KYSE520細胞（人食管鱗癌細胞）

KYSE520細胞係源自一名58歲日本女性的中分化浸潤性食管鱗癌，在治療前通過下胸腔內(nei) 的食管切除術獲得。該腫瘤已侵襲到動脈外膜，屬於(yu) 第二期。KYSE520細胞係是食管最常見的癌症類型之一，起源於(yu) 食管內(nei) 表麵的扁平細胞。

在細胞特性方麵，KYSE520細胞呈上皮樣形態，通常以單層生長，偶爾可觀察到約1%的多核巨細胞，生長方式為(wei) 貼壁生長。KYSE520細胞為(wei) 研究食管鱗癌的生物學特性和治療策略提供了重要的實驗模型。

KYSE520細胞特性特征

• 基因突變: KYSE520細胞攜帶p53基因突變，這是一種常見的腫瘤抑製基因突變，通常與(yu) 癌症的發展相關(guan) 。

• 癌基因擴增: KYSE520細胞係中MYC癌基因的擴增被觀察到，MYC是一個(ge) 重要的轉錄因子，與(yu) 細胞增殖、代謝和腫瘤發生密切相關(guan) 。

• 細胞表麵標誌物: KYSE520細胞表達食管鱗癌相關(guan) 的特定標誌物，這些標誌物在研究中有助於(yu) 識別和分析腫瘤細胞的特性。

• 核型分析: KYSE520細胞顯示出人類平坦模式的低三倍體(ti) 核型，並伴有8%的多倍體(ti) 現象。這種遺傳(chuan) 不穩定性常見於(yu) 癌症細胞，有助於(yu) 其適應惡劣環境

KYSE520細胞參數表

KYSE520人食管鱗癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存管，將其迅速置於(yu) 37°C的水浴中搖晃解凍，直到完全解凍。

• 向解凍的KYSE-520細胞中加入4mL RPMI-1640培養(yang) 基（含10% FBS），輕輕混合均勻。

• 在1000 rpm的條件下離心4分鍾，去掉上清液。

• 補加1-2mL培養(yang) 基後，輕輕吹打混勻KYSE-520細胞懸液。

• 將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，或加入約8mL培養(yang) 基至10cm培養(yang) 皿中，培養(yang) 過夜。

• 次日更換培養(yang) 基並檢查KYSE-520細胞的生長狀態和密度。

細胞傳代

• 當KYSE-520細胞生長密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 棄去培養(yang) 基，使用無鈣鎂PBS清洗細胞1-2次。

• 加入1mL的消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53mM EDTA）至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37°C的培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 在顯微鏡下觀察細胞，待KYSE-520細胞大部分變圓並脫落後，迅速取出培養(yang) 瓶，輕輕敲打後加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 按照6-8mL/瓶的比例補加培養(yang) 基，輕輕混勻後進行離心，在1000 rpm下離心4分鍾。

• 棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基，輕輕吹勻KYSE-520細胞懸液。

• 將細胞懸液以1:2至1:3的比例分配至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，含8mL培養(yang) 基。

細胞凍存

• 當KYSE-520細胞生長狀態良好且達到傳(chuan) 代要求時，可以進行細胞凍存。

• 首先棄去培養(yang) 基，用PBS清洗KYSE-520細胞一次。

• 加入1mL胰蛋白酶，待細胞變圓並脫落後，加入1mL含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 在1000 rpm條件下離心4分鍾，去掉上清液。

• 加入1mL血清重懸細胞，並根據細胞數量加入90% FBS和10% DMSO，輕輕混合均勻。

• 每支凍存管中凍存1mL KYSE-520細胞懸液，細胞密度應不低於(yu) 1×10^6/mL。

• 將凍存管放入程序降溫盒中，置於(yu) -80°C冰箱中冷凍2小時，然後轉移至液氮罐中儲(chu) 存。