
NCI-H295R細胞(人腎上腺皮質腺癌細胞)
- 來源:腎上腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM/F12+0.5% ITS-G(100×)+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H295R細胞改自多能性腎上腺皮質癌細胞係NCI-H295
NCI-H295R人腎上腺皮質腺癌細胞是於(yu) 1980年從(cong) 一位48歲女性腎上腺皮質癌患者的腎上腺中分離,原始細胞係命名為(wei) NCI-H295。NCI-H295R細胞係保留了生成腎上腺類固醇激素的能力,並且對血管緊張素II和鉀離子具有反應性。
NCI-H295R細胞改自多能性腎上腺皮質癌細胞係NCI-H295,通過改變培養(yang) 條件,使其群體(ti) 倍增時間從(cong) 5天縮短到2天,從(cong) 而獲得更高的生長速率。最初的NCI-H295細胞在懸浮培養(yang) 中生長,而改良後的NCI-H295R細胞則適應了單層貼壁生長。同時,還獲得了三種改良細胞株:H295R-S1、H295R-S2和H295R-S3。
NCI-H295R細胞具有以下特性和特征:
分子特征:能夠產(chan) 生多種類固醇激素,包括醛固酮、皮質醇和C19類固醇;對血管緊張素II和鉀離子具有反應性。
表達特征:表達多種類固醇合成相關(guan) 的基因,包括醛固酮、皮質醇和C19類固醇的合成基因;保留了產(chan) 生雄激素的能力。
NCI-H295R細胞形態為(wei) 上皮細胞樣;生長特性為(wei) 貼壁生長,呈單層附著培養(yang) 。
在激素分泌和細胞特征上與(yu) 原代培養(yang) 的人腎上腺皮質細胞最接近
NCI-H295R細胞參數表
細胞名稱 | NCI-H295R細胞(人腎上腺皮質腺癌細胞) |
細胞別稱 | NCI-H295R (別稱: H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1, h295r) |
來源 | 人(Homo sapiens)腎上腺皮質腺癌細胞 |
患者信息 | 48歲,女性,黑人 |
建係信息 | 1980年建係,kaiyun网站安全係為NCI-H295 |
生物安全等級 | BSL-1 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,大小約15-20μm,細胞核圓形或橢圓形 |
生長特性 | 貼壁生長,單層 |
培養基 | DMEM/F12 (1:1) + 2.5% Nu-Serum + 1% ITS+ Premix |
培養環境 | 37°C, 5% CO2, 飽和濕度 |
傳代信息 | 比例1:2-1:4, 換液2-3次/周, 70-80%匯合度時傳代 |
生長特性 | 群體倍增時間約2天,貼壁時間約24小時 |
凍存液 | 55%基礎培養基 + 40%FBS + 5%DMSO |
凍存參數 | 溫度-196°C, 密度1-2×10^6 cells/mL, 複蘇存活率≥85% |
激素分泌 | 醛固酮、皮質醇、C19類固醇(DHEA、雄烯二酮) |
特殊反應性 | 對血管緊張素II和鉀離子有反應 |
酶活性 | CYP11B1, CYP11B2, CYP17, CYP21A2 |
受體表達 | ACTH受體, 血管緊張素II受體 |
基因表達 | StAR, CYP11A1, HSD3B2, CYP17A1, CYP21A2, CYP11B1, CYP11B2 |
蛋白表達 | P450scc, 3β-HSD, P450c17, P450c21, P450c11 |
遺傳學特征 | 染色體數62-65 (近三倍體), TP53突變 |
研究用途 | 腎上腺皮質功能研究、激素分泌研究、環境內分泌幹擾物篩選 |
檢測指標 | 基因表達、酶活性、激素水平 |
其他應用 | 腎上腺皮質癌治療藥物開發,環境毒素對腎上腺皮質功能的影響研究 |
細胞檢測 | 活力≥95%, 無菌(細菌、真菌、支原體均陰性) |
鑒定方法 | 人源鑒定,STR分析,PCR法檢測支原體 |
保藏機構及編號 | ATCC (CRL-2128), DSMZ (ACC 741), JCRB (JCRB1020) |
相關細胞係 | H295R-S1, H295R-S2, H295R-S3 |
細胞特性 | 培養代次建議20代以內,貼壁效率>90% |
腫瘤相關特性 | 遷移能力低,侵襲能力中等,在免疫缺陷小鼠中可形成腫瘤 |
轉染和藥物反應 | 轉染效率中等(40-60%),對米托坦(Mitotane)敏感 |
細胞周期分布 | G0/G1: 60-70%, S: 15-20%, G2/M: 10-15% |
其他特征 | 基礎凋亡率<5%,高糖酵解率 |
培養教程
NCI-H295R人腎上腺皮質腺癌細胞培養教程
