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NCI-H295R細胞(人腎上腺皮質腺癌細胞)貨號:STM-CL-5261 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

NCI-H295R細胞(人腎上腺皮質腺癌細胞)

  • 來源:腎上腺
  • 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM/F12+0.5% ITS-G(100×)+10% FBS+1% P/S
  • 其他:NCI-H295R細胞改自多能性腎上腺皮質癌細胞係NCI-H295
Tags: 皮質腺癌細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,300.00
提供STR鑒定報告

NCI-H295R人腎上腺皮質腺癌細胞是於(yu) 1980年從(cong) 一位48歲女性腎上腺皮質癌患者的腎上腺中分離,原始細胞係命名為(wei) NCI-H295。NCI-H295R細胞係保留了生成腎上腺類固醇激素的能力,並且對血管緊張素II和鉀離子具有反應性。

NCI-H295R細胞改自多能性腎上腺皮質癌細胞係NCI-H295,通過改變培養(yang) 條件,使其群體(ti) 倍增時間從(cong) 5天縮短到2天,從(cong) 而獲得更高的生長速率。最初的NCI-H295細胞在懸浮培養(yang) 中生長,而改良後的NCI-H295R細胞則適應了單層貼壁生長。同時,還獲得了三種改良細胞株:H295R-S1、H295R-S2和H295R-S3。

NCI-H295R細胞具有以下特性和特征:

  • 分子特征:能夠產(chan) 生多種類固醇激素,包括醛固酮、皮質醇和C19類固醇;對血管緊張素II和鉀離子具有反應性。

  • 表達特征:表達多種類固醇合成相關(guan) 的基因,包括醛固酮、皮質醇和C19類固醇的合成基因;保留了產(chan) 生雄激素的能力。

  • NCI-H295R細胞形態為(wei) 上皮細胞樣;生長特性為(wei) 貼壁生長,呈單層附著培養(yang) 。

  • 在激素分泌和細胞特征上與(yu) 原代培養(yang) 的人腎上腺皮質細胞最接近

NCI-H295R細胞參數表

細胞名稱NCI-H295R細胞(人腎上腺皮質腺癌細胞)
細胞別稱NCI-H295R (別稱: H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1, h295r)
來源人(Homo sapiens)腎上腺皮質腺癌細胞
患者信息48歲,女性,黑人
建係信息1980年建係,kaiyun网站安全係為NCI-H295
生物安全等級BSL-1
細胞形態上皮細胞樣,大小約15-20μm,細胞核圓形或橢圓形
生長特性貼壁生長,單層
培養基DMEM/F12 (1:1) + 2.5% Nu-Serum + 1% ITS+ Premix
培養環境37°C, 5% CO2, 飽和濕度
傳代信息比例1:2-1:4, 換液2-3次/周, 70-80%匯合度時傳代
生長特性群體倍增時間約2天,貼壁時間約24小時
凍存液55%基礎培養基 + 40%FBS + 5%DMSO
凍存參數溫度-196°C, 密度1-2×10^6 cells/mL, 複蘇存活率≥85%
激素分泌醛固酮、皮質醇、C19類固醇(DHEA、雄烯二酮)
特殊反應性對血管緊張素II和鉀離子有反應
酶活性CYP11B1, CYP11B2, CYP17, CYP21A2
受體表達ACTH受體, 血管緊張素II受體
基因表達StAR, CYP11A1, HSD3B2, CYP17A1, CYP21A2, CYP11B1, CYP11B2
蛋白表達P450scc, 3β-HSD, P450c17, P450c21, P450c11
遺傳學特征染色體數62-65 (近三倍體), TP53突變
研究用途腎上腺皮質功能研究、激素分泌研究、環境內分泌幹擾物篩選
檢測指標基因表達、酶活性、激素水平
其他應用腎上腺皮質癌治療藥物開發,環境毒素對腎上腺皮質功能的影響研究
細胞檢測活力≥95%, 無菌(細菌、真菌、支原體均陰性)
鑒定方法人源鑒定,STR分析,PCR法檢測支原體
保藏機構及編號ATCC (CRL-2128), DSMZ (ACC 741), JCRB (JCRB1020)
相關細胞係H295R-S1, H295R-S2, H295R-S3
細胞特性培養代次建議20代以內,貼壁效率>90%
腫瘤相關特性遷移能力低,侵襲能力中等,在免疫缺陷小鼠中可形成腫瘤
轉染和藥物反應轉染效率中等(40-60%),對米托坦(Mitotane)敏感
細胞周期分布G0/G1: 60-70%, S: 15-20%, G2/M: 10-15%
其他特征基礎凋亡率<5%,高糖酵解率

