
NCI-H647人肺癌細胞
- 來源:肺腺癌,非小細胞肺癌;轉移部位:胸腔積液
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:NCI-H647細胞能夠產(chan) 生人絨毛膜促性腺激素(hCG)的β亞(ya) 單位以及腫瘤相關(guan) 抗原
NCI-H647細胞係是從(cong) 一名56歲不吸煙的白人男性患者(患有3A期腺鱗癌,曾接受放射治療)的肺癌組織中分離的。NCI-H647細胞來源於(yu) 轉移性胸腔積液。具備大細胞肺癌的特征,包括快速生長以及在免疫功能低下小鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤的能力。
NCI-H647細胞模態數為(wei) 89,範圍在74至176之間,並表現出t(3p14;11p15)染色體(ti) 易位。
NCI-H647人肺癌細胞特性
NCI-H647細胞係具備上皮樣形態特征,貼壁生長,通常在3天內(nei) 即可長滿培養(yang) 瓶。
NCI-H647細胞能夠產(chan) 生人絨毛膜促性腺激素(hCG)的β亞(ya) 單位以及腫瘤相關(guan) 抗原。
NCI-H647人肺癌細胞參數表
細胞名稱 | NCI-H647人肺癌細胞 |
細胞別稱 | NCI-H647人肺癌細胞、 H647、H-647、H647ell、NCIH647 |
細胞來源 | 肺;轉移部位:胸腔積液;1983年10月建係 |
患者信息 | 人 / 男 / 56歲 |
疾病類型 | 3A期,腺鱗癌;非小細胞肺癌 |
生物安全等級 | BSL1 |
形態生長特性 | 上皮細胞樣 / 貼壁生長 |
培養條件 | 95%空氣,5%二氧化碳;37℃ |
倍增時間 | 約3天 |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1%P/S |
傳代換液頻率 | 1:3-1:6 ;每周2次 |
保存條件 | 低溫避光; 1×10^6 cells/T25培養瓶 |
保藏機構 | ATCC |
供應限製 | 僅供科研使用 |
特殊特征 | 細胞捐贈者不吸煙 |
產生物質 | 人絨毛膜促性腺激素(hCG)β亞單位、腫瘤相關抗原 |
初始檢查 | 收到後檢查是否漏液,如有請拍照反饋 |
初始培養 | 顯微鏡下確認生長狀態,去封口膜,37℃培養2-3h |
培養液處理 | 棄去原培養液,換新鮮完全培養基 |
培養教程
NCI-H647人肺癌細胞培養教程
NCI-H647細胞接收與處理
收到NCI-H647細胞後,檢查培養(yang) 瓶是否有漏液情況,如有,拍照並聯係供應商。
在顯微鏡下觀察NCI-H647細胞生長狀態。
去除培養(yang) 瓶的封口膜,將T25瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中靜置2-3小時,以穩定NCI-H647細胞狀態。
換培養(yang) 液:棄去運輸中的原培養(yang) 液,換上新鮮的完全培養(yang) 基。
NCI-H647細胞傳代
傳(chuan) 代時機:當NCI-H647細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
消化處理:使用胰蛋白酶消化液處理NCI-H647細胞3-5分鍾,觀察消化程度。
傳(chuan) 代比例:通常為(wei) 1:3到1:6。
換液頻率
每周更換培養(yang) 液2次,根據NCI-H647細胞生長狀況進行調整。
觀察與記錄
顯微鏡觀察:定期使用顯微鏡觀察NCI-H647細胞形態和生長狀況,拍照並記錄。
記錄狀態:建議在NCI-H647細胞傳(chuan) 代培養(yang) 後定期拍照,記錄細胞生長狀態,便於(yu) 後續研究。
凍存
凍存條件:當需要長期保存NCI-H647細胞時,以1×10^6 cells/ml的密度將細胞凍存在液氮中。
注意事項
無菌操作:在所有操作過程中保持無菌環境,避免NCI-H647細胞汙染。
汙染檢查:定期檢查NCI-H647細胞是否有細菌、真菌或支原體(ti) 汙染,使用經過過濾的培養(yang) 基和試劑。
細胞狀態監測:觀察NCI-H647細胞形態是否正常,細胞邊緣應清晰且透亮。
傳(chuan) 代操作:確保適當濃度的胰蛋白酶使用,避免過度消化,傳(chuan) 代比例合適。
常見問題及解決方法
細胞汙染:嚴(yan) 格無菌操作,定期檢測支原體(ti) ,使用經過過濾的培養(yang) 基和試劑。
細胞生長緩慢或停滯:確保使用NCI-H647細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基,定期更換新鮮培養(yang) 基,檢查培養(yang) 箱的溫度和CO2濃度。
細胞形態異常:確保消化時間適中,傳(chuan) 代比例合適,避免NCI-H647細胞過度密集或稀疏。
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STR鑒定及相關
Markers: | |
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 9,11 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 12,15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22,24 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 17 |
參考文獻
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