NCI-H295R細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出NCI-H295R細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中快速解凍。
將NCI-H295R細胞懸液轉移到含15mL預熱培養(yang) 基的50mL離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H295R細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
NCI-H295R細胞傳代
當NCI-H295R細胞匯合度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。
推薦傳(chuan) 代比例:1:2 - 1:4。
用PBS洗滌NCI-H295R細胞1-2次。
加入適量胰酶-EDTA消化液,37°C孵育2-3分鍾。
加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基終止消化。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H295R細胞,按所需比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
NCI-H295R細胞凍存
凍存液配方: 55%基礎培養(yang) 基 + 40%FBS + 5%DMSO。
細胞密度: 1-2 × 10^6 NCI-H295R細胞/mL。
將NCI-H295R細胞懸液分裝到凍存管中,置於(yu) -80°C冰箱中緩慢降溫。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
注意事項
細胞形態: NCI-H295R細胞為(wei) 貼壁生長,呈上皮細胞樣形態。
反應性: NCI-H295R細胞對血管緊張素II和鉀離子有反應,保留了產(chan) 生雄激素的能力。
生長速率: NCI-H295R細胞群體(ti) 倍增時間約為(wei) 2天。
無菌操作: 使用無菌技術操作NCI-H295R細胞,避免汙染。
細胞觀察: 定期觀察NCI-H295R細胞形態和生長狀況,及時處理。
培養基組成對NCI-H295R細胞生長速度的影響
通過改變NCI-H295細胞的培養(yang) 條件,改良後的NCI-H295R細胞的群體(ti) 倍增時間從(cong) 原來的5天減少到2天。推薦的培養(yang) 基組成如下:
DMEM/F12 (1:1)基礎培養(yang) 基
2.5% Nu-Serum 或 10% 優(you) 質胎牛血清
1% ITS+ Premix (含有:Insulin 6.25μg/mL, Transferrin 6.25μg/mL, Selenium 6.25ng/mL)
5.35μg/mL Linoleic Acid(可選)
1% 雙抗(青黴素/鏈黴素)
這種優(you) 化的培養(yang) 基組成有助於(yu) 促進NCI-H295R細胞生長和維持其特性。
NCI-H295R細胞在不同培養條件下對激素的反應
NCI-H295R細胞保留了產(chan) 生雄激素的能力,並對血管緊張素II和鉀離子有反應。這些特性使其成為(wei) 研究腎上腺皮質功能和激素分泌的重要工具。不同的培養(yang) 條件可能會(hui) 影響NCI-H295R細胞對這些刺激的反應程度,需要通過實驗進一步驗證。
NCI-H295R細胞培養過程中的安全注意事項
生物安全等級: NCI-H295R細胞的生物安全等級為(wei) BSL-1,風險較低,但仍需遵循實驗室安全規程。
無菌操作: 必須嚴(yan) 格遵守無菌技術,防止NCI-H295R細胞汙染。
細胞來源: NCI-H295R細胞來源於(yu) 人類腫瘤組織,處理時需小心,避免直接接觸。
化學品安全: 培養(yang) 過程中使用的某些試劑(如DMSO)可能具有毒性,應按安全規程處理。
廢棄物處理: 所有與(yu) NCI-H295R細胞接觸過的材料應按生物廢棄物處理規程處理。
用途限製: NCI-H295R細胞僅(jin) 限於(yu) 科學研究使用,不可用於(yu) 動物或人類疾病的治療。
相關資料
- PC-12細胞的分化狀態及其在神經研究中的應用
- PC-12細胞是一種源自大鼠腎上腺髓質的神經母細胞瘤細胞係,被廣泛運用於神經生理學、神經藥...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 32.2 |
FGA | 19.2,24 |
Penta D | 8 |
Penta E | 5,12 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17,18 |

參考文獻
上一篇:ACHN細胞(人腎細胞腺癌細胞)
下一篇:OS-RC-2細胞(人腎細胞癌)