COLO 320DM直腸癌細胞（人結直腸腺癌細胞）

COLO 320DM人結直腸腺癌細胞是從(cong) 一名患有結直腸腺癌的55歲白人女性患者的結腸中分離出的圓形折射細胞係。

COLO 320DM細胞為(wei) 超二倍體(ti) ，模態數為(wei) 24，範圍在49到61之間，常見9到11條標記染色體(ti) （包括M1、M2、M3、M5、M10、M11、M12、M13、M14、7p-和10q+）。在24%的檢查中期中觀察到兩(liang) 分鍾染色體(ti) 。

該細胞具有致瘤性。

COLO 320DM細胞表達血清素、去甲腎上腺素、腎上腺素、促腎上腺皮質激素（ACTH）和甲狀旁腺激素。同工酶分析顯示為(wei) ES-D 1型、G6PD B型、PEP-D 1型、PGD A型、PGM1 1型和PGM3 2型。

抗原檢測結果表明，COLO 320DM細胞對CEA、CSAp和結腸抗原3呈陰性。而角蛋白和波形蛋白則呈弱陽性。COLO 320DM細胞具有雙微染色體(ti) （DM chromosomes）。

COLO 320DM細胞特性

• COLO 320DM細胞形態: 圓形折射細胞

• 染色體(ti) 數目: 超二倍體(ti) ，常見9-11條標記染色體(ti) ，包括7p-和10q+，模態數=24，範圍=49到61

• COLO 320DM細胞具備致瘤性

• 基因表達: 血清素、去甲腎上腺素、腎上腺素、促腎上腺皮質激素、甲狀旁腺激素

• 同工酶: ES-D、G6PD、PEP-D、PGD、PGM1、PGM3

• 抗原特性: CEA、CSAp、結腸抗原3呈陰性；角蛋白和波形蛋白呈弱陽性

COLO 320DM細胞參數表

COLO 320DM細胞培養

傳代方法

• 收集懸浮的COLO 320DM細胞：將培養(yang) 瓶中的懸浮COLO 320DM細胞收集到離心管中。

• 潤洗COLO 320DM細胞：用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由於(yu) COLO 320DM細胞貼壁不牢，PBS潤洗後細胞會(hui) 脫落，PBS也要回收到離心管中。

• 加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若COLO 320DM細胞大部分變圓並脫落，迅速取出培養(yang) 瓶，輕敲幾下後加入3-4ml含10%FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 將收集到的懸浮COLO 320DM細胞、PBS清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，補加1-2mL培養(yang) 液後重懸混勻。

• 將細胞懸液按1:2的比例分到新的T25瓶中，添加6-8ml新的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力。

• 後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2至1:5的比例進行。

凍存步驟

• 收集COLO 320DM細胞：按照細胞傳(chuan) 代的過程收集消化好的COLO 320DM細胞到離心管中。

• 計數COLO 320DM細胞：使用血球計數板計數，決(jue) 定細胞的凍存密度。推薦凍存密度為(wei) 1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞/ml。

• 離心：1000rpm離心3-5分鍾，去掉上清。

• 重懸COLO 320DM細胞：用配製好的細胞凍存液重懸細胞。按每1ml凍存液含1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞/ml分配到凍存管中。

• 標記：標注好名稱、代數、日期等信息。

• 降溫：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，在-80℃冰箱中過夜。之後轉入液氮容器中儲(chu) 存，並記錄好凍存管在液氮容器中的位置。