nci-h69細胞（人小細胞肺癌細胞）

NCI-H69人小細胞肺癌細胞源自一位55歲患有小細胞肺癌的白人男性的胸腔積液轉移病灶。

nci-h69細胞模態數=76至78；範圍=40到87，nci-h69細胞是一種非整倍體(ti) 的人類男性細胞係。在這個(ge) 亞(ya) 四倍體(ti) 細胞係中，注意到許多正常染色體(ti) 的單體(ti) 性和雙體(ti) 性；然而，注意到涉及許多缺失染色體(ti) 的易位和缺失，這些染色體(ti) 重排似乎是穩定的，通常是成對的。共鑒定出12條標記染色體(ti) ，包括：der（16）t（1；16）（q21；q23）、der（22）t（4；22）（q12；q13）、dr（12）t（11；12）（q23；p12）、del（17）（p11）、der。

Nci-h69細胞特征、特性

分子特征

• 癌症基因表達: myc+, myb+, fes+, fms+, raf+, ras+; N-myc基因擴增,mRNA和蛋白質表達; C-myc mRNA表達水平較低,但不表達蛋白質。

• 其他基因表達: c-myb, v-fes, v-fms, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras和N-ras mRNA均有表達。

• 表達標記: 胰島素樣生長因子II (IGF-II); 細胞角蛋白染色呈陽性。

• 同工酶表達: AK-1,1; ES-D,2; G6PD,B; GLO-I,1-2; Me-2,1; PGM1,2; PGM3,1。

細胞特性

• 生長特性: 懸浮生長,形成細胞聚團; 可適應在搖瓶或旋轉瓶係統中生長; 細胞聚集生長,導致細胞計數不準確。

• 形態特征: 保留小細胞癌的形態和超微結構; 具有APUD (Amine Precursor Uptake and Decarboxylation) 細胞特征。

• 致瘤性: 在裸小鼠身上可致瘤; 形成的腫瘤具有典型小細胞癌組織學特征。

• 染色體(ti) 特征: 非整倍體(ti) 。

• 體(ti) 外特性: 在軟瓊脂中會(hui) 形成集落。

其他特征

• 神經內(nei) 分泌標誌物表達: 神經元特異性烯醇化酶(NSE), 突觸素(SYN), 嗜鉻粒蛋白A(CgA)。

• 神經肽表達: 促腎上腺皮質激素(ACTH), 生長抑素(SS)。

• 基因突變: TP53基因突變; 可能存在RB1基因失活。

• 藥物敏感性: 對某些化療藥物如順鉑、依托泊苷等表現出一定的敏感性; 可能發展出耐藥性。

• 轉移潛能: 具有一定的轉移潛能。

Nci-h69細胞參數表

nci-h69人小細胞肺癌細胞培養教程

複蘇步驟

• 從(cong) 液氮中取出凍存的NCI-H69細胞，迅速放入37°C水浴中融化。

• 將融化的NCI-H69細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用預熱的完全培養(yang) 基重懸NCI-H69細胞。

• 將NCI-H69細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中，放入37°C、5% CO2培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 。

培養注意事項

• NCI-H69細胞以懸浮方式生長，會(hui) 形成細胞聚團。

• 在培養(yang) NCI-H69細胞2-4小時後需觀察細胞狀態。

• 由於(yu) NCI-H69細胞聚集，計數可能不準確，需特別注意。

• 在操作NCI-H69細胞時要嚴(yan) 格遵循無菌操作規程，避免汙染。

• 培養(yang) 基應避免長時間暴露在室溫或高溫環境中。

• NCI-H69細胞僅(jin) 用於(yu) 科研目的，並在有效期內(nei) 使用。

傳代方法

• 收集NCI-H69細胞懸液，以1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清液，用新鮮的完全培養(yang) 基重懸NCI-H69細胞。

• 按照1:2到1:3的比例進行NCI-H69細胞的傳(chuan) 代。

• 通常每3-4天傳(chuan) 代一次，或當NCI-H69細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

凍存方法

• 收集對數生長期的NCI-H69細胞。

• 製備凍存液（55%基礎培養(yang) 基，40% FBS，5% DMSO）。

• 將NCI-H69細胞懸浮在凍存液中，轉移到凍存管中。

• 使用程序降溫盒或細胞凍存盒，將NCI-H69細胞緩慢降溫至-80°C。

• 24小時後將NCI-H69細胞轉移到液氮中進行長期保存。

其他注意事項

• 汙染檢測：為(wei) 確保培養(yang) 基無細菌和真菌汙染，應使用無菌操作技術，並在生物安全櫃中進行所有操作。使用經過滅菌的培養(yang) 基和器具，定期對培養(yang) 基進行細菌和真菌檢測，可使用培養(yang) 法或PCR方法。

• 血清和抗生素的添加：在無菌條件下，將適量的FBS和P/S加入到基礎培養(yang) 基中，輕輕混勻以避免產(chan) 生氣泡。如果使用專(zhuan) 用培養(yang) 基，通常已包含必要的血清和抗生素，通常無需額外添加。

培養建議

• NCI-H69細胞是懸浮生長的細胞，容易形成細胞聚團，傳(chuan) 代時需要離心收集NCI-H69細胞，注意不可直接倒掉培養(yang) 液。

• 使用搖瓶或旋轉瓶係統培養(yang) NCI-H69細胞可能會(hui) 提高細胞的生長效果。

• 培養(yang) 條件應保持在37°C和5%的CO2濃度，以確保NCI-H69細胞的最佳生長環境。