
HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞
- 來源:肺;支氣管
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:HBE135-E6E7 細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:永生化HBE細胞表達高水平的表皮生長因子受體(ti) (EGFR)、轉化生長因子α(TGF-α)和雙調蛋白(AR)mRNA,但不表達表皮生長因子(EGF
HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞係來源於(yu) 一位54歲男性的正常支氣管上皮細胞,患者因鱗狀細胞癌接受了肺葉切除手術。研究人員從(cong) 其支氣管上提取細胞,並通過使用攜帶人乳頭瘤病毒(HPV)E6和E7基因的重組逆轉錄病毒(LXSN16E6E7)感染kaiyun网站安全,成功實現了HBE135細胞永生化。在含有0.4mg/mL G418的選擇性培養(yang) 基中,篩選出帶有HPV基因的細胞。
HBE135-E6E7細胞係被廣泛用於(yu) 肺癌及支氣管上皮細胞的生長和分化研究。HBE135-E6E7細胞係(ATCC編號:CRL-2741)為(wei) 研究肺癌發生機製及其潛在治療方法提供重要的實驗平台。
HBE135-E6E7細胞特性特征
基因表達:HBE135-E6E7細胞係表達高水平的表皮生長因子受體(ti) (EGFR)、轉化生長因子α(TGF-α)和雙調蛋白(AR)mRNA,但不表達表皮生長因子(EGF)。這種基因表達模式使其成為(wei) 研究肺癌及相關(guan) 疾病的重要模型。
永生化機製:HBE135-E6E7細胞通過HPV-16 E6/E7基因的表達實現永生化,這兩(liang) 個(ge) 基因的表達抑製了細胞周期調控相關(guan) 蛋白(如p53和Rb),從(cong) 而使細胞能夠無限增殖。
HBE135-E6E7細胞係廣泛應用於(yu) 支氣管上皮細胞的生長、分化及其在肺癌發生發展中的研究。
HBE135-E6E7細胞還可作為(wei) cDNA微陣列研究的參考,用於(yu) 分析與(yu) 臨(lin) 床結果或腫瘤生物學相關(guan) 的癌症圖譜。
HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞參數表
細胞名稱 | HBE135-E6E7(人支氣管上皮細胞) |
細胞別稱 | HBE 135-E6E7; HBE 135-E6/E7 |
來源 | 正常人支氣管上皮細胞(54歲男性,因鱗狀細胞癌接受肺葉切除術) |
ATCC貨號 | CRL-2741 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,呈貼壁生長 |
細胞數量 | >1x10^6 細胞 |
生物安全等級 | BSL-2 |
用途 | 僅供科研使用 |
轉化機製 | 通過HPV E6/E7基因的表達實現永生化 |
基因特征 | 表達高水平的EGFR、TGF-α和AR mRNA,不表達EGF |
培養基 | HBE135-E6E7 細胞專用培養基 |
傳代比例 | 1:2 - 1:3;每2-3次/周 |
培養環境 | 95%空氣,5%二氧化碳;培養溫度 37℃;濕度 70%-80% |
存儲條件 | -80℃或液氮中保存 |
細胞檢測 | 細菌檢測 陰性;真菌檢測 陰性;支原體檢測 陰性 |
細胞生長狀態 | 形態正常,生長良好 |
增殖特性 | 細胞在體外可持續增殖,適合長期培養 |
應用領域 | 呼吸係統疾病研究、肺癌研究、藥物篩選、病毒學研究等 |
參考文獻 | 可作為cDNA微陣列研究的參考,用於分析與臨床結果或腫瘤生物學相關的癌症圖譜。 |
培養教程
HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞培養教程
HBE135-E6E7細胞複蘇
收到HBE135-E6E7細胞後,檢查包裝是否完好。外壁用75%酒精消毒,確保無汙染。
將HBE135-E6E7細胞瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱內(nei) 靜置2-3小時,使細胞適應培養(yang) 環境。
顯微鏡下觀察HBE135-E6E7細胞的貼壁情況,確保細胞狀態正常。
若HBE135-E6E7細胞的生長密度低於(yu) 60%,應去除運輸培養(yang) 基,加入6-8 mL新配製的完全培養(yang) 基。
若細胞密度達到70%-80%,可以進行傳(chuan) 代操作。
HBE135-E6E7細胞傳代
當HBE135-E6E7細胞生長密度達到70%-80%時,建議進行傳(chuan) 代。傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:3。
使用PBS輕輕洗滌HBE135-E6E7細胞,去除殘留的培養(yang) 基。
加入0.25%胰酶消化細胞,待HBE135-E6E7細胞變圓和脫壁後,輕輕吹打懸浮。
加入新鮮培養(yang) 基,將HBE135-E6E7細胞重新分裝到新的培養(yang) 瓶中。
傳(chuan) 代時,必須用新鮮的培養(yang) 基替換運輸用培養(yang) 基,確保HBE135-E6E7細胞的正常增殖。
傳(chuan) 代後的HBE135-E6E7細胞需放回37℃的培養(yang) 箱中,維持其增殖和生長。
HBE135-E6E7細胞凍存
HBE135-E6E7細胞在良好生長狀態時可進行凍存。凍存液推薦使用含10% DMSO和90% FBS的混合液,將HBE135-E6E7細胞懸浮後分裝至凍存管中。
將裝有HBE135-E6E7細胞的凍存管在-80℃冰箱中預凍過夜,隨後轉移至液氮罐中保存,以確保HBE135-E6E7細胞的長期儲(chu) 存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 9,11 |
D2S1338 | 16,17 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 13,16 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 24,25 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 12,16 |
TH01 | 5,6 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
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