IMCD3細胞（小鼠腎髒內(nei) 髓集合管3上皮細胞） （暫不提供）

IMCD3細胞係是一種源自成年小鼠腎髒內(nei) 髓集合管上皮細胞的細胞係，最早於(yu) 1991年由Michael Rauchman通過顯微解剖技術從(cong) SV40早期區域轉基因小鼠（Tg(SV40E)bri/7）分離。IMCD3細胞係經過SV40大T抗原的介導轉化，具有永生化特性，廣泛用於(yu) 腎髒生理與(yu) 病理機製的研究。

IMCD3細胞從(cong) 小鼠腎髒內(nei) 髓集合管末端部分獲取，通過顯微解剖技術分離出集合管的末端三分之一的小管，並在特定培養(yang) 基中培養(yang) 擴增，最終通過克隆篩選獲得穩定的細胞係。IMCD3細胞具有典型的極化上皮細胞形態，保留了IMCD區域的多項功能特征。

IMCD3細胞特性特征

• 高跨上皮電阻：IMCD3細胞表現出高達1368 Ω·cm²的跨上皮電阻，表明其良好的極化狀態和緊密連接功能。
  

• 鈉通道特性：IMCD3細胞中存在對阿米洛利敏感的鈉通道，阿米洛利和心鈉素（ANP）能有效抑製從(cong) 頂端到基底的鈉通量，分別抑製41%和40%。

• 有機滲透調節物質積累：在高滲透環境下（如補充NaCl和尿素的培養(yang) 基中），細胞能夠積累主要的有機滲透調節物質，如肌醇、山梨醇、甜菜堿和甘油磷酸膽堿，這些物質幫助細胞抵禦滲透壓力。
  

• 適應極端滲透條件：IMCD3細胞可在高達910 mosmol/kg H₂O的高滲培養(yang) 基中生長，這種條件在體(ti) 內(nei) 腎髓質中存在，但對大多數其他細胞是致命的。

• 內(nei) 皮素分泌：IMCD3細胞能夠分泌內(nei) 皮素，並形成小管和緊密連接，這對腎髒功能至關(guan) 重要。
  

• 鈉通道：通過蛋白質印跡分析，確認IMCD3細胞具有阿米洛利敏感的鈉通道，這一特性對於(yu) 研究腎髒的離子轉運機製非常重要。
  

• HGF反應性：IMCD3細胞對肝細胞生長因子（HGF）有反應。

• IMCD3細胞係保留了許多與(yu) 內(nei) 髓集合管相關(guan) 的基因表達特征，適合用於(yu) 研究與(yu) 腎髒發育、功能及疾病相關(guan) 的分子機製。
  

IMCD3細胞參數表

IMCD3小鼠腎髒內髓集合管3上皮細胞培養教程

IMCD3細胞傳代步驟

• 棄去舊培養(yang) 基：將IMCD3細胞培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基棄去。

• PBS清洗：用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液清洗IMCD3細胞1-2次。

• 加入2 ml 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，37°C消化1-2分鍾，確保IMCD3細胞變圓脫落。

• 觀察IMCD3細胞脫落後，立即加入含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 將IMCD3細胞懸液轉移至離心管，1000 RPM離心4分鍾。

• 棄去上清後，用新鮮培養(yang) 基重懸IMCD3細胞，並按1:2至1:5比例接種至新培養(yang) 瓶中。

IMCD3細胞凍存步驟

• 凍存液製備：使用90% FBS和10% DMSO混合製成IMCD3細胞的凍存液。

• 在IMCD3細胞處於(yu) 對數生長期時進行收集，並將細胞濃度調整至5×10^6個(ge) 細胞/ml。

• 離心去除上清後，用凍存液重懸IMCD3細胞。

• 將重懸的IMCD3細胞分裝於(yu) 凍存管中，並標記。

• 使用程序降溫盒，先將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中冷凍至少2小時，再轉移至液氮罐保存。

IMCD3細胞複蘇步驟

• 快速解凍：從(cong) 液氮中取出IMCD3細胞凍存管，迅速放入37°C水浴中，輕輕搖晃解凍，30-60秒內(nei) 完成。

• 用70%乙醇消毒凍存管外部，將IMCD3細胞懸液轉移至離心管中，加入10 ml新鮮培養(yang) 基。
  

• 以500-1000 RPM離心5分鍾，棄去上清後，用新鮮培養(yang) 基洗滌一次。

• 細胞培養(yang) ：複蘇後的IMCD3細胞需過夜培養(yang) ，次日更換一次培養(yang) 基並檢查細胞狀態，確保IMCD3細胞正常生長。