用配置好的凍存液重懸NCI-H3122細胞，確保細胞分布均勻。
  

• 將NCI-H3122細胞懸液分裝至標記好的凍存管中。
  

• 將NCI-H3122細胞凍存管放入程序凍存盒中，先在-80℃冰箱中過夜，然後移入液氮中長期保存。
  

• 建議凍存後及時複蘇一管NCI-H3122細胞，檢查細胞的存活情況，確保凍存操作的成功。
  

NCI-H3122細胞培養注意事項

• 消化控製：不同品牌的胰蛋白酶消化效果不同，消化時間應嚴(yan) 格控製，以避免過度消化導致NCI-H3122細胞損傷(shang) 。

• 操作環境：在操作過程中，應避免產(chan) 生氣泡，以免影響NCI-H3122細胞的健康狀態。

• 汙染監測：定期檢查NCI-H3122細胞培養(yang) 環境中的細菌或真菌汙染，一旦發現，需立即采取措施處理。