NCIH596細胞（人肺腺鱗癌細胞）

NCI-H596是一種人肺腺鱗癌細胞係，1983年由Gazdar AF和Oie H從(cong) 一名73歲白人男性肺腺鱗癌患者的胸壁腫瘤中分離。NCIH596細胞係在染色體(ti) 水平表現為(wei) 接近三倍體(ti) ，模態數=71；範圍=65至75，常見的染色體(ti) 標記包括del（1）（p22）、i（3q）和i（7p）。

NCIH596細胞特性特征

• 表現出鱗狀分化標誌，包括：交聯包膜形成、穀氨酰胺轉移酶活性、被膜素（外皮蛋白）產(chan) 生；

• 致瘤性：在裸小鼠身上具有致瘤性

• 細胞類型：表達腺癌和鱗狀細胞癌的混合特征

• 分化標誌物：表達鱗狀分化的多種標誌物，如角蛋白和波形蛋白染色陽性，神經絲(si) 三聯體(ti) 蛋白染色陰性

• p53 mRNA水平：表達正常肺水平的p53 mRNA，未見明顯的結構DNA異常

• 同工酶分析：AK-1、ES-D、G6PD、PGM1、PGM3均表達，Me-2不表達，GLO-I表型為(wei) B型

NCIH596細胞參數表

NCIH596人肺腺鱗癌細胞培養教程

1. NCIH596細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出NCIH596細胞凍存管，在37°C水浴中快速解凍1-2分鍾。

• 解凍後立即將NCIH596細胞懸液轉移到含有預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 輕柔離心（800rpm，5分鍾），去除凍存保護劑DMSO。

• 用預熱的完全培養(yang) 基重懸NCIH596細胞，避免劇烈震蕩。

2. NCIH596細胞接種

• 將NCIH596細胞懸液轉移到25cm²培養(yang) 瓶中。

• 加入適量完全培養(yang) 基，使總體(ti) 積達到5-7mL。

• 輕輕搖晃培養(yang) 瓶，使NCIH596細胞均勻分布。

• 將培養(yang) 瓶放入37°C，5% CO2培養(yang) 箱中。

3. NCIH596細胞培養

• 每1-2天觀察NCIH596細胞生長狀態，必要時更換培養(yang) 基。

• 當NCIH596細胞匯合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

4. NCIH596細胞傳代

• 棄去舊培養(yang) 基，用PBS輕輕衝(chong) 洗NCIH596細胞1-2次。

• 加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分鍾。

• 輕輕拍打培養(yang) 瓶，觀察NCIH596細胞脫落情況。

• 加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化。

• 800rpm離心5分鍾，棄上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCIH596細胞。

• 按1:2或1:3的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

5. NCIH596細胞培養基更換

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 棄去舊培養(yang) 基，加入新鮮預熱的完全培養(yang) 基。

6. NCIH596細胞凍存

• 收集對數生長期的NCIH596細胞。

• 製備凍存液（90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO）。

• 調整NCIH596細胞濃度至1-2×10^6 cells/mL。

• 將NCIH596細胞懸液分裝到凍存管中，每管1mL。

• 使用程序降溫盒，將NCIH596細胞緩慢降溫至-80°C。

• 24小時後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 無菌操作: 在整個(ge) NCIH596細胞培養(yang) 過程中，務必保持無菌環境，以防止細胞汙染。

• 細胞密度: 避免NCIH596細胞過度生長或長期處於(yu) 高密度狀態，以確保良好的細胞狀態和形態。

• 細胞形態觀察: 定期檢查NCIH596細胞形態和生長狀態，及時發現和處理異常情況。

• 支原體(ti) 檢測: 定期進行支原體(ti) 檢測，確保NCIH596細胞無汙染。

• 細胞特性: NCIH596細胞為(wei) 上皮樣形態，貼壁生長，表現出鱗狀分化標誌，如穀氨酰胺轉移酶活性和被膜素產(chan) 生。