
ETK-1細胞(人肝內(nei) 膽管癌細胞)
- 來源:肝
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:ETK-1細胞表現出高度的生物學異質性,可能與(yu) 多種致病因素、基因突變及分子表達譜的變化有關(guan)
ETK-1細胞係是從(cong) 一名61歲日本女性的肝內(nei) 膽管癌轉移性腹水中分離。ETK-1細胞最初被誤認為(wei) 受到了SSP-25細胞的汙染,在某些文獻中被錯誤地標記為(wei) SSP-25汙染的細胞係。然而實際情況是SSP-25被ETK-1細胞係汙染,而非反過來。ETK-1細胞係在研究肝內(nei) 膽管癌的生物學特性及致病機製方麵具有重要作用。
ETK-1細胞係通過與(yu) 正常肝細胞的蛋白質組進行比較,研究人員能夠識別出在肝內(nei) 膽管癌中的差異表達蛋白,這對疾病標誌物的發現及其潛在治療靶點的開發具有重要意義(yi) 。
ETK-1細胞參數表
細胞名稱 | ETK-1細胞(人肝內膽管癌細胞) |
細胞別稱 | ETK1; 人肝內膽管癌細胞 |
來源 | 肝內膽管癌轉移性腹水(來自61歲日本女性) |
性別/年齡 | 女性 / 61歲 |
組織來源 | 肝髒 |
疾病類型 | 肝內膽管癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma, iCCA) |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞規格 | 1×10^6細胞/T25培養瓶或1mL凍存管 |
細胞代數 | 10代以內 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | 89% RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳;溫度:37℃;濕度:70%-80% |
傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
傳代頻率 | 2-3次/周 |
凍存條件 | 90% 胎牛血清 + 10% DMSO,液氮儲存 |
細胞貨期 | 2-3周 |
用途 | 僅供科研使用 |
BSL等級 | BSL 1 |
背景介紹 | 起初被錯誤報告為SSP-25汙染的細胞係,後確認SSP-25實際上是受到ETK-1的汙染。 |
運輸條件 | 幹冰運輸及複蘇好存活細胞 |
細胞狀態確認 | 收到細胞後需在顯微鏡下確認細胞狀態,觀察生長和貼壁情況 |
注意事項 | 運輸用的培養基不能再用來培養細胞,需更換為新配製的培養基。 |
培養教程
ETK-1人肝內膽管癌細胞培養教程
ETK-1細胞的接收與初步處理
收到ETK-1細胞後,首先檢查培養(yang) 瓶是否有破損、漏液等異常情況。如發現問題,及時拍照並與(yu) 供應商聯係。
使用75%酒精對培養(yang) 瓶外表進行消毒,確保運輸中的表麵汙染得到清除。
將培養(yang) 瓶靜置於(yu) 37℃培養(yang) 箱內(nei) 2-3小時,使ETK-1細胞恢複狀態。
用顯微鏡檢查ETK-1細胞形態,記錄細胞狀態並拍攝照片,確保在運輸過程中未發生明顯損傷(shang) 。
觀察ETK-1細胞的貼壁情況和生長密度。如果密度低於(yu) 60%,可以更換培養(yang) 基,加入新鮮完全培養(yang) 基(6-8 mL),繼續培養(yang) 。
如果密度達到70%-80%,可以開始進行ETK-1細胞的傳(chuan) 代。
ETK-1細胞的傳代步驟
傳(chuan) 代比例:根據ETK-1細胞的生長情況,一般推薦傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4,具體(ti) 比例應根據細胞的密度和狀態靈活調整。
當ETK-1細胞的密度達到適當要求時,使用0.25%胰酶進行細胞消化,消化時間控製在2-3分鍾,觀察ETK-1細胞逐漸變圓和脫落。
消化後,加入預冷的完全培養(yang) 基中和胰酶,並輕輕吹打ETK-1細胞使其完全懸浮。
取適量ETK-1細胞懸液,按照所需比例接種到新的培養(yang) 瓶中,補充完全培養(yang) 基至適當體(ti) 積,繼續培養(yang) 。
ETK-1細胞的凍存
凍存液配製:凍存液由90%的胎牛血清和10%的DMSO組成,需現用現配,以保證ETK-1細胞凍存時的最佳保護效果。
選擇對數生長期的ETK-1細胞進行凍存,確保細胞在此階段狀態最佳。
將收集到的ETK-1細胞懸液分裝至凍存管中,標注細胞編號、日期等信息。
將凍存管逐步降溫(可在-80℃冰箱中過夜),然後轉移至液氮罐中長期保存。
注意事項
細胞運輸:運輸ETK-1細胞時需使用幹冰或其他低溫設備,確保運輸過程中溫度保持在低於(yu) -80℃的環境,避免細胞損傷(shang) 。
細胞監控:定期使用顯微鏡觀察ETK-1細胞的生長狀態,確保細胞貼壁良好,形態正常,無汙染跡象。
生物安全等級:ETK-1細胞屬於(yu) BSL 1級別細胞,符合基礎生物安全實驗室的要求。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 11 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 10,12 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8 |
vWA | 14,17 |