MPC5細胞（小鼠腎足細胞）

MPC-5小鼠腎足細胞是一種通過溫度敏感的SV40大T抗原（SV40LT）轉基因永生化的細胞係，廣泛用於(yu) 研究足細胞的分化與(yu) 形態形成過程。MPC5細胞在體(ti) 外能夠模擬體(ti) 內(nei) 足細胞的發育與(yu) 成熟，增殖和分化階段均表達WT-1蛋白。在分化過程中，肌動蛋白纖維和微管的有序排列展現了足細胞在體(ti) 內(nei) 的發育機製，有助於(yu) 深入理解其成熟過程。MPC-5細胞係來自小鼠（Mus musculus）的腎小球足細胞，作為(wei) 貼壁生長的上皮樣細胞，通過SV40LT的轉基因實現永生化，使其在體(ti) 外具備長期增殖能力，適用於(yu) 腎小球功能及相關(guan) 疾病的深入研究。

MPC5細胞特性特征

• 永生化機製：MPC5細胞通過轉染編碼SV40大型T抗原（SV40LT）的溫度敏感轉基因實現永生化，使得細胞能夠在體(ti) 外長期增殖。

• WT-1蛋白：在MPC5細胞增殖和分化過程中均有表達，參與(yu) 調控足細胞的發育。
  

• MPC5細胞表現出分化足細胞的特征性抗原標記物，包括nephrin、podocin、CD2AP和突觸足蛋白（synaptopodin）。

• 在分化過程中，MPC-5細胞表現出肌動蛋白纖維和微管的有序排列，這對於(yu) 理解祖細胞在體(ti) 內(nei) 的發育和成熟過程至關(guan) 重要。
  

• 生理相關(guan) 表型：MPC-5細胞能夠提供類似於(yu) 體(ti) 內(nei) 分化腎細胞的生理相關(guan) 表型，便於(yu) 相關(guan) 研究。
  

• 穩定性與(yu) 同質性：作為(wei) 一種同質、穩定的細胞源，MPC-5細胞在實驗中表現出一致性，有助於(yu) 提高實驗結果的可靠性

MPC5小鼠腎足細胞參數表

MPC5小鼠腎足細胞培養教程

MPC5細胞複蘇

• 將凍存的MPC5細胞管在37℃水浴中迅速解凍，輕輕搖晃確保細胞完全解凍。
  

• 加入4 mL預先準備好的培養(yang) 基，混合均勻。

• 在1000 RPM條件下離心4分鍾，去除上清液。
  

• 補加1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打懸浮細胞。

• 將複蘇的MPC5細胞加入培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入約8 mL培養(yang) 基。
  

• 培養(yang) 過夜，第二天更換培養(yang) 基，並檢查細胞的生長狀態。

MPC5細胞傳代

• 當MPC5細胞密度達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。
  

• 棄去培養(yang) 上清液，使用無鈣鎂離子的PBS緩衝(chong) 液洗滌細胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察MPC5細胞是否大部分變圓並開始脫落。

• 輕敲培養(yang) 瓶，加入適量培養(yang) 基終止消化過程。

• 補加6-8 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打懸浮細胞，在1000 RPM條件下離心4分鍾，去除上清液。

• 按1:2比例將MPC5細胞分到新的含有8 mL培養(yang) 基的培養(yang) 皿中。

MPC5細胞凍存

• 當MPC5細胞生長狀態良好時，可進行凍存操作。
  

• 凍存液為(wei) 90%完全培養(yang) 基和10% DMSO。

• 棄去培養(yang) 基後，加入少量胰蛋白酶消化細胞，使MPC5細胞變圓脫落。
  

• 加入1 mL含血清的培養(yang) 基後，將細胞懸液轉移至凍存管。

• 加入10% DMSO，確保MPC5細胞在凍存時免受損傷(shang) 。隨後，放入-80℃凍存，再轉移至液氮中長期保存。