NCI-H661人大細胞肺癌細胞

NCI-H661是1982年來自一名43歲白人男性大細胞肺癌患者的淋巴結中建立的人大細胞肺癌細胞係，可用於(yu) 癌症研究。

NCI-H661細胞為(wei) 超六倍體(ti) ，具有模態數142，範圍在130到153之間。每個(ge) 細胞有70多條標記染色體(ti) ，包括t(1p10q)、del(1)(q11/q12)、6q+、2q+、der(20)t(12;20)(q11;q13)，其中一些標記物在每個(ge) 細胞中存在2到3個(ge) 拷貝。大多數細胞也有5到10個(ge) 微染色體(ti) （穩心樣）。結構正常的N2、N4和N9染色體(ti) 缺失，同時存在兩(liang) 個(ge) 拷貝的X染色體(ti) 和多個(ge) 拷貝的Y染色體(ti) 。

NCI-H661細胞具有以下特性和特征

NCI-H661細胞分子特征

• 角蛋白和波形蛋白纖維染色呈陽性

• 神經絲(si) 三聯體(ti) 蛋白染色呈陰性

• p53 mRNA表達水平明顯高於(yu) 正常肺細胞

• 缺乏產(chan) 生粘液和鱗狀分化的亞(ya) 顯微結構和生化證據

NCI-H661細胞其他特征

• NCI-H661細胞表達特征：角蛋白表達陽性、波形蛋白表達陽性、p53 mRNA高表達

• 基因特征：可能存在p53基因的點突變或小的變異，但沒有出現總體(ti) 性的結構DNA崎變

• NCI-H661細胞倍增時間約60小時，生長速度相對較慢
  

• NCI-H661細胞形態呈上皮細胞樣，生長特性為(wei) 貼壁生長

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，0；PGM1，1；PGM3，1

NCI-H661細胞參數表

NCI-H661人大細胞肺癌細胞培養教程

NCI-H661細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出NCI-H661細胞凍存管，迅速置於(yu) 37°C水浴中快速解凍。

• 將NCI-H661細胞懸液轉移到含有預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H661細胞，並轉移到培養(yang) 瓶中。

• NCI-H661細胞接種密度約為(wei) 2-3 × 10^4 cells/cm²。

• 將NCI-H661細胞置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

NCI-H661細胞日常培養

• 每2-3天更換一次NCI-H661細胞培養(yang) 基。

• 觀察並記錄NCI-H661細胞生長狀態，包括細胞形態和密度。

NCI-H661細胞傳代

• 當NCI-H661細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 用PBS洗滌NCI-H661細胞層1-2次。

• 加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液，在37°C消化2-3分鍾。

• 加入完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打使NCI-H661細胞分散。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H661細胞，並按1:2的比例進行傳(chuan) 代。

NCI-H661細胞凍存

• 收集對數生長期的NCI-H661細胞。

• 製備凍存液：90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO。

• 調整NCI-H661細胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。

• 將NCI-H661細胞懸液分裝到凍存管中。

• 使用程序降溫盒或梯度降溫，最終轉移到液氮中長期保存。

NCI-H661細胞培養注意事項

• 定期檢查NCI-H661細胞是否有汙染。

• 觀察NCI-H661細胞形態，保持上皮細胞樣特征。

• 控製傳(chuan) 代次數，建議使用10代以內(nei) 的NCI-H661細胞。

• 定期進行支原體(ti) 檢測。

• 嚴(yan) 格遵守無菌操作規程。

特殊說明

• NCI-H661細胞的倍增時間約為(wei) 60小時，相對生長較慢。

• 培養(yang) 過程中注意觀察NCI-H661細胞的貼壁狀態。

常見問題解答

• 傳(chuan) 代比例對NCI-H661細胞實驗結果的影響：

• 傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2有助於(yu) 保持適當的NCI-H661細胞密度，確保細胞正常生長。

• 過高的傳(chuan) 代比例可能導致NCI-H661細胞密度過低，生長緩慢，影響細胞活力。

• 過低的傳(chuan) 代比例可能導致NCI-H661細胞過度密集，影響細胞形態和代謝特性。

  
  

• 確保NCI-H661細胞健康狀態的方法：

• 定期觀察NCI-H661細胞形態，保持上皮細胞樣特征。

• 使用10代以內(nei) 的NCI-H661細胞，避免長期傳(chuan) 代。

• 定期進行支原體(ti) 檢測，確保無汙染。

• 嚴(yan) 格遵守無菌操作規程。

  
  

• 不同培養(yang) 基對NCI-H661細胞生長特性的影響：

• 推薦使用RPMI 1640基礎培養(yang) 基，添加10% FBS和PS。

• 在這種標準培養(yang) 條件下，NCI-H661細胞的倍增時間約為(wei) 60小時。

  
  

• NCI-H661細胞對化療藥物的敏感性：

• 具體(ti) 化療藥物的敏感性信息可能需要進一步實驗驗證。

• NCI-H661細胞可能對肺癌常用化療藥物表現出特定的反應模式。