
小鼠肝內(nei) 膽管上皮細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:肝髒組織
- 細胞特征:貼壁 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:原代上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:肝內(nei) 膽管上皮細胞調控激素分泌和吸收,保持膽小管結構,參與(yu) 免疫應答。
小鼠肝內(nei) 膽管上皮細胞分離自肝髒組織。肝內(nei) 膽管上皮細胞約占據肝細胞總數的5%,形成複雜的網狀管形結構,通過調控激素的分泌和吸收,以維持膽小管的結構,並參與(yu) 免疫應答。肝內(nei) 膽管上皮細胞在肝髒的代謝、排泌和免疫過程中扮演著關(guan) 鍵角色,對於(yu) 肝髒疾病的發展起著重要作用。
小鼠肝內膽管上皮細胞特性
肝內(nei) 膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%,形成複雜的網狀管形結構。
肝內(nei) 膽管上皮細胞調控激素分泌和吸收,保持膽小管結構,參與(yu) 免疫應答。
肝內(nei) 膽管上皮細胞在肝髒代謝、排泌和免疫過程中起重要作用,對肝髒疾病發展具關(guan) 鍵性。
研究表明,原發性硬化性膽管炎和膽管癌等疾病均以肝內(nei) 膽管上皮細胞為(wei) 病變靶位,引發肝內(nei) 膽管損傷(shang) 。
小鼠肝內膽管上皮細胞參數表
產品名稱 | 小鼠肝內膽管上皮細胞(kaiyun网站安全) |
組織來源 | 肝髒組織 |
產品規格 | 5×10⁵ cells/T25 細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 小鼠肝內膽管上皮細胞分離自肝髒組織 |
細胞分離方法 | 膠原酶灌注消化法和膠原酶-DNA酶聯合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中,通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備。 |
質量檢測 | 通過Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 |
包被條件 | 鼠尾膠原Ⅰ (2-5 μg/cm²) |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培養條件 | 氣相:空氣95%;CO₂ 5% |
培養教程
小鼠肝內膽管上皮細胞培養教程
細胞傳代步驟
細胞密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加2ml消化液(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。
細胞複蘇步驟
解凍細胞懸液。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yang) 基,培養(yang) 過夜)。
第二天換液並檢查細胞密度。
細胞凍存步驟
細胞生長狀態良好時進行凍存。
棄去培養(yang) 基後,PBS清洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入2ml完全培養(yang) 基終止消化,可使用血球計數板計數。
在1000RPM離心5分鍾去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為(wei) 10%。加入DMSO後迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80℃冰箱,至少2小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次取用。
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STR鑒定及相關
參考文獻
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