
KYSE180細胞(人食管鱗狀細胞癌細胞)
- 來源:食管
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:KYSE-180細胞中多種腫瘤相關(guan) 基因(如STMN1)表達上調
KYSE180細胞係源自一名53歲男性在治療前從(cong) 中段胸內(nei) 食管切除的分化良好的食管鱗狀細胞癌患者,手術切除的腫瘤為(wei) 高分化的食管鱗狀細胞癌,並且已侵及周圍結構。KYSE180細胞係是由日本研究團隊在1990年代從(cong) 該患者的腫瘤組織中成功分離出來。
KYSE180細胞作為(wei) 食管鱗狀細胞癌研究的典型模型,具備較高的增殖率和侵襲性,能夠在體(ti) 外穩定生長。KYSE180細胞在多種研究領域中具有廣泛應用,包括藥物敏感性測試、癌症生物學和分子機製探究等。該細胞係在食管癌領域內(nei) 尤其被用於(yu) 新藥篩選及疾病機製的深入研究。
KYSE180細胞特性特征
基因表達:KYSE180細胞中多種腫瘤相關(guan) 基因表達上調,其中STMN1(Stathmin 1)是一個(ge) 重要的標誌物。研究顯示STMN1在KYSE-180中的表達顯著高於(yu) 正常食管上皮細胞,並且在食管癌組織中普遍高表達。
蛋白質修飾:通過二維Western blot分析發現,STMN1在KYSE-180中以兩(liang) 種不同的蛋白點形式存在,表明可能存在特定的修飾狀態。
STMN1表達:STMN1在KYSE-180細胞中的強表達與(yu) 腫瘤的侵襲性和增殖能力相關(guan) 。STMN1蛋白含有149個(ge) 氨基酸,參與(yu) 微管解聚及細胞骨架的形成與(yu) 維持。
臨(lin) 床相關(guan) 性:STMN1的高表達與(yu) 食管癌臨(lin) 床分級及預後密切相關(guan) ,為(wei) 其作為(wei) 潛在治療靶點提供了依據
KYSE180細胞參數表
細胞名稱 | KYSE180細胞(人食管鱗狀細胞癌細胞) |
別名 | KYSE 180; KYSE180; Kyse180; KY180 |
組織來源 | 人食管 |
疾病 | 食管鱗狀細胞癌 |
患者 | 53歲男性 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
形態學 | 上皮細胞樣 |
生長方式 | 貼壁生長 |
傳代比例 | 1:2 - 1:5 |
細胞消化時間 | 2-3分鍾 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S或Ham's F12 : RPMI1640 (1:1) + 2% FBS |
氣相 | 95% 空氣, 5% CO2 |
溫度 | 37°C |
濕度 | 70%-80% |
倍增時間 | ~15.2小時 - ~50小時 |
凍存液 | 90% FBS + 10% DMSO或95% 培養基 + 5% DMSO |
支原體檢測 | 熒光法(-) 陰性 |
保藏機構 | DSMZ (ACC-379), JCRB (JCRB1083) |
用途限製 | 僅限科研,不可作為治療用途 |
培養教程
KYSE180人食管鱗狀細胞癌細胞培養教程
解凍KYSE180細胞
解凍步驟:將凍存管迅速置於(yu) 37°C的水浴中,保持凍存管口高於(yu) 水麵,輕輕搖動,約2分鍾內(nei) 解凍完成。
消毒處理:解凍後立即用70%乙醇擦拭凍存管表麵,進行無菌操作。
轉移操作:將解凍的KYSE180細胞懸液轉移至預熱的含5 mL完全培養(yang) 基的離心管中。
離心步驟:以200×g離心5-10分鍾,去除上清液中的DMSO及凍存液。
重懸細胞:用37°C的完全培養(yang) 基重新懸浮KYSE180細胞,輕輕混勻後,將細胞轉移至新的培養(yang) 瓶中。
培養KYSE180細胞
培養(yang) 條件:將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
細胞觀察:每天觀察KYSE180細胞生長情況,確保細胞狀態正常,無汙染跡象。
當KYSE180細胞達到70%-80%匯合時,及時進行傳(chuan) 代。
去除舊培養(yang) 基後,用無鈣鎂的PBS清洗細胞兩(liang) 次。
加入適量胰蛋白酶(0.25%),消化2-3分鍾,直到KYSE180細胞輕微變圓並脫落。
立即加入新鮮的完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶,並將細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中。
根據實驗需求,以1:2至1:5的比例稀釋傳(chuan) 代。
凍存KYSE180細胞
製備凍存液:使用90%胎牛血清和10%DMSO混合成凍存液。
收集KYSE180細胞:在傳(chuan) 代過程中收集KYSE180細胞,離心去除上清。
重懸細胞:將KYSE180細胞用凍存液重新懸浮,每個(ge) 凍存管加入約1 mL細胞懸液。
將KYSE180細胞放入-80°C冰箱中緩慢冷凍24小時。
之後轉移至液氮罐中,進行長期保存。
KYSE180細胞在不同培養基中的表現
常規培養(yang) 基配置RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青黴素/鏈黴素 (P/S)
表現:該配置是最常用的培養(yang) 基,能夠支持KYSE180細胞的良好生長和增殖,細胞倍增時間約為(wei) 40-50小時。KYSE180細胞呈上皮樣形態,貼壁生長,形態良好。
替代培養(yang) 基Ham's F12 : RPMI-1640 (1:1) + 2% FBS
表現:該混合培養(yang) 基可替代RPMI-1640,能夠維持KYSE180細胞的正常生長和增殖,生長速度略有差異,但形態保持穩定。
KYSE180細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
表現:由技術團隊優(you) 化,經過測試能維持KYSE180細胞的最佳生長狀態,細胞形態和增殖能力均達到較高水平,無需額外添加成分,操作簡單。
儲(chu) 存條件:該培養(yang) 基應在2-8°C下避光保存,有效期為(wei) 6個(ge) 月。
注意事項
無菌操作:所有操作應嚴(yan) 格保持無菌,推薦在II級生物安全櫃內(nei) 完成。
培養(yang) 基選擇:不同培養(yang) 基可能影響KYSE180細胞增殖速度和形態,需根據實驗需求選擇最合適的培養(yang) 基。
支原體(ti) 檢測:定期進行支原體(ti) 檢測,確保KYSE180細胞無汙染。
傳(chuan) 代頻率:避免過度傳(chuan) 代,傳(chuan) 代頻率過高可能影響KYSE180細胞的特性。
相關資料
- 人食管癌細胞係有哪些?
- 人食管癌細胞係是在實驗室中從人類食管癌組織中分離出來的細胞係。這些細胞係被用於研究食管癌的...
- Barrett永生化食管上皮細胞
- 原代Barrett食管上皮細胞在培養中的壽命有限,並且通常不含有可導致Barrett食管癌...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 |
D2S1338 | 27 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 8,11 |
D7S820 | 9,12 (DSMZ=ACC-379; JCRB=JCRB1083; PubMed=25877200) |
12 (Cosmic-CLP=907318) | |
D8S1179 | 10,12 (PubMed=25877200) |
12 (DSMZ=ACC-379) | |
D13S317 | 9,12 |
D16S539 | 9 (PubMed=25877200) |
9,10 (Cosmic-CLP=907318; DSMZ=ACC-379; JCRB=JCRB1083) | |
D18S51 | 20 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 30 (PubMed=25877200) |
30,33 (DSMZ=ACC-379) | |
FGA | 19,21 |
Penta D | 9 |
Penta E | 5,12 |
TH01 | 7 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
上一篇:OE33細胞(人食管腺癌細胞)