
NCIH1993細胞(人非小細胞肺癌腺癌細胞)
- 來源:肺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H1993細胞係通常攜帶與(yu) 肺腺癌相關(guan) 的基因突變,如EGFR突變
NCI-H1993細胞係源自一名47歲白人女性患者,被診斷為(wei) 3A期非小細胞肺癌(腺癌)。這些細胞是從(cong) 患者的肺組織中提取並培養(yang) 的,具有典型的上皮形態特征。患者有顯著的吸煙曆史,具體(ti) 為(wei) 30包年,並伴有淋巴結轉移。這些特征使NCI-H1993細胞係在癌症研究中,特別是在非小細胞肺癌領域,成為(wei) 一個(ge) 重要的實驗模型。
NCIH1993細胞係由美國國家癌症研究所(NCI)的AF Gazdar和JD Minna團隊從(cong) 患者的肺組織中提取,形成了一種穩定的細胞株。在體(ti) 外培養(yang) 條件下,這些細胞表現出良好的生長能力,特征為(wei) 貼壁生長,並保持上皮樣的形態。
NCIH1993細胞還攜帶與(yu) 肺腺癌相關(guan) 的基因突變,例如EGFR突變,使其成為(wei) 研究靶向治療的理想模型。NCI-H1993細胞係對多種化療藥物和靶向藥物具有一定的敏感性,因而在新藥的療效評估方麵具有重要的應用潛力。
NCIH1993細胞參數表
細胞名稱 | NCIH1993細胞(人非小細胞肺癌腺癌細胞) |
別稱 | H1993; H-1993; NCIH1993 |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 47歲,女性 |
組織來源 | 肺 |
疾病特征 | 非小細胞肺癌(腺癌),3A期 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
背景簡介 | 來源於吸煙者,具有淋巴結轉移 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | DMEM或1640培養基 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 溫度:37°C;氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周傳代2次 |
倍增時間 | ~24-30小時 |
凍存條件 | 凍存液:55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;溫度:液氮 |
分子特征 | 常見EGFR突變 |
應用領域 | 藥物開發、基礎研究、生物標誌物篩選 |
注意事項 | 在傳代過程中,使用不含Ca++/Mg++的PBS或胰蛋白酶-EDTA溶液短暫衝洗細胞層,以去除血清痕跡。 |
解凍後的細胞應立即轉移至含有完全生長培養基的離心管中,並適當重懸後分裝至新的培養瓶中。 |
培養教程
NCIH1993人非小細胞肺癌腺癌細胞培養教程
細胞複蘇
確保所有操作在無菌環境中進行,以防止汙染。
配製完全培養(yang) 基,推薦使用DMEM或1640培養(yang) 基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青黴素-鏈黴素(P/S)。
將凍存管中的1 mL NCI-H1993細胞懸液置於(yu) 37°C水浴中快速解凍,約2-3分鍾,期間輕輕搖晃以確保均勻解凍。
解凍後立即用70%乙醇消毒凍存管外部。
將解凍的NCI-H1993細胞轉移至含9 mL完全培養(yang) 基的離心管,125 x g離心5-7分鍾。
棄去上清液,加入1-2 mL完全培養(yang) 基,輕輕重懸細胞沉澱。
將NCI-H1993細胞懸液轉移至T25或T75培養(yang) 瓶中,放入37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
細胞培養
培養(yang) 基:使用DMEM或1640培養(yang) 基,添加10% FBS和1% P/S。
培養(yang) 條件:37°C,氣相95%空氣和5%二氧化碳。
換液頻率:每2-3天更換一次培養(yang) 基,以維持NCI-H1993細胞的最佳生長環境。
細胞傳代
使用顯微鏡觀察細胞的生長狀態,通常在細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
吸出原培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,使用不含Ca²⁺/Mg²⁺的PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗NCI-H1993細胞兩(liang) 次。
加入2-3 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,輕輕搖晃以確保均勻分布,觀察細胞邊緣收縮且開始鬆動(通常需要5-15分鍾)。
添加6-8 mL完全培養(yang) 基以終止消化反應,並輕輕吹打使細胞層分散。
將部分NCI-H1993細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶,加入適量的完全培養(yang) 基並均勻混合。
根據實驗需求選擇傳(chuan) 代比例,通常為(wei) 1:2至1:6。
細胞凍存
配製凍存液,使用55%基礎培養(yang) 基、40% FBS和5%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)
收集並重懸適量的NCI-H1993細胞(通常約1×10^6 cells/mL)在凍存液中。
將細胞懸液分裝至1 mL凍存管中。
在-80°C冰箱中冷凍24小時後,將其轉移至液氮氣相中以進行長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X (ATCC=CRL-5909; Cosmic-CLP=908476; PubMed=25877200) |
X,Y (PubMed=20679594) | |
CSF1PO | 10,13 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12,14 (ATCC=CRL-5909) |
14 (PubMed=25877200) | |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,18 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 29 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 9 |
vWA | 17 |