NCIH358細胞（人非小細胞肺癌細胞係）

NCI-H358是一種人非小細胞肺癌細胞係，源自一名患有細支氣管肺泡癌的患者的腫瘤組織。NCI-H358細胞係是在1981年從(cong) 一位尚未開始化療的患者的腫瘤組織中分離並建立，保留了原始腫瘤的特性，未受化療藥物的影響。NCI-H358細胞係來源於(yu) 肺部，特別是細支氣管和肺泡區域。

NCI-H358細胞具有以下特性和特征

• 分子特征：細胞質中含有Clara細胞的特征結構，這是通過超微結構研究發現的；

• 生長特征：形態呈上皮細胞樣；貼壁生長；在軟瓊脂中的克隆形成效率為(wei) 0.83%

• 表達特征：表達SP-A蛋白和RNA，這是一種重要的肺表麵活性蛋白；不表達SP-B和SP-C，這兩(liang) 種也是肺表麵活性蛋白；

• 其他特性：被歸類為(wei) 非小細胞肺癌細胞係；保留了原始腫瘤的某些特征，如Clara細胞的特征結構；

• NCIH358細胞在無胸腺裸鼠體(ti) 內(nei) 會(hui) 產(chan) 生腫瘤。
  

NCIH358細胞參數表

NCIH358人非小細胞肺癌細胞係培養教程

NCI-H358細胞複蘇步驟

• 將凍存的NCI-H358細胞快速解凍（37℃水浴，1-2 分鍾）。

• 將細胞懸液轉移到含有完全培養(yang) 基的離心管中。

• 以 1000 rpm 離心 5 分鍾，棄上清。

• 用預熱的完全培養(yang) 基重懸NCI-H358細胞。

• 將NCI-H358細胞轉移到培養(yang) 瓶中，並置於(yu) 培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 。

NCI-H358細胞的日常培養

• 每 2-3 天換液一次。

• 當細胞密度達到 70%-80% 時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代比例：1:3-1:6。

NCI-H358細胞傳代步驟

• 棄去舊培養(yang) 基。

• 用 PBS 洗滌NCI-H358細胞 1-2 次。

• 加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，37℃ 消化 3-5 分鍾。

• 顯微鏡下觀察NCI-H358細胞脫落情況。

• 加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基終止消化。

• 以 1000 rpm 離心 5 分鍾，棄上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H358細胞。

• 按傳(chuan) 代比例將NCI-H358細胞接種到新培養(yang) 瓶中。

NCI-H358細胞凍存步驟

• 製備凍存液：60% 基礎培養(yang) 基 + 30% FBS + 10% DMSO。

• 收集對數生長期的NCI-H358細胞。

• 以 1000 rpm 離心 5 分鍾，棄上清。

• 用凍存液重懸NCI-H358細胞，調整濃度至 1-2 × 10^6 cells/mL。

• 將NCI-H358細胞懸液分裝到凍存管中。

• 使用程序降溫盒將NCI-H358細胞緩慢降溫至 -80℃。

• 24 小時後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 首次傳(chuan) 代建議使用 1:2 的比例。

• 定期觀察NCI-H358細胞形態和生長狀況。

• 保持無菌操作，預防汙染。

• 定期進行支原體(ti) 檢測。

• 建議使用低代次（<20 代）的NCI-H358細胞進行實驗。

NCI-H358細胞傳代頻率調整

• 標準傳(chuan) 代周期：24-48 小時。

• 傳(chuan) 代比例：1:3-1:6。

• 傳(chuan) 代時機：當細胞密度達到 70%-80% 時進行傳(chuan) 代。

• 調整建議：

• 如果NCI-H358細胞生長較快，可以增加傳(chuan) 代比例或縮短傳(chuan) 代周期。

• 如果NCI-H358細胞生長較慢，可以減少傳(chuan) 代比例或延長傳(chuan) 代周期。

• 首次傳(chuan) 代建議使用 1:2 的比例，觀察NCI-H358細胞適應情況。

不同培養條件下NCI-H358細胞的表現

• 溫度變化：低於(yu) 37℃ 可能導致NCI-H358細胞生長減緩，高於(yu) 37℃ 可能加速生長但增加死亡率。
  

• CO2 濃度：低於(yu) 5% 可能導致培養(yang) 基 pH 升高，影響NCI-H358細胞生長；高於(yu) 5% 可能導致 pH 降低。

• 血清濃度：降低血清濃度可能減緩NCI-H358細胞生長，提高血清濃度可能加速生長。

• 培養(yang) 基類型：推薦使用 RPMI-1640，但NCI-H358細胞在其他培養(yang) 基（如 DMEM）中可能生長，但生長特性可能有所不同。