原代小鼠氣管上皮細胞

小鼠氣管上皮細胞源自氣管組織，這是呼吸係統中一部分。氣管上皮細胞的主要功能是清除吸入氣體(ti) 中的灰塵顆粒，從(cong) 而淨化呼吸氣體(ti) 。氣管上皮不僅(jin) 是氣道與(yu) 外界環境的第一道防線，還參與(yu) 調節氣道炎症和免疫反應，起到保護作用。

氣管上皮細胞特性

• 氣管是呼吸器官的一部分，由14-16個(ge) 半環狀軟骨構成，軟骨形成"C"字形的環狀結構，軟骨間通過韌帶連接。

• 氣管上皮細胞構成氣管的表麵覆蓋層，主要由纖毛上皮細胞組成，具有淨化呼吸氣體(ti) 的功能，幫助清除吸入的灰塵顆粒。

• 氣管上皮是氣道與(yu) 外界環境接觸的第一道防線，具有保護作用，參與(yu) 氣道炎症及免疫反應。

• 小鼠氣管上皮細胞可用於(yu) 體(ti) 外培養(yang) ，與(yu) 體(ti) 內(nei) 組織相似性大，在基礎及臨(lin) 床研究中具有重要價(jia) 值。

小鼠氣管上皮細胞參數表

小鼠氣管上皮細胞培養

細胞培養

• 取出25cm²培養(yang) 瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO₂細胞培養(yang) 箱中靜置3-4小時，以穩定細胞狀態。

• 待細胞達到80%匯合時準備進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

細胞傳代

• 吸出25cm²培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yang) 瓶中，37℃溫浴3分鍾左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後吸棄消化液，再加入完全培養(yang) 液終止消化。

• 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例進行接種傳(chuan) 代，補充新鮮的完全培養(yang) 基至5ml，放入37℃，5%CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 待細胞完全貼壁後，培養(yang) 觀察。每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yang) 基。

注意事項

• 培養(yang) 基於(yu) 4℃條件下可保存3-6個(ge) 月。

• 細胞培養(yang) 過程中，注意保持無菌操作。

• 傳(chuan) 代培養(yang) 過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會(hui) 影響細胞貼壁及其生長狀態。

• 建議收到細胞後前3天每個(ge) 倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態。

• 若細胞因運輸等問題導致狀態不穩定或汙染，請及時聯係技術支持，詳盡告知具體(ti) 情況，便於(yu) 跟蹤解決(jue) 。

• 該細胞僅(jin) 可用於(yu) 科研。

氣液相界麵培養

• 調整細胞密度後，以7.5×10⁴/cm²接種至預先鋪有胎盤膠原的Millicell小室中，同時下室也加入含有5%FBS小鼠氣管生長培養(yang) 基，置37℃、5%CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 24小時。

• 24小時後更換無血清的小鼠氣管生長培養(yang) 基繼續培養(yang) 。每隔2天換液1次，直到用Millicell-ERS阻力係統測細胞跨膜壓差>1000Ω·cm²。

• 去掉上室的培養(yang) 基，建立氣液相界麵培養(yang) 。下室繼續加小鼠氣管生長培養(yang) 基培養(yang) ，每隔2天換液1次。氣液相界麵培養(yang) 第10-15天的細胞用於(yu) 實驗。