KYSE150細胞（人食管鱗癌細胞）

KYSE-150細胞是一種人類食管鱗狀細胞癌細胞，來源於(yu) 一位49歲日本女性。該患者在接受放射治療後，從(cong) 其上食道切除的低分化鱗狀細胞癌組織中分離。KYSE-150細胞成為(wei) 研究食管癌及其治療的重要模型。

KYSE150細胞特性特征

基因擴增：KYSE150細胞攜帶擴增的致癌基因，包括c-erb-B（8倍擴增）和cyclin D1（4倍擴增）。

腫瘤形成能力：KYSE-150細胞在裸鼠中能夠產(chan) 生腫瘤，證明其具有良好的腫瘤形成能力。

KYSE150細胞參數表

KYSE150人食管鱗癌細胞培養教程

KYSE150細胞培養步驟

• 將凍存的KYSE150細胞從(cong) -80°C或液氮中取出後，立即放入37°C水浴中解凍，持續1-2分鍾，直到完全解凍。

• 解凍後迅速將KYSE150細胞轉移到含10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基中，並輕輕混勻。

• 將解凍後的KYSE150細胞懸液接種到T25培養(yang) 瓶中，接種密度為(wei) 1 x 10^5 - 2 x 10^5細胞/mL。

• 將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。

KYSE150細胞換液與傳代

• 每2-3天換液一次，即使培養(yang) 基未變黃也要及時換液。

• 在換液時，輕輕傾(qing) 斜培養(yang) 瓶，使用巴氏吸管吸取上清液，避免KYSE150細胞脫落。

• 補充等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基以維持適宜的培養(yang) 條件。

• 當KYSE150細胞生長至80%-90%匯合時，應進行傳(chuan) 代，一般每3-4天進行一次。

• 用PBS緩衝(chong) 液清洗KYSE150細胞，去除殘留的培養(yang) 基。

• 加入0.25%胰蛋白酶消化KYSE150細胞2-3分鍾，觀察細胞是否開始脫落。

• 加入等體(ti) 積的培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打使KYSE150細胞充分分散。

• 將KYSE150細胞懸液轉移到離心管中，1000rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 重懸KYSE150細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中，並按照1:4的比例接種到新培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 細胞敏感性：KYSE150細胞對氧氣、細胞密度及營養(yang) 條件極為(wei) 敏感，需定期換液和傳(chuan) 代，以避免細胞應激和死亡。

• 建議平放培養(yang) 瓶，以增大空氣交換麵積，確保液體(ti) 高度不超過3mm。

• 當KYSE150細胞碎片較多時，才進行離心清洗，避免過度吹打和離心對細胞造成損傷(shang) 。

• 監測細胞狀態：定期顯微鏡下觀察KYSE150細胞的形態和生長情況，確保細胞維持在健康狀態。

傳代頻率的調整

• 根據KYSE150細胞的生長狀態和密度，傳(chuan) 代頻率可以適當調整：

• 正常生長：KYSE150細胞達到80%-90%匯合時進行傳(chuan) 代，通常每3-4天傳(chuan) 代一次。

• 快速生長：如果KYSE150細胞增殖較快，可縮短傳(chuan) 代間隔至每2-3天一次。

• 慢生長：若KYSE150細胞生長緩慢，可延長傳(chuan) 代時間，但不宜超過5天，以免KYSE150細胞過度密集導致死亡。