
16HBE人支氣管上皮樣細胞是從(cong) 一個(ge) 1歲男性心肺患者的支氣管中分離出來的上皮細胞係,16HBE細胞係被用SV40質粒(pSVori-)永生化。
16HBE細胞係具有了正常分化的支氣管上皮細胞的特征,包括石子樣外形,細胞角蛋白的表達,形成緊密連接的能力以及定向離子轉運。當16HBE細胞係與(yu) 空氣/液體(ti) 界麵一起培養(yang) 時,纖毛可以被檢測到。
與(yu) 許多其他呼吸細胞係不同,16HBE細胞表達高水平的囊性纖維化跨膜電導調節劑(CFTR)的mRNA和蛋白質。CFTR的表達與(yu) 多種細胞(包括16HBE細胞)中依賴cAMP的Cl-電導相關(guan) 。
16HBE 人支氣管上皮樣細胞參數表
細胞係名稱 | 16HBE (人支氣管上皮樣細胞) |
別稱 | 16-HBE14o,16-HBE,16HBE,16HBE140,16-HBEo |
種屬 | 人 |
來源 | 1歲男性心肺患者 |
細胞類型 | 人支氣管上皮細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS+1% P/S |
傳代方法 | 1:2 - 1:3,2-3天換液一次 |
生長條件 | 95%空氣 + 5%二氧化碳,37°C |
生長培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
細胞數量 | 1~3 x 10^6細胞/25cm^2培養瓶 |
其他特征 | - 經複製起點缺陷型SV40質粒(pSVori-)永生化處理 |
- 保留了正常分化的支氣管上皮細胞特征,包括鵝卵石形態、表達細胞角蛋白、細胞間緊密連接、 定向離子轉運、產(chan) 生跨上皮電阻(TEER) | |
- 表達高水平的囊性纖維化跨膜電導調節因子(CFTR)mRNA和蛋白質 | |
應用 | - 模擬氣道上皮屏障功能 |
- 研究呼吸離子轉運及CFTR功能 | |
- 建立呼吸道上皮疾病模型,如囊性纖維化、哮喘、COPD和肺癌 | |
- 模擬呼吸道上皮暴露於空氣汙染、吸煙環境和呼吸道病毒感染 | |
儲存及穩定性 | 儲存在液氮中,初始解凍後,細胞可培養至少10代,不影響細胞標誌物的表達和功能 |
其他信息 | 支原體檢測呈陰性 |
16HBE 人支氣管上皮樣細胞應用:
藥物研究與(yu) 開發:可用於(yu) 新藥篩選、疫苗研究與(yu) 開發、基因工程藥物研究與(yu) 開發、細胞工程藥物研究與(yu) 開發、以及單克隆抗體(ti) 製備等。
基礎研究:可用於(yu) 研究藥物作用機理、基因功能以及疾病發生機理等方麵。
生物製藥:可用於(yu) 疫苗生產(chan) 、基因工程藥物生產(chan) 、診斷用和藥用單克隆抗體(ti) 生產(chan) ,以及細胞工程藥物生產(chan) 等。
環狀RNA(circRNA)研究:16HBE14o-細胞係已被用於(yu) 表達環狀RNA,這在研究基因調控和表觀遺傳(chuan) 學方麵具有重要意義(yi) 。
脂質組學分析:用於(yu) 與(yu) 囊性纖維化細胞係進行比較,有助於(yu) 了解呼吸係統疾病的發病機製。
培養教程
16HBE人支氣管上皮樣細胞培養操作指南
1. 細胞複蘇:
解凍: 將含有1mL細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中迅速搖晃解凍。
混合培養(yang) 基: 加入9mL 16HBE人支氣管上皮樣細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基,混合均勻。
離心處理: 在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
培養(yang) : 將細胞懸液加入培養(yang) 瓶中,補加培養(yang) 基過夜培養(yang) 。
2. 細胞傳(chuan) 代:
準備工作: 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
消化處理: 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,然後終止消化離心取沉澱。
分瓶: 補加16HBE人支氣管上皮樣細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基,分到新的含培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3. 細胞凍存:
準備: 棄去培養(yang) 基後,PBS清洗一遍後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml含血清的培養(yang) 基終止消化。
凍存: 5min 1000rpm離心去掉上清,根據離心前的細胞數量加入凍存液,輕輕混勻,DMSO終濃度為(wei) 5%,血清為(wei) 40%,每支凍存管凍存1ml細胞懸液。
4. 培養(yang) 基本信息:
細胞類型: 16HBE人支氣管上皮樣細胞
細胞來源: 支氣管上皮組織
培養(yang) 基成分: 1640培養(yang) 基+10%胎牛血清
培養(yang) 條件: 95%空氣+5%二氧化碳,37℃
5. 注意事項:
避免細胞交叉汙染。
控製消化時間和細胞密度。
凍存時確保細胞密度和凍存液比例正確。
相關資料
- 16hbe細胞和Beas2b細胞的區別
- 16HBE細胞和BEAS-2B細胞都是常用的人類呼吸道上皮細胞係,但它們之間存在一些區別:
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STR鑒定及相關
STR點位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 10,11 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 14 |
D21S11 | 28,30.2 |
FGA | 21,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 5,14 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |
參考文獻
- 《中華腫瘤防治雜誌》 2012年12期
- 摘要:目的:研究反式-BPDE誘導正常的人支氣管上皮細胞16HBE發生惡性轉化前後自噬水平的變化...
- 《南京中醫藥大學學報》 2019年03期
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