
Y1細胞係(小鼠腎上腺皮質瘤細胞係)
- 來源:腎上腺皮質瘤
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Y1細胞係對肉瘤病毒的轉化和白血病病毒的繁殖高度敏感,適合用於(yu) DNA轉化及轉染實驗。
Y1小鼠腎上腺皮質瘤細胞係是從(cong) LAF1雄性小鼠的腎上腺皮質中分離,具有上皮形態。Y1細胞係在分泌鼠類甾類激素和腎上腺皮質激素方麵表現出顯著的能力,因此在內(nei) 分泌係統研究中具有廣泛應用。
Y1細胞係的模態數為(wei) 41,範圍在40到108之間,為(wei) 超二倍體(ti) 。核型在其莖線數範圍內(nei) 相對穩定,表現出39條具有末端著絲(si) 粒的染色體(ti) 外加2條微小染色體(ti) 。此外,一些細胞可能僅(jin) 有1條微小染色體(ti) 。第一染色體(ti) 較大,而部分染色體(ti) 較小,但未檢測到特定的結構異常。
Y1細胞係特性特征
基因表達:類固醇激素
Y1細胞對小鼠痘病毒呈陰性、可用於(yu) 檢測LT毒素
Y1細胞能夠分泌鼠類甾類激素和腎上腺皮質激素、在內(nei) 分泌研究中具有重要應用價(jia) 值
病毒易感性:單純皰疹病毒;偽(wei) 狂犬病病毒;痘苗病毒;水皰性口炎病毒;人脊髓灰質炎病毒
Y1細胞係參數表
細胞名稱 | Y1細胞係(小鼠腎上腺皮質瘤細胞係) |
別稱 | Y-1; Y1; CloneY-1; CloneY1; GM05384 |
細胞來源 | LAF1雄性小鼠腎上腺皮質 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,呈貼壁生長 |
汙染檢測 | 支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 |
培養基 | F-12培養基或1640培養基 + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 37℃,5% CO₂,空氣95% |
培養基更換 | 每2-3天更換一次培養基,48小時後需更換 |
病毒易感性 | 單純皰疹病毒、偽狂犬病病毒、痘苗病毒、水皰性口炎病毒、人脊髓灰質炎病毒1 |
基因表達 | 表達類固醇激素 |
功能特征 | 能夠分泌鼠類甾類激素和腎上腺皮質激素 |
用途 | 內分泌研究、LT毒素檢測、藥物篩選、病毒學研究等 |
實驗室注意事項 | 需在無菌條件下操作,避免交叉汙染 |
保存條件 | -80℃冷凍保存,長期保存可使用液氮 |
培養教程
Y1小鼠腎上腺皮質瘤細胞係培養教程
Y1細胞複蘇
迅速從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出Y1細胞,立即放入37℃水浴鍋中,並輕輕搖晃使其快速解凍,時間不宜超過1分鍾。
將解凍後的Y1細胞轉移至含有5ml預熱的完全培養(yang) 基的15ml離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,吸棄上清液,保留Y1細胞沉澱。
用2ml完全培養(yang) 基輕柔地重懸Y1細胞,然後將其轉移至T25培養(yang) 瓶中,標記清楚。
將培養(yang) 瓶放入37℃,5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) Y1細胞。
複蘇後24小時,檢查Y1細胞的貼壁情況。
如果Y1細胞貼壁良好,吸棄舊培養(yang) 基,換上新鮮的預熱完全培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。
Y1細胞傳代
傳(chuan) 代時機:當Y1細胞生長至80%-90%匯合度時,進行傳(chuan) 代。
吸棄舊培養(yang) 基,用1ml無菌PBS潤洗Y1細胞一次,以去除殘餘(yu) 的培養(yang) 基和血清。
加入適量的0.25%胰酶,消化Y1細胞2-5分鍾,直至Y1細胞變圓、開始脫落。
加入2-3ml完全培養(yang) 基終止胰酶消化,並輕輕吹打Y1細胞使其懸浮。
以1000rpm離心5分鍾,吸棄上清,使用適量完全培養(yang) 基重懸Y1細胞。
按照1:2或1:3的比例將Y1細胞分配到新的培養(yang) 瓶中,進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
Y1細胞凍存
當Y1細胞生長至80%-90%匯合度時,準備進行凍存。
吸棄培養(yang) 基後,用PBS清洗Y1細胞以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。
用適量胰酶消化Y1細胞,終止消化後,離心收集Y1細胞。
用冷凍保護液(10% DMSO + 90% 完全培養(yang) 基)重懸Y1細胞。
將重懸後的Y1細胞分裝到凍存管中,逐步降溫:先在-80℃冰箱中過夜,隨後轉移至液氮中長期保存。
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參考文獻
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