NCI-H526細胞（人小細胞肺癌細胞係）

NCI-H526是一種源自55歲高加索男性小細胞肺癌（SCLC）患者的上皮細胞係，NCI-H526細胞係最初從(cong) 患者的肺部腫瘤組織中分離，是從(cong) 骨髓轉移病灶中獲得。NCI-H526細胞係因其獨特的生物學特性，廣泛用於(yu) 癌症生物學和藥物開發研究。
NCI-H526細胞表達多種癌基因，包括myc、myb、fes、fms、raf和ras家族。此外，NCI-H526細胞係顯示出胰島素樣生長因子II（IGF-II）和蛙皮的表達，但不表達左旋多巴羧化酶或蛙皮素樣免疫反應性。

NCI-H526細胞特性特征

• NCI-H526細胞在無胸腺裸鼠體(ti) 內(nei) 可產(chan) 生腫瘤，具有較強的致瘤性

• NCI-H526細胞在軟瓊脂糖中的菌落形成效率為(wei) 4.2%

• 表達高水平的神經元特異性烯醇化酶和肌酸激酶腦同工酶等小細胞肺癌生化標誌物
  

• 不表達左旋多巴羧化酶或蛙皮素樣免疫反應性

• 表達c-kit基因和N-myc基因，但不表達c-myc或L-myc

• N-myc基因擴增，觀察到p75c-myb表達

• NCI-H526細胞表達原癌基因N-ras、Ki-ras、Ha-ras和c-raf1

• 僅(jin) 檢測到微量的視網膜母細胞瘤易感基因RB mRNA，未檢測到RB蛋白

• NCI-H526細胞表達易於(yu) 檢測的p53 mRNA水平，存在大小異常的mRNA

NCI-H526細胞參數表

NCI-H526人小細胞肺癌細胞係培養教程

NCI-H526細胞的收貨與初步處理

• 收到NCI-H526細胞時，首先檢查運輸包裝和細胞瓶的完整性，確保沒有泄漏或培養(yang) 液渾濁等異常情況。

• 使用75%的酒精消毒NCI-H526細胞瓶外部，以防止外界汙染。

• 將NCI-H526細胞瓶放置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中，靜置2-4小時，使NCI-H526細胞適應培養(yang) 環境。

NCI-H526細胞的培養條件

• 溫度：培養(yang) NCI-H526細胞的溫度設定為(wei) 37°C。

• 氣體(ti) 組成：95%的空氣和5%的二氧化碳混合氣體(ti) 。

• 培養(yang) 類型：NCI-H526細胞為(wei) 懸浮生長類型，需定期檢查NCI-H526細胞密度並適時傳(chuan) 代。

NCI-H526細胞的傳代操作

• 傳(chuan) 代時機：當NCI-H526細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代比例：首次傳(chuan) 代建議以1:2的比例進行，即一個(ge) T25瓶的NCI-H526細胞傳(chuan) 至兩(liang) 個(ge) T25瓶或兩(liang) 個(ge) 6 cm培養(yang) 皿中。

• 棄去舊培養(yang) 基：小心棄去NCI-H526細胞的培養(yang) 上清，避免細胞過度損失。
  

• PBS衝(chong) 洗：使用無鈣鎂離子的PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗NCI-H526細胞1-2次。

  
  

• NCI-H526細胞解凍（如使用凍存細胞）：

• 將含有NCI-H526細胞的凍存管在37°C水浴中快速解凍。

• 解凍後，緩慢加入4 mL預溫的培養(yang) 基，輕輕混勻NCI-H526細胞。

• 在1000 rpm離心3分鍾，棄去上清液後加入新鮮培養(yang) 基並輕輕混勻NCI-H526細胞。

• NCI-H526細胞的接種：將NCI-H526細胞懸液接種於(yu) 含有適量培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶或6 cm培養(yang) 皿中，並在培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

• 換液：次日更換NCI-H526細胞的培養(yang) 基，並觀察NCI-H526細胞的生長狀態和密度。

NCI-H526細胞的凍存操作

• NCI-H526細胞的凍存過程：將NCI-H526細胞懸液按所需密度分裝至凍存管中，逐步降溫後存儲(chu) 於(yu) 液氮中。
  

NCI-H526細胞培養的注意事項

• NCI-H526細胞狀態檢查：在運輸過程中，NCI-H526細胞可能因溫度波動或振動而受損，導致部分死亡，這是正常現象。

• NCI-H526細胞解凍複蘇：收到凍存的NCI-H526細胞後，應立即進行解凍和複蘇，以確保較高的存活率。

• 幹冰檢查：若NCI-H526細胞通過幹冰運輸，需檢查幹冰是否完全揮發。如幹冰融化，應直接離心NCI-H526細胞並進行培養(yang) 接種。