ncih522細胞（人非小細胞肺癌細胞）

NCI-H522細胞係是一種來自人類非小細胞肺癌（NSCLC）的細胞係，來源於(yu) 一名58歲的白人男性肺腺癌患者，該患者有吸煙史（60包年），ncih522細胞係在其未接受治療前從(cong) 肺部分離。ncih522細胞係由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事建立，是研究肺腺癌的重要工具，特別是在吸煙相關(guan) 的肺癌研究。

NCI-H522是亞(ya) 二倍體(ti) 細胞係，模態染色體(ti) 數為(wei) 53，68%的細胞中存在模態染色體(ti) 。該細胞係多倍體(ti) 細胞占3.0%，具有11條標記染色體(ti) ，其中2條成對。這些標記物包括der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、成對的der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1)和der(16)t(16;?)(q24;?)，以及其他六個(ge) 標記。同時，缺失的染色體(ti) 包括正常的Y、N13、N15和N16染色體(ti) ，而X染色體(ti) 大多成對。

ncih522細胞基因和蛋白表達特征

• 基因突變：攜帶TP53基因密碼子191的突變

• 蛋白合成缺陷：不能合成肽神經調節蛋白B (NMB)、不能合成胃泌素釋放肽 (GRP)

• 蛋白表達：角蛋白染色呈陽性、波形蛋白染色呈陽性、神經絲(si) 三聯體(ti) 蛋白染色呈陰性

ncih522細胞參數表

ncih522人非小細胞肺癌細胞培養教程

ncih522細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的ncih522細胞，在37℃水浴中快速解凍（約1-2分鍾）。

• 將ncih522細胞懸液迅速轉移至含有10 mL預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸ncih522細胞，確保混勻。

ncih522細胞接種

• 將重懸的ncih522細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中。

• 添加6-8 mL完全培養(yang) 基，輕輕搖晃培養(yang) 瓶，使ncih522細胞均勻分布。

• 靜置培養(yang) 2-4小時，讓ncih522細胞穩定附著。

ncih522細胞傳代

• 當ncih522細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 用PBS輕輕洗滌ncih522細胞1-2次以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。

• 加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育2-3分鍾。

• 輕輕拍打培養(yang) 瓶，觀察ncih522細胞是否脫落。

• 加入等量完全培養(yang) 基終止胰酶消化。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸ncih522細胞。

• 按1:2比例將ncih522細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中。

ncih522細胞凍存

• 準備細胞凍存液（10% DMSO + 90% FBS）。

• 收集對數生長期的ncih522細胞。

• 將ncih522細胞懸浮在凍存液中，每毫升含約1-2×10^6個(ge) 細胞。

• 將ncih522細胞懸液分裝到凍存管中。

• 使用程序降溫盒，將ncih522細胞緩慢降溫至-80℃。

• 24小時後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：所有操作需在生物安全櫃中進行，保持無菌環境。

• ncih522細胞狀態監測：定期檢查ncih522細胞形態和密度，避免過度生長。

• 汙染防控：注意細菌、真菌或支原體(ti) 汙染，必要時使用抗生素處理。

• 傳(chuan) 代管理：避免傳(chuan) 代次數過多，以保持ncih522細胞特性。

常見問題及解決方案

• ncih522細胞生長緩慢：

• 檢查培養(yang) 基成分，確保合適。

• 增加接種密度。

• 使用低代次ncih522細胞。

  
  

• ncih522細胞汙染：

• 嚴(yan) 格執行無菌操作。

• 定期檢查ncih522細胞狀態，及時處理汙染。

  
  

• ncih522細胞貼壁不良：

• 控製胰酶消化時間和力度。

• 確保ncih522細胞完整性，避免過度消化。

  
  

• ncih522細胞形態改變：

• 定期更換低代次ncih522細胞，觀察形態變化。

  
  

• 凍存和複蘇問題：

• 使用合適的凍存液和程序降溫方法，確保ncih522細胞存活率。