
kyse510細胞係(人食管癌細胞)
- 來源:食管鱗癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮樣細胞生長為(wei) 具有多層病灶的單層細胞
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640:Ham's F-12 (1:1)+10%FBS+1%P/S
- 其他:kyse510細胞攜帶p53基因突變,表現MYC、HST1和CYCLIN D1基因。
kyse510細胞係源自一位67歲女性患者的頸段食管,該患者曾因高度分化的食管鱗狀細胞癌接受順鉑和放療治療後進行手術切除。
kyse510細胞係具有中度侵襲性,僅(jin) 輕微侵入食管的外膜。
kyse510細胞攜帶p53基因的突變,並表現出MYC、HST1和CYCLIN D1基因的正常表達,而非擴增。
kyse510細胞在裸鼠模型中具有適度分化的腫瘤特征,但未能完全誘導高分化腫瘤形成。
kyse510細胞係特性
kyse510細胞攜帶p53基因突變,表現MYC、HST1和CYCLIN D1基因。
kyse510細胞形態為(wei) 上皮樣細胞,生長方式為(wei) 貼壁生長。
kyse510細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 可形成適度分化的腫瘤特征。
kyse510細胞係參數表
細胞名稱 | kyse510細胞係(人食管癌細胞) |
細胞別稱 | Kyse-510, KYSE510 |
組織來源 | 食管鱗癌 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
細胞類型 | 食管鱗狀細胞癌 |
細胞來源 | 日本女性,67歲 |
分離建係 | 從頸部食管組織中分離建立,該患者接受了順鉑和放療治療 |
細胞形態 | 高度分化的嗜酸性粒細胞鱗狀細胞癌,具有中度外膜侵襲 |
細胞形態 | 上皮樣細胞,生長為具有多層病灶的單層細胞 |
生長特性 | 貼壁生長 |
分子特征 | 攜帶p53基因突變 |
基因擴增 | MYC、HST1、CYCLIN D1 |
裸鼠體內實驗 | 在裸鼠體內形成適度分化的腫瘤組織 |
細胞生長特性 | 粘附性細胞,需要在含有適當培養基的培養皿中培養 |
完全培養基 | 45% RPMI-1640 + 45% Ham's F-12 + 10% FBS + 1% P/S |
培養環境 | 37°C,5% CO2 |
凍存條件 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
消化時間 | 3-5分鍾 |
傳代比例(密度) | 1:3-1:5 |
換液頻次 | 2-3次/周 |
倍增時間 | 24-30小時 |
生物安全等級 | 1 |
細胞保藏中心 | DSMZ: ACC-374; JCRB: JCRB1436 |
應用領域 | 癌症研究,特別是食管鱗狀細胞癌的分子機製研究和藥物治療測試 |
培養教程
kyse510人食管癌細胞貼壁培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出KYSE-510細胞凍存管,快速置於(yu) 37°C水浴中,直至完全解凍,避免結晶殘留。
外部清潔:使用75%酒精擦拭凍存管表麵,確保無外部汙染。
將解凍的細胞懸液轉移到含有5ml預熱完全培養(yang) 基的15ml離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清液。
重懸細胞:加入3-5ml預熱的完全培養(yang) 基,輕輕吹勻,確保細胞均勻懸浮。
將細胞懸液均勻分配到預熱的T25培養(yang) 瓶中,添加適量的完全培養(yang) 基使細胞密度適宜。
將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
第二天,檢查細胞生長情況和密度,根據需要換液或進行下一步操作。
細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入適量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液至培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察細胞變圓脫落情況。
細胞大部分變圓並脫落後,立即添加5ml以上含10% FBS的完全培養(yang) 基終止消化。
輕輕吹打細胞使之完全脫落,收集細胞懸液至新的15ml離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清液,補充1-2ml完全培養(yang) 基,輕輕吹勻。
將細胞懸液按1:2的比例分配到預熱的新T25培養(yang) 瓶中,補充適量的完全培養(yang) 基。
放回37°C、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞凍存
在細胞生長至80%麵積時,收集細胞懸液至離心管中,留5ml完全培養(yang) 基。
加入適量的0.25%胰蛋白酶消化液,觀察細胞變圓脫落情況。
輕輕吹打細胞使之完全脫落,轉移至新的15ml離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清液,加入1ml雅吉生物無血清凍存液(C7001)混勻。
直接將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中過夜,確保凍存過程安全無誤。
長期儲(chu) 存:24小時後,轉移到液氮罐中進行長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 (DSMZ=ACC-374) |
11,13 (Cosmic-CLP=907321; JCRB=JCRB1436; PubMed=25877200) | |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 31 |
FGA | 22 |
Penta D | 12 |
Penta E | 16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8 |
vWA | 14 |
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