ECA109細胞（人食管癌細胞）

ECA109細胞係建立於(yu) 1973年，源自中國一位患者的食管中段鱗狀細胞癌組織。ECA109細胞係通過小塊法原代培養(yang) 的方法進行建立。具體(ti) 操作是將腫瘤組織切割成小塊，並在適宜的培養(yang) 基中培養(yang) 以促進細胞生長。

ECA109細胞特性特征

• 致瘤性：Eca109細胞確實在BALB/c裸鼠中具有致瘤性，能夠形成腫瘤。

• 細胞周期：Eca-109細胞在接受不同藥物（如芹菜素和苦參堿）處理後，細胞周期會(hui) 發生變化。芹菜素能夠使Eca-109細胞周期阻滯在S期，影響DNA合成，從(cong) 而抑製細胞增殖並誘導凋亡。
  

• 凋亡特征：Eca-109細胞在藥物處理後表現出明顯的凋亡特征，包括細胞形態的變化和凋亡小體(ti) 的形成。

• 基因表達：Eca-109細胞的基因表達特征與(yu) 食管癌相關(guan) ，涉及多個(ge) 信號通路和基因的調控。

ECA109細胞參數表

ECA109人食管癌細胞培養教程

ECA109細胞複蘇

• 配製完全培養(yang) 基：RPMI-1640基礎培養(yang) 基中添加10%胎牛血清和1%青黴素-鏈黴素混合抗生素，以適合ECA109細胞的生長。
  

• 將培養(yang) 基在37℃水浴中預熱至適宜溫度，以保證ECA109細胞的最佳複蘇條件。

• 從(cong) 液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存的ECA109細胞，立即放入37℃的水浴中，快速搖動凍存管，使ECA109細胞迅速解凍（通常不超過1分鍾）。
  

• 將解凍後的ECA109細胞懸液迅速移至15ml離心管中，加入5ml預熱的完全培養(yang) 基以稀釋DMSO。

• 在1000rpm條件下離心5分鍾，棄去上清液，保留ECA109細胞沉澱。

• 輕輕重懸ECA109細胞沉澱於(yu) 2ml完全培養(yang) 基中，並將ECA109細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶，做好標記。

• 將培養(yang) 瓶放置在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中孵育ECA109細胞。
  

• 24小時後，檢查ECA109細胞是否貼壁；未貼壁的ECA109細胞可能已失活。

ECA109細胞傳代

• 傳(chuan) 代準備：當ECA109細胞在培養(yang) 瓶內(nei) 生長至80%-90%匯合度時，即可進行傳(chuan) 代。

• 輕輕吸棄舊的培養(yang) 基，用1ml無菌PBS清洗ECA109細胞一次，以去除殘留的培養(yang) 基。
  

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液，放置在37℃培養(yang) 箱中消化2-5分鍾，期間觀察ECA109細胞脫落情況。

• 當大部分ECA109細胞脫落時，立即加入2ml完全培養(yang) 基終止消化作用，並輕輕吹打以懸浮ECA109細胞。

• 在1000rpm條件下離心5分鍾，棄去上清液。

• 以2ml完全培養(yang) 基重懸ECA109細胞，然後按1:3或1:5的比例將ECA109細胞分配至新的培養(yang) 瓶中。

• 將新的培養(yang) 瓶放回37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ECA109細胞，直至ECA109細胞再度達到傳(chuan) 代要求。
  

ECA109細胞凍存

• 凍存準備：配製凍存液：完全培養(yang) 基中加入10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO）作為(wei) 保護劑，以適應ECA109細胞的凍存需求。

• 當ECA109細胞狀態良好且生長旺盛時，收集ECA109細胞並進行離心，棄去上清液。
  

• 用凍存液重懸ECA109細胞，將ECA109細胞濃度調整至1×10^6 cells/ml。

• 將ECA109細胞懸液分裝至凍存管中，並標記清楚。

• 將ECA109細胞凍存管逐步降溫至-80℃，然後移至液氮罐中長期保存ECA109細胞。
  

注意事項

• 培養(yang) 基應現用現配，避免使用長時間存放的培養(yang) 基，以保障ECA109細胞的培養(yang) 質量。

• 在處理ECA109細胞時，應始終在超淨工作台內(nei) 進行操作，以減少ECA109細胞的汙染風險。

• ECA109細胞複蘇後，應在24小時內(nei) 觀察ECA109細胞狀態，及時調整培養(yang) 條件，確保ECA109細胞的最佳狀態。