
大鼠支氣管上皮細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:支氣管組織
- 細胞特征:貼壁 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
大鼠支氣管上皮細胞是從(cong) 大鼠的支氣管組織中分離出上皮細胞,利用特定的酶解和分離技術提取細胞而獲取。
大鼠支氣管上皮細胞具有貼壁生長特性,呈鋪路石狀或不規則形態。
大鼠支氣管細胞及其特征
支氣管上皮細胞的組成:由纖毛、無纖毛和能分泌黏液的細胞組成。
主要功能:形成物理屏障,防止有毒物質侵入;產(chan) 生和分泌化學介質和細胞因子,構建宿主防禦係統。
細胞構成:基細胞、杯狀細胞和纖毛細胞,形成基底柱狀結構,並清除黏液纖毛。
生理變化:包括支氣管炎、支氣管擴張和支氣管癌。
氣管結構:包括軟骨、肌肉、結締組織和黏膜構成,氣管軟骨為(wei) "C"字形。
細胞特性:組織來源於(yu) 正常氣管組織;通過廣譜角蛋白免疫熒光染色鑒定;細胞純度高於(yu) 90%;不含有多種病原體(ti) 和細菌;細胞生長方式為(wei) 鋪路石狀、不規則細胞,貼壁培養(yang) 。
大鼠支氣管上皮細胞參數表
細胞名稱 | 大鼠支氣管上皮細胞(kaiyun网站安全) |
組織來源 | SD大鼠(出生3-4周),5-7隻 |
規格 | 5×10^5 cells/T25培養瓶 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養基 | 原代上皮細胞專用培養基 |
細胞汙染 | HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
組織來源 | 正常支氣管組織 |
生長狀態 | 貼壁生長 |
細胞特性 | 組織來源於(yu) 實驗動物的正常氣管組織; 經鑒定細胞純度高於(yu) 90%; 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌; 細胞生長方式為(wei) 鋪路石狀、不規則細胞 |
細胞鑒定 | 廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
培養條件 | 37℃,CO2: 5% |
重要性 | 在呼吸係統疾病的發病機製、藥物篩選和基礎生物學研究中具有重要作用 |
適用領域 | 基礎生物學研究、呼吸係統疾病模型構建、藥物篩選、毒理學評估 |
培養教程
大鼠支氣管上皮細胞培養
傳代步驟
當細胞密度達到80%-90%時,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,在37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
觀察細胞消化情況,待大部分細胞變圓並脫落時,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入少量培養(yang) 基終止消化。
補加6-8ml/瓶的培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,進行1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液。
補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
細胞複蘇步驟
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜,或者加入10cm皿中,加入約8ml培養(yang) 基,培養(yang) 過夜。
第二天換液並檢查細胞密度。
細胞凍存步驟
當細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
棄去培養(yang) 基後,用PBS清洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶,待細胞變圓脫落後加入2ml完全培養(yang) 基終止消化。
使用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為(wei) 10%,按每1ml的數量分配到凍存管中,置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(ge) 小時後轉入液氮灌儲(chu) 存。
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參考文獻
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