
RBE細胞係(人肝膽管癌細胞係)
- 來源:肝;肝膽管
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:RBE細胞能夠分泌:癌胚抗原(CEA)和糖類抗原19-9(CA19-9)
RBE細胞係來源於(yu) 一位64歲日本女性的肝內(nei) 膽管癌(ICC)樣本。RBE細胞能夠分泌兩(liang) 種重要的癌症標誌物——癌胚抗原(CEA)和糖類抗原19-9(CA19-9)。
RBE人肝膽管癌細胞係參數表
細胞名稱 | RBE細胞係(人肝膽管癌細胞係) |
細胞別稱 | reb; |
別名 | 人肝膽管癌細胞 |
來源 | 64歲日本女性肝內膽管癌患者 |
形態 | 上皮樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
種屬 | 人源 |
組織來源 | 肝膽管 |
培養基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 |
抗生素 | G/A(慶大黴素-兩性黴素B混合溶液) |
培養環境 | 37°C;95%空氣,5%二氧化碳 |
傳代時間 | 約3天可長滿培養皿 |
換液頻率 | 根據細胞生長情況決定 |
傳代比例 | 根據細胞生長情況決定 |
分泌物 | CEA(癌胚抗原)、CA19-9(糖類抗原19-9) |
輻射研究 | 可用於質子輻射的劑量依賴性相對生物效應(RBE) |
安全檢測 | 支原體、細菌、酵母和真菌檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
生物安全 | 建議在二級生物安全台內操作 |
凍存條件 | 使用細胞保存液,液氮存儲 |
STR鑒定 | 已通過 |
應用領域 | 癌症研究、藥物篩選、輻射生物學研究 |
培養教程
RBE人肝膽管癌細胞係培養教程
RBE細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的RBE細胞,迅速解凍以保持RBE細胞的活力。
將解凍後的RBE細胞懸液轉移至含有預熱培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。
輕輕搖晃培養(yang) 瓶,以確保RBE細胞均勻分布。
RBE細胞的常規培養
RBE細胞為(wei) 貼壁生長,呈上皮細胞樣形態。
RBE細胞通常在3天內(nei) 會(hui) 長滿培養(yang) 皿。
根據RBE細胞生長情況,每2-3天更換一次培養(yang) 基。
RBE細胞的傳代步驟
當RBE細胞生長至80-90%匯合度時,進行傳(chuan) 代。
吸除舊培養(yang) 基,用PBS輕輕清洗RBE細胞1-2次。
加入適量的胰酶-EDTA溶液,37°C消化3-5分鍾以分離RBE細胞。
輕輕拍打培養(yang) 瓶,觀察RBE細胞是否脫落。
用含血清的培養(yang) 基終止消化。
收集RBE細胞懸液,1000rpm離心5分鍾。
棄去上清,用新鮮培養(yang) 基重懸RBE細胞。
按1:2或1:3的比例,將RBE細胞分裝至新的培養(yang) 瓶中,添加適量的新鮮培養(yang) 基,並放入CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
防止RBE細胞汙染
定期使用硫酸銅溶液擦拭CO₂培養(yang) 箱內(nei) 部以防止RBE細胞汙染。
在培養(yang) 箱水盤中加入飽和硫酸銅溶液或消毒磷酸氫二鈉高鹽液體(ti) ,以防黴菌汙染RBE細胞。
RBE細胞培養注意事項
操作時需在生物安全櫃內(nei) 進行,以保持RBE細胞的無菌環境。
定期觀察RBE細胞形態和生長狀況,避免RBE細胞過度生長或長期處於(yu) 高密度狀態。
定期進行支原體(ti) 等汙染檢測,以確保RBE細胞的純淨。
RBE細胞汙染常見症狀
細菌汙染:培養(yang) 基渾濁,RBE細胞生長減慢或停止,RBE細胞形態異常。
酵母和真菌汙染:培養(yang) 基表麵出現白色或黑色斑點,培養(yang) 基混濁,RBE細胞生長受阻。
支原體(ti) 汙染:RBE細胞生長減慢,RBE細胞形態變異,如細胞變小或圓形,RBE細胞核染色質邊緣化。
預防RBE細胞黴菌汙染
定期清潔和消毒RBE細胞培養(yang) 箱及工作台。
在培養(yang) 箱水盤中添加飽和硫酸銅或消毒磷酸氫二鈉高鹽液體(ti) ,以防黴菌滋生。
在生物安全櫃內(nei) 進行所有RBE細胞操作,使用無菌耗材和試劑,並定期更換培養(yang) 基。
相關資料
STR鑒定及相關
Markers: | |
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,24 |
D3S1358 | 14,15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 10,11 |
D18S51 | 13,15 |
D19S433 | 14,15.2 |
D21S11 | 29 |
FGA | 19,24 |
Penta D | 12 |
Penta E | 18 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8 |
vWA | 20 |