
NCI-H1650細胞係是一種上皮形態的細胞係,最早於(yu) 1987年從(cong) 一位27歲的白人男性吸煙者(被診斷為(wei) 3B期支氣管肺泡癌)的胸腔積液中分離出來。
NCI-H1650細胞患者是一位長期吸煙者,胸腔積液中含有來自原發部位的癌細胞,是晚期肺癌轉移至胸腔並導致胸腔積液的典型情況。
nci-h1650細胞特性
細胞類型:人源腫瘤細胞,屬於(yu) 非小細胞肺癌細胞係。
生長特性:貼壁生長。
細胞形態:上皮細胞樣。
倍增時間:約42小時。
來源背景:源自27歲白人男性患者的胸腔積液,患者診斷為(wei) 支氣管肺泡癌,細胞取自轉移灶的胸水,表明這是晚期肺癌,患者有10年吸煙史。
nci-h1650細胞參數表
細胞名稱 | nci-h1650細胞(人非小細胞肺癌細胞係) |
別名 | H1650、H-1650、H1650_CO、NCIH1650 |
中文名稱 | 人非小細胞肺癌細胞 |
細胞類型 | 人源腫瘤細胞 |
細胞形態 | 上皮樣,貼壁細胞 |
來源 | 27歲白人男性患者的胸腔積液 |
原發疾病 | 支氣管肺泡癌(非小細胞肺癌) |
分離年份 | 1987年 |
培養基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS+ 1% P/S |
培養環境 | 37°C,5% CO2,95%空氣 |
傳代比例 | 1:2 - 1:4 |
換液頻率 | 每周2-3次 |
倍增時間 | 約42小時 |
凍存液體係 | 50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO |
生物安全等級 | BSL-1 |
離心條件 | 1100 rpm,室溫,4分鍾 |
抗生素使用 | 客戶可視實際情況選擇添加 |
短期保存 | -80°C冰箱(24小時內) |
長期保存 | 液氮 |
培養教程
nci-h1650人非小細胞肺癌細胞係培養教程
細胞複蘇
將凍存NCI-H1650細胞從(cong) 液氮中取出,迅速放入37°C水浴中解凍。
1100 rpm離心4分鍾,室溫,棄上清,用5 mL預熱的完全培養(yang) 基重懸細胞。
將細胞轉移到T25 cm2培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿中。
日常培養
每2-3天更換一次培養(yang) 基。
使用顯微鏡觀察NCI-H1650細胞生長狀態(推薦倍率:100X和40X)。
細胞傳代
當NCI-H1650細胞密度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。
用PBS洗滌細胞1-2次,加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液,37°C孵育2-3分鍾。
加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化,1100 rpm離心4分鍾,棄上清,用新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞,按1:2至1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
細胞凍存
製備凍存液:50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO。
將NCI-H1650細胞懸浮於(yu) 凍存液中,每管約1x10^6細胞。
使用程序降溫盒或梯度降溫,最終轉入液氮中長期保存。
注意事項
使用無菌操作和無菌器材。
定期更換培養(yang) 基,注意細胞汙染情況。
定期進行NCI-H1650細胞的細胞特性驗證和STR鑒定。
保持培養(yang) 環境清潔,個(ge) 人防護措施要到位。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D1S1656 | 15,15.3 |
D2S441 | 10 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 8,9 |
D8S1179 | 12 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 22 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 10 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 11 |
FGA | 20 (ATCC=CRL-5883; CCRID; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
20,23.2 (KCLB=91650) | |
Penta D | 8 |
Penta E | 12 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 18 |