NCI-H82細胞（人小細胞肺癌細胞）

NCI-H82人小細胞肺癌細胞係是一種上皮樣細胞係，於(yu) 1978年由A.F. Gazdar及其同事從(cong) 一名40歲白人男性肺癌患者的胸腔積液中分離；來源於(yu) 轉移部位、胸腔積液。NCI-H82細胞係常用於(yu) 癌症研究，特別是小細胞肺癌。

NCI-H82細胞係具有接近三倍體(ti) 的染色體(ti) 數目，模式染色體(ti) 數目為(wei) 58，發生率為(wei) 44%，多倍體(ti) 為(wei) 3%。在核型分析中，可以識別出兩(liang) 個(ge) 不同的亞(ya) 群，其中常見的標記染色體(ti) 有der（1）t（1；709p13；p11）、t（13q；HSR；15q）和der（190t（19；？）（q13.4；？）。一個(ge) 亞(ya) 群具有der（3）t（3；20）（p11；p11？）、t（3q19p）、i（7q）和一個(ge) 來源不明的微小染色體(ti) ；另一個(ge) 亞(ya) 群則有t（1q17p）、del（1）（q21）、der（3）t（3；7）（p12；q11）加上另外兩(liang) 個(ge) 標記。每個(ge) 細胞都有兩(liang) 個(ge) 正常的X染色體(ti) 拷貝，但未檢測到Y染色體(ti) 。

NCI-H82細胞具備以下特性特征

分子特征

• 表達神經元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶

• 產(chan) 生大小異常的p53 mRNA (3.7 kb)

• C-myc DNA序列擴增約25倍，c-myc RNA比正常細胞增加24倍

• 表達功能性ANP受體(ti) ，但用ANP治療不會(hui) 改變它們(men) 的生長模式。

• 神經絲(si) 和波形蛋白染色呈陽性

表達特征

• 表達v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras和c-raf 1 mRNA

• 表達胰島素樣生長因子II (IGF-II)和心鈉素

• L-DOPA脫羧酶或蛙皮素的表達量未達到可檢測水平

其他特征

• 來源：40歲白人男性肺癌患者的胸腔積液（轉移灶）

• 形態學：原始腫瘤的形態不符合典型小細胞肺癌特征

• 生化和形態學上是SCLC的變種

• 致瘤性：在裸小鼠身上可致瘤

• 轉移性：來源於(yu) 胸腔積液，表明具有轉移能力

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1；Me-2，1；PGM1，1-2；PGM3，1-2
  

NCI-H82細胞參數表

NCI-H82人小細胞肺癌細胞培養教程

NCI-H82細胞解凍步驟

• 將凍存的NCI-H82細胞從(cong) 液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解凍。

• 解凍後，將NCI-H82細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H82細胞，轉移到培養(yang) 瓶中。

NCI-H82細胞傳代步驟

• 當NCI-H82細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 用PBS輕輕洗滌NCI-H82細胞。

• 加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分鍾。

• 加入等量含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H82細胞，按1:2或1:3的比例進行傳(chuan) 代。

NCI-H82細胞培養注意事項

• 操作時保持無菌環境，避免汙染。

• 培養(yang) 基含有血清和抗生素，通常無需額外添加。

• 避免將培養(yang) 基長時間放置於(yu) 室溫或高溫環境。

• 培養(yang) 基解凍後可能出現少量絮狀物，不影響使用。

• 所有操作應在有效期內(nei) 完成。

NCI-H82細胞儲存條件

• 培養(yang) 基：2℃-8℃避光儲(chu) 存。

• NCI-H82細胞：液氮中長期保存。

NCI-H82細胞關鍵培養參數

• 培養(yang) 基：使用NCI-H82細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基，成分為(wei) RPMI 1640 + 10% FBS + 青黴素/鏈黴素 + 1%穀氨酰胺 + 1%丙酮酸鈉。

• pH值：需要維持在7.2-7.4之間。

• 溫度：37°C。

• CO2濃度：5%。

• NCI-H82細胞密度：保持在約2x10^6 cells/mL。

• 無菌環境：需要嚴(yan) 格控製以避免汙染。

NCI-H82細胞生長速度和傳代頻率

• 傳(chuan) 代頻率：當NCI-H82細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代，通常需要2-3天。

• 換液頻率：每2-3天更換一次培養(yang) 基，反映了NCI-H82細胞的生長速度。

• 生長特性：NCI-H82細胞為(wei) 貼壁和懸浮混合生長。

• 細胞代數：商業(ye) 購買(mai) 的NCI-H82細胞通常在三代內(nei) ，說明這些細胞可以穩定傳(chuan) 代。