培養教程

NCI-H295R人腎上腺皮質腺癌細胞培養教程

NCI-H295R細胞複蘇

  • 從(cong) 液氮中取出NCI-H295R細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中快速解凍。

  • 將NCI-H295R細胞懸液轉移到含15mL預熱培養(yang) 基的50mL離心管中。

  • 以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。

  • 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H295R細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。

  • 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

NCI-H295R細胞傳代

  • 當NCI-H295R細胞匯合度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。

  • 推薦傳(chuan) 代比例:1:2 - 1:4。

  • 用PBS洗滌NCI-H295R細胞1-2次。

  • 加入適量胰酶-EDTA消化液,37°C孵育2-3分鍾。

  • 加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基終止消化。

  • 以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。

  • 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H295R細胞,按所需比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

NCI-H295R細胞凍存

  • 凍存液配方: 55%基礎培養(yang) 基 + 40%FBS + 5%DMSO。

  • 細胞密度: 1-2 × 10^6 NCI-H295R細胞/mL。

  • 將NCI-H295R細胞懸液分裝到凍存管中,置於(yu) -80°C冰箱中緩慢降溫。

  • 24小時後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

  • 細胞形態: NCI-H295R細胞為(wei) 貼壁生長,呈上皮細胞樣形態。

  • 反應性: NCI-H295R細胞對血管緊張素II和鉀離子有反應,保留了產(chan) 生雄激素的能力。

  • 生長速率: NCI-H295R細胞群體(ti) 倍增時間約為(wei) 2天。

  • 無菌操作: 使用無菌技術操作NCI-H295R細胞,避免汙染。

  • 細胞觀察: 定期觀察NCI-H295R細胞形態和生長狀況,及時處理。

培養基組成對NCI-H295R細胞生長速度的影響

  • 通過改變NCI-H295細胞的培養(yang) 條件,改良後的NCI-H295R細胞的群體(ti) 倍增時間從(cong) 原來的5天減少到2天。推薦的培養(yang) 基組成如下:

  • DMEM/F12 (1:1)基礎培養(yang) 基

  • 2.5% Nu-Serum 或 10% 優(you) 質胎牛血清

  • 1% ITS+ Premix (含有:Insulin 6.25μg/mL, Transferrin 6.25μg/mL, Selenium 6.25ng/mL)

  • 5.35μg/mL Linoleic Acid(可選)

  • 1% 雙抗(青黴素/鏈黴素)

  • 這種優(you) 化的培養(yang) 基組成有助於(yu) 促進NCI-H295R細胞生長和維持其特性。

NCI-H295R細胞在不同培養條件下對激素的反應

  • NCI-H295R細胞保留了產(chan) 生雄激素的能力,並對血管緊張素II和鉀離子有反應。這些特性使其成為(wei) 研究腎上腺皮質功能和激素分泌的重要工具。不同的培養(yang) 條件可能會(hui) 影響NCI-H295R細胞對這些刺激的反應程度,需要通過實驗進一步驗證。

NCI-H295R細胞培養過程中的安全注意事項

  • 生物安全等級: NCI-H295R細胞的生物安全等級為(wei) BSL-1,風險較低,但仍需遵循實驗室安全規程。

  • 無菌操作: 必須嚴(yan) 格遵守無菌技術,防止NCI-H295R細胞汙染。

  • 細胞來源: NCI-H295R細胞來源於(yu) 人類腫瘤組織,處理時需小心,避免直接接觸。

  • 化學品安全: 培養(yang) 過程中使用的某些試劑(如DMSO)可能具有毒性,應按安全規程處理。

  • 廢棄物處理: 所有與(yu) NCI-H295R細胞接觸過的材料應按生物廢棄物處理規程處理。

  • 用途限製: NCI-H295R細胞僅(jin) 限於(yu) 科學研究使用,不可用於(yu) 動物或人類疾病的治療。

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AmelogeninX
CSF1PO10,12
D2S133825
D3S135815,16
D5S81812
D7S8209,12
D8S117913
D13S31713
D16S53911
D18S5117
D19S43313
D21S1132.2
FGA19.2,24
Penta D8
Penta E5,12
TH019.3
TPOX8
vWA17,18
str鑒定圖

參考文獻

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